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1、淺析中原地區(qū)微生物修復(fù)石油污染土壤的實(shí)驗(yàn)研究關(guān)鍵詞:石油殘留污染;土壤;微生物修復(fù)experientalstudyfirbialreediatinfrilntainatedsilinentralplainszhangsheng,henli,lizheng-hng,zhangui-yun,yini-ying,heze,sunzhen-hua,alin-na,ningzhu,zhangfa-angtheinstitutefhydrgelgyandenvirnentalgelgy,ags,shijiazhuang050061,hinakeyrds:ilresidualntainatin;sil;ir

2、bialreediatin我國(guó)中原地區(qū)由于石油資源的長(zhǎng)期大量開采利用,產(chǎn)生了一些環(huán)境問(wèn)題。尤其是落地原油的污染已影響土壤的質(zhì)量平安,特別是開采早期行成的石油污染,在土壤中經(jīng)長(zhǎng)期的自然降解許多易揮發(fā)和易降解的組分均已降解,土壤中殘留的難降解石油組分仍大量存在,且危害性更大,土壤石油污染的防治研究工作已受到人們的廣泛重視。jrgensen的試驗(yàn)顯示,經(jīng)生物堆埋,石油污染的土壤中石油可降低71%1。微生物修復(fù)技術(shù)主要機(jī)理是石油烴直接參與了微生物的生化反響,通過(guò)代謝作用降解土壤中的污染物2。土壤微生物修復(fù)技術(shù)的開發(fā)與研究已受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注3-16。目前能降解石油中各種烴類的微生物共有約100余

3、屬200多種,它們分屬于細(xì)菌、放線菌、霉菌、酵母以及藻類16。本文利用優(yōu)化土著微生物菌群輔以物理和化學(xué)方法相結(jié)合的綜合修復(fù)技術(shù),對(duì)土壤中長(zhǎng)期殘留石油污染進(jìn)展降解模擬實(shí)驗(yàn),獲得了一些效果。該方法具有處理方法簡(jiǎn)單、費(fèi)用低、修復(fù)效果好、對(duì)環(huán)境影響孝無(wú)二次污染、可原位治理等優(yōu)點(diǎn)。因此,本研究為該技術(shù)的應(yīng)用提供了技術(shù)支撐,具有重要的實(shí)際意義。1實(shí)驗(yàn)材料和方法1.1實(shí)驗(yàn)材料化學(xué)試劑:gs.47h.2、nh.4n.3、al.2、fel.3、kh.2p.4、k.2hp.4、kl、nh.4.2s.4、a.3、nal、可溶性淀粉、蔗糖、乳酸、鹽酸、酵母膏、牛肉膏、乙酸鈉、瓊脂、液體石蠟、石油醚、三氯甲烷等均為分析

4、純。其它實(shí)驗(yàn)材料:新穎馬鈴薯、濮陽(yáng)徐鎮(zhèn)鎮(zhèn)石油殘留污染土樣等等。添加劑:牛糞晾干粉碎過(guò)2篩在121滅菌30in。實(shí)驗(yàn)用玻璃器皿:150l、250l具塞三角瓶,125l、1000l磨口細(xì)口試劑瓶,各種不同類型的細(xì)菌培養(yǎng)試管、培養(yǎng)皿、橡膠塞等。主要儀器:qzd-1型電磁振蕩器、kq218超聲波清洗器、生物恒溫培養(yǎng)箱、高速離心機(jī)、高壓蒸汽滅菌器、無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室、生化培養(yǎng)箱、hz150l恒溫?fù)u床培養(yǎng)箱、奧林巴斯生物顯微鏡、752n紫外可見光柵分光光度計(jì)、電熱枯燥箱及各種化學(xué)分析用玻璃儀器。1.2測(cè)試方法石油分析測(cè)試方法:為紫外分光光度法。1.3實(shí)驗(yàn)步驟1.3.1石油降解菌的別離與優(yōu)選自然界的物質(zhì)循環(huán)微生物細(xì)

5、菌的生化作用是非常重要的一環(huán),碳的循環(huán)也不例外。許多細(xì)菌就是碳循環(huán)的主要驅(qū)動(dòng)因子之一,機(jī)理就是在細(xì)菌的作用下,將碳?xì)浠衔锝到鉃?2和h.2的整個(gè)過(guò)程,也是自然界對(duì)石油污染的自凈功能的生態(tài)效應(yīng),對(duì)土壤和地下水環(huán)境保護(hù)具有一定的實(shí)際意義。據(jù)此用細(xì)菌的選擇性培養(yǎng)基和富集培養(yǎng)基,對(duì)中原油田濮陽(yáng)徐鎮(zhèn)鎮(zhèn)一廢棄采油井石油殘留污染土壤的樣品進(jìn)展菌種、菌群的培養(yǎng)別離,選擇優(yōu)化出實(shí)驗(yàn)用降解土壤殘油的菌種、菌群。本次實(shí)驗(yàn)選擇優(yōu)化出的細(xì)菌初步鑒定主要為:假單胞菌屬、微球菌屬、放線菌屬、真菌類毛霉、曲霉等菌群。1.3.2土壤殘油污染降解實(shí)驗(yàn)步驟根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)選出的降解殘油污染的優(yōu)勢(shì)菌群,利用不同的培養(yǎng)基對(duì)所選出的各類菌

6、群進(jìn)展放大培養(yǎng)。各類菌群培養(yǎng)35d后進(jìn)展混合培養(yǎng),繼續(xù)培養(yǎng)57d后作為相應(yīng)的石油烴降解實(shí)驗(yàn)。進(jìn)展模擬不同含量條件下土壤殘油污染的微生物修復(fù)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)裝置為250l具塞三角瓶。2實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論不同土壤殘油含量降解野外實(shí)驗(yàn),是在2022年4月16日至6月12日進(jìn)展。考慮研究區(qū)地表土壤春、夏、秋溫度一般在2030左右,選擇了30溫度進(jìn)展實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見天然土壤中含有豐富的微生物,具有潛在的降解石油污染物的才能。且可降解石油的細(xì)菌在多年連續(xù)的污油中不斷馴化,具有較強(qiáng)的降解石油污染物的潛力。采用投加從原來(lái)土著體系中挑選出的微生物進(jìn)展生物強(qiáng)化,能抑制其他外源菌所面臨的存活力較弱、與土著微生物之間可能存在競(jìng)

7、爭(zhēng)關(guān)系等一系列問(wèn)題,且這種生物強(qiáng)化技術(shù)操作簡(jiǎn)便,實(shí)用性強(qiáng),在生物修復(fù)方面具有較廣闊的應(yīng)用前景。石油是由上千種化學(xué)性質(zhì)不同的物質(zhì)組成的復(fù)雜混合物,用單種微生物細(xì)菌很難將其徹底降解,目前在石油污染的生物處理上,越來(lái)越多的國(guó)內(nèi)外學(xué)者采用細(xì)菌菌群進(jìn)展生物處理。如何能消除菌群種間的抑制作用,構(gòu)建出優(yōu)勢(shì)混合菌群是目前菌群研究所要解決的一個(gè)問(wèn)題,也是本實(shí)驗(yàn)研究的目的之一。本次實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)石油殘油污染土壤微生物修復(fù)方法的模擬實(shí)驗(yàn)研究,利用優(yōu)化原位土著微生物菌群輔以物理和化學(xué)方法相結(jié)合的修復(fù)技術(shù),進(jìn)展了實(shí)驗(yàn)溫度、水、氧氣、營(yíng)養(yǎng)元素等的調(diào)控,對(duì)土壤中殘油的降解實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了微生物修復(fù)技術(shù)在土壤石油殘油污染降解的有

8、效性和應(yīng)用的可行性。為野外原位試驗(yàn)提供了經(jīng)歷,奠定了根底,積累了技術(shù)。3結(jié)論參考文獻(xiàn):1jrgensenks,puustinenj,surttia.bireediatinfpetrleuhydrarbnntainatedsilbypstinginbipilesj.envirnentalpllutin,2000,107(2):245-254.2debntja.slvent-tlerantbateriainbiatalysisj.trendsbitehnl,1998,16:493-499.3sanjeeishra,jeevanjyt.insitubireediatinptentialfanilysludge-degradingbaterialnsrtiuj.urrentirbilgy,2001,43:328-3354jselrgalleg,jrgelred,ju

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