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文檔簡介

1、青光眼實行模子和損害【摘要】青光眼實行模子有助于闡述青光眼的病因學和病理學并生長新的更為有用的治療要領。本文重要先容比年來常用的青光眼實行模子及損害評估技能的上風和限定。【關鍵詞】青光眼;實行模子;損害評估青光眼是以視神經萎縮和視野從外周向中心漸進性缺損為特性的神經退行性疾病,發(fā)病隱匿,是環(huán)球第二致瞎眼病,確切發(fā)病機制尚不清楚。青光眼的眼內病變重要包羅三個方面:(1)房水流出受阻,小梁網和鞏膜色素層流出通道形態(tài)學和生化的改變,眼內壓(intraularpressure,ip)的增高;(2)視神經乳頭(ptinervehead,nh)特異性的變革包羅視網膜神經纖維的缺失,篩板壓縮變雹弓形后移、篩

2、孔延伸、細胞外基質改變(膠原卵白、彈性卵白、基膜毗連卵白、葡糖胺聚糖等)和神經膠質構造改變(星型膠質細胞活化、細胞外間質重構);(3)視網膜神經節(jié)細胞(retinalganglinells,rgs)漸進性的凋亡。青光眼實行模子是研究青光眼生理、病理、藥理等方面的重要本領,如今常用的是動物模子和構造細胞造就模子。1青光眼實行模子1.1動物實行模子青光眼動物實行模子有助于闡述青光眼的病因學和病理學并生長新的更為有用的治療要領。最抱負的動物實行模子是猴子或猩猩,由于它們的篩板和人類最為靠近,但基于社會倫理道德和用度方面的思量,應用有所限定。其次是嚙齒類,大鼠和小鼠的前房角布局和靈長類很相似,小梁網由

3、小梁細胞覆蓋的小梁纖維交織成網狀并有真正的shle管。小鼠房水動力學和人眼極為相似。差異的是嚙齒類沒有靈長類視神經乳頭處具有的篩板,包羅圍繞神經節(jié)細胞纖維束的篩狀板。但是,小鼠和大鼠視神經乳頭的細胞層更遼闊,星形膠質細胞層板狀延伸與神經纖維軸突彼此交織。別的,大鼠的視神經乳頭有稀松垂直走向的小梁,內含膠原、彈力卵白、層粘連卵白和卵白聚糖。這些上風使嚙齒類動物模子成為研究青光眼常用的東西。如今利用的嚙齒類動物模子重要有(1)常壓模子:玻璃體內注射快樂性氨基酸、內皮素,視神經損傷、視網膜缺血再灌注模子;(2)壓力模子:自覺性高眼壓模子、一連光照模子、高滲鹽水模子、激光光凝小梁網模子、鞏膜靜脈燒灼模

4、子、鞏膜靜脈結扎模子、透明質酸前房注射、微球前房注射。urla等1報道大鼠前房每周注射含有或不含羥丙基甲基纖維素(hydrxyprpylethylellulse,hp)的乳膠微球可導致眼壓增高至少一連30周。(3)轉基因模子:利用病毒載體使人y突變株在小鼠眼內過分表達,導致ip明顯增長2。1.2構造細胞造就模子構造造就和單細胞范例造就是快速比力差異藥物治療結果的東西,并容許直接調控細胞微環(huán)境。常用的構造細胞造就模子有:原始視網膜細胞混淆造就;純化rgs造就;rgs轉染;視網膜移植造就;神經膠質細胞和其他支持細胞造就。通過細胞造就可以:分散和分選純化細胞確定差異范例細胞的作用;遺傳物質轉染以過分

5、表達或敲除某種特定基因;細胞內鈣離子濃度、活性氧濃度的熒光成像,線粒體膜電位,細胞酸堿度和其他細胞生理學的丈量。2青光眼損害的評估得當?shù)恼_的青光眼損害評估技能和東西是研究不成或缺的,包羅ip丈量、rgs和視神經的成效形態(tài)學評估等。2.1ip丈量2.2rgs的形態(tài)學評估視網膜全層切片或視網膜鋪片結合構造化學技能可將全部范例的細胞非特異性染色(如甲酚紫)或選擇性的標識表記標幟rgs(逆行性標識表記標幟或rgs免疫組化標識表記標幟)。視網膜全層切片的長處是可以表現(xiàn)差異細胞層形態(tài)學變革,計數(shù)視網膜節(jié)細胞層(ganglinelllayer,gl)細胞數(shù)量,預計rgs的存活率。缺點是正常視網膜rgs的漫

6、衍密度和青光眼患者或嚙齒動物模子視網膜rgs的缺失都是不均一的。其次,并非存在于gl的全部的細胞都是rgs,無足細胞(aarineells)據(jù)預計高達50%,因此計數(shù)gl的細胞不克不及正確反響rgs的變革。視網膜鋪片用于查抄整個視網膜,消除rgs不勻稱漫衍和不合錯誤稱喪失導致的偏向。構造學技能是視網膜鋪片不成缺少的增補。甲苯基紫染色:得當調解染色步伐的參數(shù),特殊是染色和脫色的時間,可僅染色gl,但不雅察者仍需依附履歷從形態(tài)上區(qū)分rgs和無足細胞。值得留意的是higashide等人4用激光掃描檢眼鏡樂成拍攝并計數(shù)活體大鼠眼內的rgs。利用上丘注射染料dia后再電子成像,dia可以不變存在長達2個

7、多月,成像黑白創(chuàng)傷性的,可重復檢測,因此可提供視網膜rgs數(shù)量和密度的一連變革。2.3視神經的形態(tài)學評估視神經形態(tài)學評估能提供比rgs評估更有代價的信息。視神經橫斷面染色后可以借助光學或電子顯微鏡不雅察形態(tài)學變革和定量評估存活或損傷的軸突數(shù)量,預計軸突損傷環(huán)境并表現(xiàn)優(yōu)先受損地區(qū)。如今常用視神經損傷評估體系(ptinervedaagesre,nds),可便利快速評估視神經團體損傷環(huán)境。2.4nh的形態(tài)學評估青光眼損害的特性性改變是nh杯狀凹陷和篩板向后突出。眼底鏡查抄,眼底照相,激光掃描眼底共同前房角鏡可專門檢測嚙齒動物活體內視盤杯狀凹陷環(huán)境,激光斷層掃描可以清楚表白眼內高壓小鼠視盤杯狀凹陷隨時

8、間生長變革。2.5其他電生理評價:靈長類青光眼損害的成效評價可以是活體的身心或電生理評價。不幸的是,如今的技能限定了對嚙齒類動物身心評價的研究。常用的電生理評價如視網膜電流圖(erg)、圖形視網膜電圖(perg)、多焦視網膜電圖(ferg),視覺誘發(fā)電位(vep)、多焦視覺誘發(fā)電位(fvep)。瞳孔對光反射(plr):是評估成效完備的或視覺疾病損害的視網膜和視神經成效的敏感要領,已在小鼠和大鼠被證明具有特性性。【參考文獻】1urlajh,hernandez,veine.threeexperientalglauadelsinrats:parisnftheeffetsfintraularpressureelevatinnretinalganglinellsizeanddeathj.expeyeres,2022,83:429-437.4higashide

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