生物化學(xué)與分子生物學(xué)：血清過氧化氫酶Km值測(cè)定_第1頁
生物化學(xué)與分子生物學(xué)：血清過氧化氫酶Km值測(cè)定_第2頁
生物化學(xué)與分子生物學(xué)：血清過氧化氫酶Km值測(cè)定_第3頁
生物化學(xué)與分子生物學(xué)：血清過氧化氫酶Km值測(cè)定_第4頁
生物化學(xué)與分子生物學(xué)：血清過氧化氫酶Km值測(cè)定_第5頁
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文檔簡介

實(shí)驗(yàn)三血清過氧化氫酶Km值測(cè)定一 實(shí)驗(yàn)原理1 Km酶促速度達(dá)到其最大速度Vm一半時(shí)的底物濃度特征性常數(shù)可以表示E與S之間的親和能力。雙倒數(shù)作圖法（Lineweaver-Burk法） VmaxS Km+SV = （林貝氏方程）+ 1/V=KmVmax 1/Vmax 1/S 兩邊同取倒數(shù)-1/Km 1/Vmax 1/S1/VHanes作圖法S/V=Km/Vmax + S/Vmax S S/V -Km Km/Vm 1/Vmax + 1/V=KmVmax 1/Vmax 1/S 2 過氧化氫酶 2H2O22H2O+O2 2KMnO45H2O23H2SO4 2MnSO4K2SO45O28H2OV反應(yīng)速度=開始H2O2物質(zhì)的量剩余H2O2物質(zhì)的量H2O2物質(zhì)的量濃度加入的體積KMnO4物質(zhì)的量濃度消耗的KMnO4體積5/2 二 實(shí)驗(yàn)操作 （見書P132）1 H2O2濃度的標(biāo)定： 同樣操作，做二份，取二份數(shù)據(jù)平均值。2反應(yīng)速度的測(cè)定： 表1 各反應(yīng)管添加血清，硫酸時(shí)間 1 2 3 4 5加稀釋血清0.5ml時(shí)間 0 1 2 3 4加H2SO4 2.0ml時(shí)間 5 6 7 8 9 3 KMnO4滴定各瓶至微紅色。記錄KMnO4消耗量(m1)，計(jì)算H2O2剩余量。三 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 （1）書P132 表3-3 （2）作圖：標(biāo)題，制作時(shí)間，標(biāo)注Km值 （3）實(shí)驗(yàn)結(jié)果（文字描述）2 結(jié)論

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