高考生物一輪對點訓(xùn)練：30-2 動物細胞工程 b Word版含解析

1、1科研人員采用轉(zhuǎn)基因體細胞克隆技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因綿羊，以便通過乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人凝血因子醫(yī)用蛋白，其技術(shù)路線如圖：(1)由過程獲得的A為_。(2)在核移植之前，必須先去掉受體卵母細胞的核，目的是_。受體應(yīng)選用_期卵母細胞。(3)進行胚胎移植時，代孕母羊?qū)σ迫胱訉m的重組胚胎基本上不發(fā)生_，這為重組胚胎在代孕母羊體內(nèi)的存活提供了可能。(4)采用胎兒成纖維細胞進行轉(zhuǎn)基因體細胞克隆，理論上可獲得無限個轉(zhuǎn)基因綿羊，這是因為_。答案(1)含目的基因的表達載體(2)保證核遺傳物質(zhì)來自含目的基因的成纖維細胞M中期(3)免疫排斥反應(yīng)(4)整合有目的基因的成纖維細胞可進行傳代培養(yǎng)解析(1)依據(jù)圖示，為表達載體構(gòu)建過

2、程，A為含有目的基因的表達載體。(2)在核移植前，去掉受體卵母細胞核的目的是保證核遺傳物質(zhì)來自含目的基因的成纖維細胞；受體細胞應(yīng)選用減中期的卵母細胞。(3)在胚胎移植時，代孕母羊?qū)σ迫胱訉m的重組胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為重組胚胎的存活提供了可能。(4)由于整合有目的基因的成纖維細胞可以進行傳代培養(yǎng)，故理論上可獲得無限個轉(zhuǎn)基因綿羊。2某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù))，結(jié)果如下圖所示。若要制備雜交瘤細胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細胞(染色體數(shù)目40條)，并將該細胞與體外培養(yǎng)

3、的小鼠骨髓瘤細胞(染色體數(shù)目60條)按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細胞?；卮鹣铝袉栴}：(1)制備融合所需的B淋巴細胞時，所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到16000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過_次免疫后才能有符合要求的。達到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細胞的是_小鼠，理由是_。(2)細胞融合實驗完成后，融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外，可能還有_，體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因是_。(3)雜交瘤細胞中有_個細胞核，染色體數(shù)目最多是_條。(4)未融合的B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是_

4、。答案(1)4YY小鼠的血清抗體效價最高(2)B淋巴細胞相互融合形成的細胞、骨髓瘤細胞相互融合形成的細胞細胞融合是隨機的，且融合率達不到100%(3)1100(4)不能無限增殖解析本題考查動物單克隆抗體技術(shù)的原理及應(yīng)用。(1)由圖看出，到第4次免疫時，Y和Z的血清抗體效價已達到要求，即16000以上，而前3次免疫后，3只小鼠的血清抗體效價均未達到要求。從第3次開始，Y小鼠的血清抗體效價最高，所以Y小鼠最適合用于制備B淋巴細胞。(2)僅考慮細胞之間的兩兩融合。該融合體系中有5種類型的細胞：2種未融合型(B淋巴細胞、骨髓瘤細胞)，3種融合型(B淋巴細胞B淋巴細胞、骨髓瘤細胞骨髓瘤細胞、B淋巴細胞骨

5、髓瘤細胞)，由此可看出細胞融合具有隨機性。(3)雜交瘤細胞是B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成的，有1個細胞核，核內(nèi)染色體數(shù)為4060100。(4)B淋巴細胞不能無限增殖，所以經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活。3人乳頭狀瘤病毒(HPV)與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)，抗HPV的單克隆抗體可以準(zhǔn)確檢測出HPV，從而及時監(jiān)控宮頸癌的發(fā)生，以下是以HPV衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體的過程，請據(jù)圖回答：(1)單克隆抗體制備過程中涉及的細胞工程技術(shù)有_。(2)若要分析雜交瘤細胞中染色體，可通過_等過程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察。雜交瘤細胞中染色體數(shù)目與普通淋巴細胞相比具有的特點是_，在HAT培養(yǎng)基上存活的細胞可能包括

6、_(填下列序號)。無抗體分泌的細胞抗HPV抗體的分泌細胞其他無關(guān)抗體的分泌細胞(3)對于抗體檢測呈_性的雜交克隆應(yīng)盡早進行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細胞到310個/mL，每孔加入細胞稀釋液_mL0.1/(1/10)，使每個孔內(nèi)不多于一個細胞，達到單克隆培養(yǎng)的目的。(4)由上述過程生產(chǎn)出的單克隆抗體不能直接用于人體，理由是_。(5)科學(xué)家從某些無限增殖細胞的細胞質(zhì)中分離出了無限增殖調(diào)控基因(prG)，該基因能激發(fā)動物細胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更多的思路。除本題描述的一種制備單克隆抗體技術(shù)外，請再簡要寫出一種制備單克隆抗體的思路_。答案(1)動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融

7、合(2)解離、漂洗、染色和制片染色體數(shù)目加倍(3)陽0.1(4)小鼠形成的抗體對人體來說是抗原，存在著排異反應(yīng)(5)通過基因工程向漿細胞中導(dǎo)入prG；利用核移植技術(shù)將漿細胞的細胞核移植到去核的無限增殖細胞中(答對其一即可)解析(2)利用顯微鏡觀察有絲分裂過程中的染色體，需先制作臨時裝片；雜交瘤細胞中含有漿細胞和骨髓瘤細胞的染色體，所以比普通淋巴細胞的染色體數(shù)目多一倍；在HAT培養(yǎng)基上生存的細胞均為雜交細胞，這些雜交細胞中有分泌HPV抗體的細胞，有分泌其他抗體的細胞，也有不能分泌抗體的細胞。(3)抗體檢驗呈陽性，說明該雜交瘤細胞可產(chǎn)生所需抗體；為保證每個小孔不多于一個細胞，根據(jù)濃度可推斷加入細胞稀釋液的量：設(shè)加入細胞稀釋液的最大量是X，則10個/mLX1個，