DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)

1、1專題專題5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)和蛋白質(zhì)技術(shù)DNA的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段片段血紅蛋白的提取與分離血紅蛋白的提取與分離2課題課題1 DNA的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定課題目標(biāo)課題目標(biāo):嘗試對植物或動物組織中的嘗試對植物或動物組織中的DNA進(jìn)行粗進(jìn)行粗提取提取;了解了解DNA的理化性質(zhì)的理化性質(zhì),理解理解DNA粗提取以粗提取以及及DNA鑒定的原理。鑒定的原理。課題重點(diǎn)課題重點(diǎn)DNA的粗提取和鑒定方法。的粗提取和鑒定方法。3本節(jié)問題：本節(jié)問題：1、DNA的粗提取和鑒定根據(jù)的原理是什么？的粗提取和鑒定根據(jù)的原理是什么？1）DNA在在NaCl溶液中的溶解

2、度隨溶液中的溶解度隨NaCl溶液溶液濃度的不同而不同。具體見濃度的不同而不同。具體見P54圖圖5-1。2）利用）利用DNA不溶于酒精但細(xì)胞中某些蛋白不溶于酒精但細(xì)胞中某些蛋白質(zhì)溶于酒精的性質(zhì)可使質(zhì)溶于酒精的性質(zhì)可使DNA與蛋白質(zhì)分離得與蛋白質(zhì)分離得到初步純化的到初步純化的DNA。3）在沸水中）在沸水中DNA遇二苯胺呈現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)。遇二苯胺呈現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)。42、DNA粗提取的方法步驟怎樣？有什粗提取的方法步驟怎樣？有什么主要注意問題？么主要注意問題？注意問題：注意問題：1)材料要選用材料要選用DNA含量較高的生物組織含量較高的生物組織;2)整個(gè)實(shí)驗(yàn)中三次用到整個(gè)實(shí)驗(yàn)中三次用到2mol/L的的NaCl

3、溶液溶液;3)酒精最好用酒精最好用95%的冷酒精的冷酒精;4)二苯胺試劑最好現(xiàn)配現(xiàn)用二苯胺試劑最好現(xiàn)配現(xiàn)用,如果從冰箱取出如果從冰箱取出,用時(shí)要先搖勻用時(shí)要先搖勻;5)加蒸餾水或加入酒精用玻棒攪拌時(shí)加蒸餾水或加入酒精用玻棒攪拌時(shí),動作要動作要輕緩且朝一個(gè)方向。輕緩且朝一個(gè)方向。53、解決教材其他練習(xí)題。、解決教材其他練習(xí)題。 反復(fù)地溶解與析出反復(fù)地溶解與析出DNA，能夠去除，能夠去除雜質(zhì)的原因是：雜質(zhì)的原因是： 用高鹽濃度的溶液溶解用高鹽濃度的溶液溶解DNA，能除，能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì)；用低鹽濃去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì)；用低鹽濃度使度使DNA析出，能除去溶于低鹽溶液中析出，能除去溶于低

4、鹽溶液中的物質(zhì)。的物質(zhì)。6練習(xí)鞏固練習(xí)鞏固1、向溶有、向溶有DNA的的2mol/L的的NaCl溶液中不溶液中不斷加入蒸餾水?dāng)嗉尤胝麴s水,在這個(gè)過程中在這個(gè)過程中DNA和雜質(zhì)和雜質(zhì)蛋白質(zhì)的溶解度變化情況分別是蛋白質(zhì)的溶解度變化情況分別是A 減小減小;減小減小 B 增大增大;增大增大C 先減小后增大先減小后增大 D 減小減小;增大增大2、欲使溶有、欲使溶有DNA的的2mol/L的的NaCl溶液中溶液中的的DNA析出，最有效的辦法是析出，最有效的辦法是A 加蒸餾水加蒸餾水 B 加礦泉水加礦泉水C 加清水加清水 D 加生理鹽水加生理鹽水73、與析出、與析出DNA粘稠物有關(guān)的敘述，不正確的是粘稠物有關(guān)的敘述，不正確的是A 操作時(shí)緩慢滴加蒸餾水，降低操作時(shí)緩慢滴加蒸餾水，降低DNA的溶解度的溶解度B 操作時(shí)用玻棒輕緩攪拌以保證操作時(shí)用玻棒輕緩攪拌以保證DNA分子的完整分子的完整C 加蒸餾水可以同時(shí)降低加蒸餾水可以同時(shí)降低DNA和蛋白質(zhì)的溶解度和蛋白質(zhì)的溶解度D 當(dāng)絲狀粘稠物不再增加時(shí)，當(dāng)絲狀粘稠物不再增加時(shí)，NaCl溶液的濃度可溶液的濃度可以認(rèn)為是以認(rèn)為是0.14mol/L4、你能采用其他方法對、你能采用其他方法對DNA