熒光定量分析儀PPT課件

1、概要概要p儀器p試劑第1頁(yè)/共33頁(yè)熒光儀熒光儀u產(chǎn)品特點(diǎn) 快速：連續(xù)模式200T/小時(shí)，單步模式 3 分鐘/例 智能：自動(dòng)模式，智能識(shí)別檢測(cè)，無(wú)需手動(dòng)干預(yù) 報(bào)告：綜合多項(xiàng)目輸出 存貯：可存貯上萬(wàn)例結(jié)果 準(zhǔn)確：CV5%，多重質(zhì)控，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確 通信：用COM，USB等可連入Lis系統(tǒng) 輕便：2Kg,適合床邊診斷u適用范圍 中心實(shí)驗(yàn)室、門/急診化驗(yàn)室、體檢中心第2頁(yè)/共33頁(yè)產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)u激光器，采用的是韓國(guó)激光二極管 635nm，相比同類產(chǎn)品所用LED燈，靈敏度高。uIC卡具有自動(dòng)上電和掉電管理功能,減少帶電操作而產(chǎn)生的燒片現(xiàn)象。u連續(xù)測(cè)量模式下的儀器分別計(jì)時(shí)，省去秒表計(jì)時(shí)的繁瑣。第3頁(yè)/

2、共33頁(yè)u全程C-反應(yīng)蛋白（hsCRP+常規(guī)CRP）正常參考值：hs CRP:1 mg/L; CRP:10 mg/L 線性范圍：0.5200 mg/Lu尿微量白蛋白正常參考值：20 mg/L線性范圍： 5300 mg/L PCT正常參考值： 0.05 ng/mL線性范圍：0.05100 ng/mLu人絨毛膜促性腺激素HCG正常參考值：10 mIU/mL線性范圍：10 mIU/mL200000 mIU/mLuD-二聚體正常參考值： 0.5 mg/L線性范圍：0.0510 mg/L第4頁(yè)/共33頁(yè)5 快速檢測(cè)方法學(xué)線性分析快速檢測(cè)方法學(xué)線性分析序號(hào)序號(hào)檢測(cè)方法檢測(cè)方法線性范圍線性范圍mg/Lmg/

3、L檢測(cè)項(xiàng)目檢測(cè)項(xiàng)目1 1免疫熒光免疫熒光0.5-2000.5-200全程全程CRPCRP2 2免疫比濁免疫比濁8-1608-160常規(guī)常規(guī)CRPCRP3 3金標(biāo)金標(biāo)8-2508-250或或5-1505-150常規(guī)常規(guī)CRPCRP4 4紫外可見光紫外可見光分光光度法分光光度法0.5-50.5-5或或5-505-50超敏超敏CRPCRP或常規(guī)或常規(guī)CRPCRP5 5動(dòng)態(tài)散射比濁動(dòng)態(tài)散射比濁0.08-3.40.08-3.4或或5-2305-230超敏超敏CRPCRP或常規(guī)或常規(guī)CRPCRP第5頁(yè)/共33頁(yè)C-C-反應(yīng)蛋白（反應(yīng)蛋白（CRPCRP）的發(fā)現(xiàn)與結(jié)構(gòu)）的發(fā)現(xiàn)與結(jié)構(gòu) 1930年由Tillet和

4、Francis發(fā)現(xiàn) 一種能在Ca2+存在時(shí)與肺炎鏈球菌的莢膜C多糖結(jié)合的蛋白質(zhì) 1941年， Avery等先后證實(shí)這是一種急性感染時(shí)出現(xiàn)的蛋白質(zhì)（病情恢復(fù)后/健康人血清中沒有這種物質(zhì)） 結(jié)構(gòu)對(duì)稱的盤狀五聚體，歸于五聚素家族 由5個(gè)完全相同的非糖基化單體以非共價(jià)鍵聯(lián)接形成每個(gè)單體每個(gè)含206個(gè)氨基酸殘基（相對(duì)分子質(zhì)量23017）C反應(yīng)蛋白（ c-reactive protein ，CRP）第6頁(yè)/共33頁(yè)C-C-反應(yīng)蛋白（反應(yīng)蛋白（CRPCRP）的生成）的生成 由肝細(xì)胞在IL6、IL2、TNF刺激下合成，炎癥局部巨噬細(xì)胞也可少量產(chǎn)生。 正常合成率1-10mg/d，急性炎癥時(shí)每天合成1g。 半衰期

5、19h，不耐熱，6530min破壞。 不能通過胎盤，在體內(nèi)分布甚廣，除血液外，胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液中均可測(cè)出。第7頁(yè)/共33頁(yè)C-C-反應(yīng)蛋白（反應(yīng)蛋白（CRPCRP）的生理作用）的生理作用 引發(fā)對(duì)侵入細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)和吞噬作用，與配體結(jié)合，激活補(bǔ)體，調(diào)理吞噬功能，促使內(nèi)源性或外源性配體物質(zhì)（載有配體的病理物質(zhì)或病原體）的清除，表現(xiàn)為炎癥反應(yīng) 在Ca2+存在下與磷酸膽堿、DNA、組蛋白等結(jié)合 與凋亡壞死細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)破壞時(shí)暴露的磷脂或外部侵入的細(xì)菌、真菌、寄生蟲的細(xì)胞壁磷酸膽堿結(jié)合CRP細(xì)菌巨噬細(xì)胞第8頁(yè)/共33頁(yè)CRPCRP的生物學(xué)特點(diǎn)的生物學(xué)特點(diǎn)1.反應(yīng)快速，增量大，隨著恢復(fù)下降也

6、快；敏感！感染、創(chuàng)傷、手術(shù)等情況下快速上升，610hr 明顯改變48hr（2472 hr）到高峰，102103倍的變化半衰期67hr，較快反映病情的變化例圖：術(shù)后CRP等變化第9頁(yè)/共33頁(yè)CRPCRP的生物學(xué)特點(diǎn)的生物學(xué)特點(diǎn)2.2.病毒感染沒有標(biāo)志性升高病毒感染沒有標(biāo)志性升高：病毒主要在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行復(fù)制，一般不破壞細(xì)胞膜，暴露CRP結(jié)合點(diǎn)，所以病毒感染時(shí)CRP一般不超過25mg/L。在成人，革蘭氏陰性菌感染時(shí)CRP可高達(dá)500mg/L,革蘭 氏 陽(yáng) 性 菌 和 寄 生 蟲 感 染 時(shí) 通 常 可 引 起 C R P 中 度 升 高 ， 多 為100mg/L左右。3. 受影響因素少：不受生理活動(dòng)

7、的影響，不受化療、放療和激素治療的影響（肝臟發(fā)育不全或肝功能嚴(yán)重受損則會(huì)影響CRP的合成）4.能關(guān)聯(lián)疾病活動(dòng)性：CRP 上升速度、幅度及持續(xù)時(shí)間與病情 及組織損傷的嚴(yán)重程度密切相關(guān)第10頁(yè)/共33頁(yè)常規(guī)CRP、hsCRP 、全程CRP的區(qū)別0.50.55mg/L 5mg/L hsCRP （準(zhǔn)確的檢測(cè)低水平的（準(zhǔn)確的檢測(cè)低水平的CRPCRP和微小變化，更和微小變化，更敏感）敏感）hsCRP主要用于診斷和預(yù)測(cè)主要用于診斷和預(yù)測(cè)心血管事件的發(fā)生、發(fā)心血管事件的發(fā)生、發(fā)展，新生兒感染展，新生兒感染5 5160mg/L 160mg/L 常規(guī)常規(guī)CRPCRP（低水平區(qū)靈敏度較差）（低水平區(qū)靈敏度較差） 主

8、要主要用于細(xì)菌感染、各種炎癥過程、組織壞死與組織損傷用于細(xì)菌感染、各種炎癥過程、組織壞死與組織損傷(如如外科手術(shù)后外科手術(shù)后) 及其恢復(fù)期的篩檢、監(jiān)測(cè)、病情評(píng)估與療效及其恢復(fù)期的篩檢、監(jiān)測(cè)、病情評(píng)估與療效判斷判斷0.50.5200mg/L 200mg/L 全程全程CRPCRP=hsCRP+=hsCRP+常規(guī)常規(guī)CRPCRP（增強(qiáng)了臨床高（增強(qiáng)了臨床高CRPCRP標(biāo)本的檢測(cè)能力，同時(shí)也提高了低值的靈敏性，更利于動(dòng)態(tài)監(jiān)標(biāo)本的檢測(cè)能力，同時(shí)也提高了低值的靈敏性，更利于動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)）測(cè)）三者檢測(cè)血中相同的物質(zhì)三者檢測(cè)血中相同的物質(zhì)（物質(zhì)的唯一性，僅是檢測(cè)方法和范圍的差異）（物質(zhì)的唯一性，僅是檢測(cè)方法和范圍

9、的差異）第11頁(yè)/共33頁(yè)常規(guī)炎癥嚴(yán)重程度判斷CRP 10-20 mg/L病毒或細(xì)菌感染一般細(xì)菌感染嚴(yán)重細(xì)菌感染CRP 50 mg/LCRP 20-50 mg/L常規(guī) CRPCRP 1mg/L低危險(xiǎn)性中度危險(xiǎn)性高危險(xiǎn)性CRP 3 mg/LCRP 1-3 mg/L超敏 CRP第12頁(yè)/共33頁(yè)CRPCRP與疾病的活動(dòng)性及檢測(cè)的臨床意義與疾病的活動(dòng)性及檢測(cè)的臨床意義u鑒別細(xì)菌或病毒感染（首選指標(biāo)）u監(jiān)測(cè)病情（CRP升高的程度反映炎癥組織和感染的范圍.嚴(yán)重程度和活動(dòng)性）。u監(jiān)控感染（術(shù)后.產(chǎn)后）u抗生素療效觀察，指導(dǎo)和監(jiān)測(cè)治療（急性感染性疾病時(shí)抗生素治療的最適化，避免抗生素濫用和耐藥性）u心血管疾病

10、的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和指導(dǎo)治療（獨(dú)立于脂類之外的危險(xiǎn)因子，廣泛應(yīng)用于臨床）第13頁(yè)/共33頁(yè)CRPCRP優(yōu)勢(shì)優(yōu)勢(shì)標(biāo)本面廣，可適用于全血、血漿、血清樣本的檢測(cè)反應(yīng)時(shí)間短，3 分鐘 即可出結(jié)果先進(jìn)的免疫熒光系統(tǒng)，與美國(guó) DADE BEHRING BN 100 全自動(dòng)特定蛋白儀進(jìn)行比對(duì)，相關(guān)性好，相關(guān)系數(shù)R=0.9992一卡雙項(xiàng)（超敏+常規(guī)），線性范圍廣（0.5-200 mg/L）, 可全面滿足臨床需求正常參考值：hsCRP 1 mg/L; CRP 10 mg/L第14頁(yè)/共33頁(yè)D-DimersD-Dimers定義定義 D-Dimers ：是纖維蛋白單體經(jīng)活化因子XIII交聯(lián)后，再經(jīng)纖溶酶水解所產(chǎn)生的一種特

11、異性降解產(chǎn)物。 是一個(gè)特異性的纖溶過程標(biāo)記物。第15頁(yè)/共33頁(yè)凝血系統(tǒng)內(nèi)源性凝血外源性凝血凝血酶原凝血酶FXIIIFXIIIa纖溶酶原纖溶酶纖維蛋白單體纖維蛋白原交聯(lián)纖維蛋白FDPX,Y,D,E等碎等碎片片X ,X , ,等碎片DD,DXD,DD,DXD,DD/E,YXDDD/E,YXD等復(fù)合物纖溶系統(tǒng)纖溶凝固D-Dimer 的產(chǎn)生第16頁(yè)/共33頁(yè)D-D-二聚體臨床意義二聚體臨床意義 靜脈血栓栓塞的排除性診斷 彌漫性血管內(nèi)凝血的診斷 腦梗死的輔助診斷及預(yù)后判斷 外科手術(shù)、溶栓治療的監(jiān)測(cè) 妊娠高血壓綜合征高凝狀態(tài)的診斷及檢測(cè) ACS、肝臟疾病、惡性腫瘤的輔助診斷及預(yù)后判斷第17頁(yè)/共33頁(yè)D

12、-D-二聚體陽(yáng)性結(jié)果的解釋二聚體陽(yáng)性結(jié)果的解釋 0.5ug/mL，不能排除靜脈栓塞性疾病，應(yīng)結(jié)合臨床表現(xiàn)和其他檢查綜合評(píng)估血栓性疾病的風(fēng)險(xiǎn)，必要時(shí)進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察。 結(jié)合病人群建立 D-二聚體檢測(cè)的醫(yī)學(xué)決定水平（反映某一病種患者罹患血栓的風(fēng)險(xiǎn)程度），如：孕婦、老年人 動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè) 短期內(nèi)重復(fù)測(cè)定D-D不僅對(duì)診斷有益，而且可窺測(cè)病情的演變。第18頁(yè)/共33頁(yè)19D-Dimers D-Dimers 局限性局限性 局限性: : 特異性在50%50%左右 如果D-dimersD-dimers實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性, , 其中50%50%病例為血栓癥 另外50%50%病例為其它臨床癥狀 - - 炎癥, , - - 癌癥

13、, , - - 血腫, , - - 術(shù)后, , - - 出血, , - - 懷孕, , - - 老年人 .第19頁(yè)/共33頁(yè)小結(jié)小結(jié) D-二聚體升高是繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)的標(biāo)志，但不是血栓形成的標(biāo)志，二聚體升高是繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)的標(biāo)志，但不是血栓形成的標(biāo)志，D-二聚體與二聚體與FDP同同時(shí)檢測(cè)時(shí)檢測(cè)可提高可提高診診斷效率斷效率 手術(shù)前手術(shù)前D-二聚體高不是手術(shù)禁忌指標(biāo)，應(yīng)綜合分析二聚體高不是手術(shù)禁忌指標(biāo)，應(yīng)綜合分析 一般情況下，一般情況下，3.0ug/mL以上可作為臨床干預(yù)的醫(yī)學(xué)決定水平，因引起以上可作為臨床干預(yù)的醫(yī)學(xué)決定水平，因引起D-二聚體升高的疾病較多，需結(jié)合癥狀、體征及其它檢查綜合判斷二聚體升

14、高的疾病較多，需結(jié)合癥狀、體征及其它檢查綜合判斷 妊娠婦女和健康老人排除靜脈栓塞性疾病的妊娠婦女和健康老人排除靜脈栓塞性疾病的D-二聚體二聚體cutoff值高于其它值高于其它人群人群 不同試劑（檢測(cè)系統(tǒng)）檢測(cè)結(jié)果可比性低不同試劑（檢測(cè)系統(tǒng)）檢測(cè)結(jié)果可比性低 標(biāo)本溶血、凝固、放置時(shí)間對(duì)DD的測(cè)試結(jié)果影響較大，因此測(cè)定血漿D-二聚體應(yīng)避免溶血、凝固而且需及時(shí)送檢標(biāo)本和測(cè)定。第20頁(yè)/共33頁(yè)什么是微量白蛋白尿？ 微量白蛋白尿是指尿液中血漿白蛋白排泌量 的輕度升高，在20 mg/min200 mg/min或20 mg/L200 mg/L之間（晨尿） 。 血漿白蛋白、尿微量白蛋白分子量均為 66000

15、，且結(jié)構(gòu)相同。 “微量”是指排泌到尿液中的白蛋白的“數(shù) 量”少，而非指泌到尿液中的白蛋白是一些 特殊類型的、“小”分子量的白蛋白。第21頁(yè)/共33頁(yè)為什么要檢測(cè)尿微量白蛋白 ？ 微量白蛋白尿是早期腎病唯一的臨床征象，尿微量白蛋白檢測(cè)是提示早期腎病十分有效的手段。 微量白蛋白尿代表糖尿病腎病尚處于經(jīng)過治療可以避免發(fā)展為進(jìn)展期腎病的早期階段。 大量研究證明微量白蛋白尿是心血管疾病、原發(fā)性高血壓以及1、2型糖尿病發(fā)生早期心血管死亡事件的重要、獨(dú)立的風(fēng)險(xiǎn)因素。 在微量白蛋白尿階段，積極聯(lián)合治療，包括良好的血糖控制，使用ACEI 和其他抗高血壓藥，可防止疾病進(jìn)展為顯性腎病或腎衰。第22頁(yè)/共33頁(yè)如何檢

16、測(cè)尿微量白蛋白？ 24小時(shí)尿蛋白定量檢測(cè)繁瑣，沒有增加預(yù)測(cè)價(jià)值和準(zhǔn)確性，患者依從性差，尿量收集亦時(shí)有誤差。 某一時(shí)點(diǎn)的尿微量白蛋白檢測(cè)易受尿量和其他因素干擾，導(dǎo)致假陰性或假陽(yáng)性結(jié)果。 尿肌酐與尿量有極好的相關(guān)性，且不受腎臟基底膜病變的影響，用尿肌酐做校正可消除尿量對(duì)尿白蛋白排泌量的影響，因此ACRACR（尿微量白蛋白（尿微量白蛋白/ /尿肌酐及比值）尿肌酐及比值）能更為準(zhǔn)確地反映腎功能狀態(tài)。AJKD. 2007, 49 (2 ); Suppl 2: S13-S154 Diabetes Care. 2009, 32; Supp 1: S1-S61第23頁(yè)/共33頁(yè) 花費(fèi) 80年代 2000億美元

17、/年 90年代 4500億美元/年 2010年（估） 超過1萬(wàn)億美元 全球1/3的尿毒癥其原發(fā)病是糖尿病腎病；腎小球腎炎仍是CKD的首位病因 中國(guó)CKD 發(fā)病率約為9.7 %，上海社區(qū)CKD發(fā)病率為11.8 % 中國(guó)CKD 知曉率不到10 %，至少20%的患者就診時(shí)已到腎病晚期慢性腎病（CKD）是全球性的公共衛(wèi)生事件）是全球性的公共衛(wèi)生事件 “冰山一角冰山一角”未來(lái)幾年全球透析人數(shù)將繼續(xù)保持未來(lái)幾年全球透析人數(shù)將繼續(xù)保持6%左右的增長(zhǎng)速度，預(yù)計(jì)到左右的增長(zhǎng)速度，預(yù)計(jì)到2020年將增長(zhǎng)至年將增長(zhǎng)至380萬(wàn)人左右。萬(wàn)人左右。 第24頁(yè)/共33頁(yè)HCGHCG定量檢測(cè)臨床應(yīng)用定量檢測(cè)臨床應(yīng)用 動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)

18、hCG區(qū)分正常妊娠及異常妊娠。 宮外孕的診斷。 滋養(yǎng)層疾病的診斷與跟蹤。 妊娠殘留物的動(dòng)態(tài)檢測(cè)。2525異位妊娠第25頁(yè)/共33頁(yè)孕周孕周 單胎妊娠單胎妊娠hCG數(shù)值（單位：數(shù)值（單位：mIU/ml）35 -5045 - 426518 - 7,34061,080 - 56,5007 - 87,650 - 229,0009 - 1225,700 - 288,00013 - 1613,300 - 254,00017 - 244,060 - 165,40025 - 403,640 - 117,000來(lái)源：美國(guó)妊娠協(xié)會(huì)注：1.上述參考范圍是基于正常月經(jīng)周期的孕婦，建議動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，以觀察其遞增速度。 2.

19、 在懷孕的頭4周內(nèi)，hCG水平幾乎每2天翻一番，到6-7周時(shí)，大約每84個(gè)小時(shí)翻一番。 3. hCG 4000-6000 mIU/mL，-超可見胚囊第26頁(yè)/共33頁(yè) PCT概述 降鈣素原(procalcitonin, PCT) 是無(wú)激素活性的降鈣素( calcitonin, CT) 的前肽物質(zhì) 由116個(gè)氨基酸組成的糖蛋白、分子質(zhì)量為13000。 半衰期為2530h,在體內(nèi)、外穩(wěn)定性很好。 血清PCT的升高與細(xì)菌感染密切相關(guān),在全身系統(tǒng)性嚴(yán)重感染中PCT早期即可升高,經(jīng)抗生素治療使感染控制后血中PCT會(huì)下降 在病毒感染及局部細(xì)菌感染而無(wú)全身表現(xiàn)的患者PCT僅輕度升高 PCT已被用作全身嚴(yán)重感染或敗血癥時(shí)的一個(gè)重要的觀察指標(biāo)。 不受機(jī)體免疫抑制狀態(tài)的影響。第27頁(yè)/共33頁(yè) PCT的體內(nèi)過程 局部/系統(tǒng)性細(xì)菌感染/組織創(chuàng)傷可誘導(dǎo)PCT產(chǎn)生，病毒感染、自身免疫性疾病則否。 健康志愿者靜脈注射小劑