臨床化學(xué)檢驗血液標(biāo)本的采集和處理

1、臨床化學(xué)檢驗血液標(biāo)本的采集和處理臨床檢驗的目的是為臨床提供準(zhǔn)確可靠的實驗診斷依據(jù)。為了保證實驗數(shù)據(jù)的可靠性，在檢驗醫(yī)學(xué)中必須堅持全面質(zhì)量控制（totalqualitycontrol,TQC。即指對影響臨床檢驗結(jié)果可靠性的各方面因素及各個環(huán)節(jié)進(jìn)行質(zhì)量控制）和全過程質(zhì)量控制（即指對實驗工作的全過程進(jìn)行質(zhì)量控制和質(zhì)量管理）。全過程質(zhì)量控制包括實驗前（分析前）、實驗中（分析中）和實驗后（分析后）三個階段的質(zhì)量控制。在實驗誤差中實驗前誤差占70%，因而實驗前質(zhì)量保證對減少實驗誤差顯得尤其重要。實驗前質(zhì)量保證包括病人準(zhǔn)備、標(biāo)本收集、處理、貯存和運(yùn)輸?shù)?，因而能否正確地、規(guī)范化地采集和處理標(biāo)本，是能否做到實驗

2、前質(zhì)量保證的重要內(nèi)容。在臨床化學(xué)檢驗中，血液標(biāo)本是最多應(yīng)用的生物體液，血液標(biāo)本因素是影響臨床化學(xué)分析準(zhǔn)確性和可靠性的最重要、最直接的因素。我國從我們的國情出發(fā)，參考了美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會（NCCLS）的有關(guān)規(guī)定，對臨床化學(xué)檢驗血液標(biāo)本的有關(guān)問題也提出了相應(yīng)的要求。我國衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)委員會臨床檢驗標(biāo)準(zhǔn)專業(yè)委員會（CCCLS）已對“臨床化學(xué)檢驗血液標(biāo)本的收集與處理”提出了“中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)”，旨在通過標(biāo)本方面的質(zhì)量控制達(dá)到臨床化學(xué)分析的質(zhì)量保證。目前該“標(biāo)準(zhǔn)”文件正在待批中。一、臨床化學(xué)檢驗血液標(biāo)本的定義臨床化學(xué)檢驗血液標(biāo)本是指為完成某項或多項臨床化學(xué)檢驗項目而采集的一定量的血液，包

3、括抗凝及非抗凝血。二、血液標(biāo)本的采?。ㄒ唬┎扇〔课?.靜脈采血：應(yīng)用最多的采血方式。常用的靜脈為肘前靜脈、腕背靜脈，小兒和新生兒有時用頸靜脈和前囟靜脈。2. 動脈采血：主要用于血氣分析時。常用的動脈為股動脈、肱動脈、橈動脈和臍動脈。3. 毛細(xì)血管采血：適用于僅需微量血液的試驗或嬰幼兒。常用部位為耳垂、指端，小兒有時為大趾和足跟。采血針刺入皮膚深度應(yīng)為2mm（v2.5mm）,采血局部應(yīng)無炎癥、水腫等。（二）標(biāo)本類型臨床化學(xué)檢驗血液標(biāo)本分為血清、血漿和全血3種。血清和血漿為臨床常用，除前者不含纖維蛋白原外，其余多數(shù)化學(xué)成分無差異；全血只有在紅細(xì)胞內(nèi)成分與血漿成分相似時才用；血氣分析、血紅蛋白電泳等

4、時用全血，一般臨床化學(xué)分析多不用全血。三、全血處理為血清或血漿血液標(biāo)本采取后應(yīng)盡可能早地自然地使血清（漿）從與血細(xì)胞接觸的全血中分離出來。一般應(yīng)于采血后2h內(nèi)分離出血清或血漿。全血處理為血清或血漿分為離心前、離心中和離心后三個階段，對各不同階段均有具體要求。（一）離心前階段即指標(biāo)本采集到離心處理前的一段時間。1.血清：標(biāo)本離心前一般應(yīng)令其自行凝集，不可用木棍等剝離凝血塊。通常于室溫（2225C）放置3060min血標(biāo)本可自發(fā)完全凝集；冷藏標(biāo)本凝集緩慢；加促凝劑時凝集加快（標(biāo)本采集后應(yīng)輕輕顛倒混合510次，以確保促凝劑作用）。2. 血漿：需用血漿標(biāo)本時，必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，而且采血

5、后必須立即輕輕顛倒采血管混合510次（以確?？鼓齽┌l(fā)揮作用），510min后即可分離出血漿。3. 冷藏標(biāo)本：標(biāo)本冷藏可抑制細(xì)胞代謝，穩(wěn)定某些溫度依賴性成分但全血標(biāo)本一般不能冷藏；血鉀測定標(biāo)本冷藏不得超過2h。血液中兒茶酚胺、pH/血氣、氨、乳酸、丙酮酸、胃泌素、甲狀腺激素等檢測時需用制冷的標(biāo)本。標(biāo)本需要冷藏（28C）時，標(biāo)本采取后應(yīng)立即將標(biāo)本置于冰屑或冰水混合物（不可用大冰塊），并且必須保證標(biāo)本與制冷物充分接觸，保證制冷物達(dá)到標(biāo)本的高度。4代謝抑制劑和防腐劑：某些添加劑加入血液標(biāo)本中能抑制細(xì)胞代謝，可以防止血液標(biāo)本貯存時分析物濃度的變化。血液葡萄糖測定時，如在血液中加入氟化鈉，在血細(xì)胞未分離的

6、情況下，葡萄糖在2225C時可穩(wěn)定24h,28C時可以穩(wěn)定48h；但在新生兒和兒童標(biāo)本，由于紅細(xì)胞壓積高，用氟化鈉難以控制細(xì)胞的糖酵解作用；甲醛草酸鉀抗凝保存劑不適合血糖測定；氟化鈉麝香草酚混合劑因能抑制酶活性，不適用于酶學(xué)測定。5標(biāo)本采集現(xiàn)場：（1）標(biāo)本采集后應(yīng)盡快送往實驗室，尤其當(dāng)收集區(qū)溫度超過22C時此點更為重要；（2）血液標(biāo)本采集后血管必須加塞、管口向上、垂直放置，以減少管中內(nèi)容物振動，促進(jìn)凝血完全，防止標(biāo)本蒸發(fā)、污染和外濺等；（3）已收集的血液標(biāo)本應(yīng)溫和地處理，要防止標(biāo)本管振蕩所造成的溶血；溶血可影響測定結(jié)果。有嚴(yán)重影響（使結(jié)果升高）的項目有：乳酸脫氫酶、血清門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、血清

7、鉀和血紅蛋白；引起值得注意的影響的項目有：血清鐵0）、血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（T）和血清甲狀腺素（J）;輕度受影響（增加）的有：總蛋白、白蛋白、血清磷、血清鎂、血清鈣和酸性磷酸酶；（4）應(yīng)避免對光線敏感的分析物暴露在人造光或太陽光（紫外線）照射下。如VA、VB6、卩一胡蘿卜素、卟啉、膽紅素等測定時，標(biāo)本管應(yīng)該用鋁箔或類似物質(zhì)包裹保護(hù)起來。6. 標(biāo)本運(yùn)送：全血標(biāo)本應(yīng)盡快從采血現(xiàn)場運(yùn)送至實驗室，如果運(yùn)送距離較遠(yuǎn)，特別是因分析物穩(wěn)定性有影響，必要時可于采血現(xiàn)場分離出血清或血漿后，再送往實驗室；標(biāo)本運(yùn)送過程中要注意標(biāo)本的包裝、溫度要求、處理方法等，要確保分析成分的穩(wěn)定性；標(biāo)本管在運(yùn)送過程中要保持管口封閉

8、、向上垂直放置。7. 實驗室接受標(biāo)本及離心標(biāo)本準(zhǔn)備：（1）要有標(biāo)本收取記錄（應(yīng)認(rèn)真核對檢驗中清單，對有關(guān)情況要認(rèn)真記錄，標(biāo)本接收及處理應(yīng)簽字登記）；（2）對接受的標(biāo)本要予以分類準(zhǔn)備離心；（3）實驗室接受標(biāo)本后應(yīng)仍保持標(biāo)本管于密閉封口、管口向上，垂直位放置。管塞移去后血中CO2丟失，會造成pH增加，離子鈣和酸性磷酸酶減少，尤其PH變化會影響某些檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性；（4）標(biāo)本凝集時間要充分；加抗凝劑的血液標(biāo)本可以立即離心；加促凝劑的標(biāo)本可于采血后515min盡早離心；抗凝的全血標(biāo)本（鋅、鋰、原卟啉等測定時）可以不離心；（5）冷藏（28C）標(biāo)本應(yīng)保持這個溫度直到準(zhǔn)備離心。推薦用溫度控制離心機(jī)；（6）離

9、心標(biāo)本前不主張用小木棒或類似器材去剝離附著于試管壁和管塞上的凝塊，人為剝離會誘導(dǎo)溶血。如果必須露出試管壁或取下管塞時，一定要十分注意，動作一定要輕柔。（二）離心階段即指標(biāo)本處于離心機(jī)里的一段時間。1. 離心時間和相對離心力（RCF）:臨床化學(xué)分析血液標(biāo)本離心時，RCF（10001200）xg,離心時間為510min。（19942184轉(zhuǎn)/分2. 溫度控制離心：離心時產(chǎn)熱不利于分析物穩(wěn)定，臨床化學(xué)分析血液標(biāo)本離心時必須采用溫度控制離心機(jī)。一些溫度依賴性分析物（如促腎上腺皮質(zhì)激素、環(huán)腺苷酸、兒茶酚胺等）應(yīng)在4C分離；無特殊溫度要求的分析物，離心溫度應(yīng)設(shè)定在20C22C；溫度低于15C可以人為地使血

10、鉀測定值增高；冷藏運(yùn)送的標(biāo)本必須在要求的溫度下離心。3. 關(guān)于再離心：標(biāo)本離心最好一次完成，若需再次離心，應(yīng)距上次離心相隔時間很短；對于含有分離物質(zhì)的血標(biāo)本絕不可以再離心。（三）離心后階段指標(biāo)本離心后和用于檢測的血清或血漿被取出一定量之前的一段時間。1. 血清或血漿與接觸的血細(xì)胞和凝塊的分離應(yīng)在采血后盡快（2h內(nèi)）完成。2. 分離的血清或血漿的貯存：實驗室的室溫和血清或血漿的貯存溫度、時間，是分析物穩(wěn)定性和測定結(jié)果準(zhǔn)確性的重要參數(shù)。（1）于22C25C血清或血漿的保存不超過8h；（2）實驗于8h內(nèi)不能完成時，血清或血漿應(yīng)置2C8C保存；（3）48h內(nèi)不能完成的實驗項目，或分離的血清或血漿需貯存

11、48h以上時，應(yīng)于-20C保存；（4）標(biāo)本不可反復(fù)凍融（只能凍融一次），且不可貯存于無霜冰箱（可造成樣品溫度變化）；（5）離心后分離凝膠（凝膠屏障）上面的血清可保存25天（亦有報道4C可貯存24h），但必須保證凝膠的完整性；但應(yīng)用非凝膠分離物質(zhì)時，離心后必須立即將血清或血漿移出。（6）血清或血漿必須保存于密閉的試管中。四、血清或血漿分離物質(zhì)是指將血清或血漿從全血中分離出來的物質(zhì)，包括凝膠物質(zhì)與非凝膠物質(zhì)。（一）凝膠物質(zhì)為一類具有特定粘度和特殊比重（介于血清或血漿與凝塊之間的比重）的惰性凝膠物質(zhì)，用（10001100）xgRCF離心10min,能在血清或血漿與凝塊之間形成不可穿透的凝膠屏障，從而將血清或血漿與其接觸的血細(xì)胞、凝塊分開。（二）非凝膠物質(zhì)是由惰性物質(zhì)（玻璃、塑料、纖維、毛氈等）構(gòu)成的小珠、盤、濾器、纖維塞等組成。具有介于血清或