自動(dòng)化方法驗(yàn)證

1、Automated Method 1自動(dòng)化方法驗(yàn)證自動(dòng)化方法驗(yàn)證2004年年7月月林振賢博士林振賢博士, Ph.D. 加拿大加拿大CVG協(xié)會協(xié)會 Automated Method 2百萬個(gè)機(jī)會數(shù)據(jù)自動(dòng)化數(shù)據(jù)自動(dòng)化LIMS數(shù)據(jù)備份數(shù)據(jù)備份/存檔存檔數(shù)據(jù)采掘數(shù)據(jù)采掘物理自動(dòng)化物理自動(dòng)化樣品制備樣品制備/分析分析篩選篩選合成合成Automated Method 3實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化的益處 v增加產(chǎn)出增加產(chǎn)出 改進(jìn)員工和儀器的使用情況改進(jìn)員工和儀器的使用情況 更少制備工作更少制備工作,更多靈活機(jī)動(dòng)更多靈活機(jī)動(dòng) 每時(shí)每刻都可以運(yùn)轉(zhuǎn)每時(shí)每刻都可以運(yùn)轉(zhuǎn)v改進(jìn)結(jié)果質(zhì)量改進(jìn)結(jié)果質(zhì)量 更好的精度和準(zhǔn)確度更好的精度和準(zhǔn)確

2、度 降低誤差降低誤差 方法轉(zhuǎn)換容易方法轉(zhuǎn)換容易v安全性安全性 減少在有毒環(huán)境的中的暴露減少在有毒環(huán)境的中的暴露 降低所有溶劑的數(shù)量降低所有溶劑的數(shù)量Automated Method 4自動(dòng)化系統(tǒng)v含量測定含量測定片劑處理工作站片劑處理工作站- Caliper前置工作站前置工作站 - Caliperv溶出溶出AT70溶出系統(tǒng)溶出系統(tǒng) - Sotax多劑量工作站多劑量工作站 - CaliperAutomated Method 5自動(dòng)化工作站片劑處理工作站圖示片劑處理工作站圖示 DisintegrationunitLiquidDispensing unitFiltration unitInjecti

3、on UnitMixing unitRobotic armBalanceSystem ModulesSample racksLiquid pathSample collectionunitAutomated Method 6自動(dòng)化工作站溶出工作站圖示溶出工作站圖示 TemperaturesensorsLiquidDispensing unitFiltration unitVessel washing unitRobotic armBalanceSystem ModulesSample containerLiquid pathSample collectionunitOn-line UV ana

4、lysisAutomated Method 7v系統(tǒng)性能是自動(dòng)化分析成功的關(guān)鍵系統(tǒng)性能是自動(dòng)化分析成功的關(guān)鍵從分析員到工作站從分析員到工作站v建立該系統(tǒng)的可靠性和功效建立該系統(tǒng)的可靠性和功效 提供該系統(tǒng)可以準(zhǔn)確地、精確地和可靠地執(zhí)行任務(wù)提供該系統(tǒng)可以準(zhǔn)確地、精確地和可靠地執(zhí)行任務(wù)的書面說明的書面說明系統(tǒng)合格化Automated Method 8狀況2個(gè)可能的狀況：個(gè)可能的狀況：v1. 有手動(dòng)方法且已經(jīng)過驗(yàn)證有手動(dòng)方法且已經(jīng)過驗(yàn)證v2. 沒有手動(dòng)方法沒有手動(dòng)方法Automated Method 9v典型的分析程序包括典型的分析程序包括:樣品制備樣品制備測量測量數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)處理v把手動(dòng)制備步驟轉(zhuǎn)化

5、成自動(dòng)步驟把手動(dòng)制備步驟轉(zhuǎn)化成自動(dòng)步驟 保持相同的濃度保持相同的濃度(相同的相同的LC濃度濃度) 單個(gè)自動(dòng)步驟代替多重稀釋步驟單個(gè)自動(dòng)步驟代替多重稀釋步驟順序處理代替批量處理順序處理代替批量處理 恒器或者超聲處理代替晃動(dòng)恒器或者超聲處理代替晃動(dòng)自動(dòng)化方法建立Automated Method 10自動(dòng)化方法建立v方法建立包括：方法建立包括： 密度確定密度確定 體積轉(zhuǎn)移體積轉(zhuǎn)移 系統(tǒng)兼容性系統(tǒng)兼容性 過濾研究過濾研究 溫度研究溫度研究 殘存度研究殘存度研究 溶液穩(wěn)定性溶液穩(wěn)定性 萃取研究萃取研究Automated Method 11v溶液密度溶液密度重量法溶劑配分或稀釋重量法溶劑配分或稀釋如果要求

6、二次稀釋，準(zhǔn)備好稀釋液和過濾液如果要求二次稀釋，準(zhǔn)備好稀釋液和過濾液v體積轉(zhuǎn)移體積轉(zhuǎn)移劑型占有體積劑型占有體積 如果轉(zhuǎn)移的體積很大，手動(dòng)和自動(dòng)的結(jié)果將會不一如果轉(zhuǎn)移的體積很大，手動(dòng)和自動(dòng)的結(jié)果將會不一樣樣自動(dòng)化方法建立Automated Method 12v使系統(tǒng)單元的影響最小化使系統(tǒng)單元的影響最小化v可以從系統(tǒng)單元和過濾器中萃取的可以從系統(tǒng)單元和過濾器中萃取的把溶劑通過過濾器或液體通道把溶劑通過過濾器或液體通道與沒有經(jīng)過過濾的溶劑比較與沒有經(jīng)過過濾的溶劑比較v系統(tǒng)單元和過濾器活性保留系統(tǒng)單元和過濾器活性保留把被分析物或樣品通過過濾器或液體通道把被分析物或樣品通過過濾器或液體通道沒有經(jīng)過過濾的

7、樣品比較沒有經(jīng)過過濾的樣品比較v處理過的沒有經(jīng)過過濾的樣品之間的差別不應(yīng)該超出處理過的沒有經(jīng)過過濾的樣品之間的差別不應(yīng)該超出公稱濃度的公稱濃度的1%。自動(dòng)化方法建立Automated Method 13v過濾研究過濾研究v過濾預(yù)濕體積過濾預(yù)濕體積分析與過濾之間的平衡分析與過濾之間的平衡v最佳流速最佳流速高流速會造成過濾器堵塞（回流壓力）高流速會造成過濾器堵塞（回流壓力）低流速會造成精細(xì)顆粒穿過低流速會造成精細(xì)顆粒穿過v過濾器的容積過濾器的容積可以有效過濾的溶液體積可以有效過濾的溶液體積自動(dòng)化方法建立Automated Method 14v溫度研究溫度研究萃取過程會造成萃取溶劑溫度的顯著上升萃取

8、過程會造成萃取溶劑溫度的顯著上升溫度上升會造成因溶劑密度的改變導(dǎo)致稀釋誤差溫度上升會造成因溶劑密度的改變導(dǎo)致稀釋誤差要妥善選擇溶劑和過程以使溶劑熱效應(yīng)最小要妥善選擇溶劑和過程以使溶劑熱效應(yīng)最小能夠在計(jì)算中糾正上述問題，或需要在方法中附加能夠在計(jì)算中糾正上述問題，或需要在方法中附加浸泡浸泡/澄清時(shí)間來允許溶液降溫到室溫澄清時(shí)間來允許溶液降溫到室溫自動(dòng)方法建立Automated Method 15v轉(zhuǎn)接轉(zhuǎn)接同樣的液體通道每次都要使用同樣的液體通道每次都要使用每分析一個(gè)樣品后每分析一個(gè)樣品后(最濃的最濃的)就分析一個(gè)空白樣品就分析一個(gè)空白樣品v標(biāo)準(zhǔn)穩(wěn)定性標(biāo)準(zhǔn)穩(wěn)定性蒸發(fā)和降解蒸發(fā)和降解樣品穩(wěn)定性通常不

9、是一個(gè)問題樣品穩(wěn)定性通常不是一個(gè)問題在重新測試穩(wěn)定性前，在典型的環(huán)境條件下，存放在重新測試穩(wěn)定性前，在典型的環(huán)境條件下，存放這些溶液一段可以達(dá)到希望的穩(wěn)定性的時(shí)間。這些溶液一段可以達(dá)到希望的穩(wěn)定性的時(shí)間。自動(dòng)化方法建立Automated Method 16v優(yōu)化從基質(zhì)中回收藥物優(yōu)化從基質(zhì)中回收藥物崩解單元崩解單元 的速度的速度萃取步驟時(shí)段萃取步驟時(shí)段萃取步驟數(shù)目萃取步驟數(shù)目浸泡時(shí)間和澄清時(shí)間浸泡時(shí)間和澄清時(shí)間自動(dòng)化方法建立Automated Method 17v驗(yàn)證的目標(biāo)和范圍驗(yàn)證的目標(biāo)和范圍v自動(dòng)系統(tǒng)描述自動(dòng)系統(tǒng)描述v驗(yàn)證參數(shù)驗(yàn)證參數(shù)v實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序v接受標(biāo)準(zhǔn)接受標(biāo)準(zhǔn)論證極限論證極限v偏差

10、與修正偏差與修正驗(yàn)證方案Automated Method 18v基本假設(shè)基本假設(shè)通過通過IQ、OQ、PQ和規(guī)范的性能核實(shí)建立起來的系和規(guī)范的性能核實(shí)建立起來的系統(tǒng)基本效能統(tǒng)基本效能v驗(yàn)證參數(shù)驗(yàn)證參數(shù)等價(jià)性等價(jià)性 (如果存在有驗(yàn)證過的手動(dòng)方法）如果存在有驗(yàn)證過的手動(dòng)方法）回收率回收率 (選項(xiàng)，如果存在有驗(yàn)證過的手動(dòng)方法）選項(xiàng)，如果存在有驗(yàn)證過的手動(dòng)方法）殘存度殘存度(積累性殘存度積累性殘存度)重復(fù)性重復(fù)性程式化程式化自動(dòng)化放方法建立Automated Method 19等價(jià)性v與驗(yàn)證過的手動(dòng)方法一致與驗(yàn)證過的手動(dòng)方法一致比較手動(dòng)與自動(dòng)結(jié)果比較手動(dòng)與自動(dòng)結(jié)果分析上還是統(tǒng)計(jì)上的差別分析上還是統(tǒng)計(jì)上的

11、差別? v設(shè)置合理的判據(jù)設(shè)置合理的判據(jù) Automated Method 20等價(jià)性v含量均勻性含量均勻性/多重劑型多重劑型含量均勻性：在全濃度（含量均勻性：在全濃度（100%公稱濃度）范圍內(nèi)公稱濃度）范圍內(nèi)10個(gè)確測點(diǎn)（理想情況測個(gè)確測點(diǎn)（理想情況測3批總共批總共30個(gè)樣品）個(gè)樣品）批量含量：在全濃度（批量含量：在全濃度（100%公稱濃度）范圍內(nèi)公稱濃度）范圍內(nèi)6個(gè)個(gè)確測點(diǎn)（理想情況測確測點(diǎn)（理想情況測3批總共批總共18個(gè)樣品）個(gè)樣品）通過手動(dòng)方法獲得相同批號樣品的數(shù)據(jù)通過手動(dòng)方法獲得相同批號樣品的數(shù)據(jù)手動(dòng)和自動(dòng)方法平均差要滿足手動(dòng)和自動(dòng)方法平均差要滿足 3%Automated Method

12、 21等價(jià)性v降解與雜質(zhì)降解與雜質(zhì)比較數(shù)據(jù)；大致情況應(yīng)該類似比較數(shù)據(jù)；大致情況應(yīng)該類似; 所有超出定量極限所有超出定量極限的雜質(zhì)或降解產(chǎn)物應(yīng)該存在，并且滿足以下限度：的雜質(zhì)或降解產(chǎn)物應(yīng)該存在，并且滿足以下限度： 1.0% + 0.3%確定一個(gè)具有代表性的劑型，理想情況需要兩批不確定一個(gè)具有代表性的劑型，理想情況需要兩批不同樣品，還要與手動(dòng)方法對這相同兩批樣品進(jìn)行比同樣品，還要與手動(dòng)方法對這相同兩批樣品進(jìn)行比較較Automated Method 22等價(jià)性v溶出溶出每一個(gè)溶出需要每一個(gè)溶出需要6個(gè)全濃度范圍的確測量來確定個(gè)全濃度范圍的確測量來確定(理理想情況測想情況測3批總共批總共18個(gè)樣品個(gè)樣

13、品)通過手動(dòng)方法獲得相同批號樣品的數(shù)據(jù)通過手動(dòng)方法獲得相同批號樣品的數(shù)據(jù)在樣品從同一次實(shí)驗(yàn)中獲得的情況下在樣品從同一次實(shí)驗(yàn)中獲得的情況下,手動(dòng)方法和自手動(dòng)方法和自動(dòng)方法之間的平均差異在動(dòng)方法之間的平均差異在Q時(shí)間點(diǎn)要求時(shí)間點(diǎn)要求 3%, 否則否則if 則要求滿足則要求滿足 5%Automated Method 23等價(jià)性溶出情況比較溶出情況比較Automated Method 24回收率 (準(zhǔn)確率)v含量含量基質(zhì)的活性成分回收率基質(zhì)的活性成分回收率等價(jià)實(shí)驗(yàn)顯示回收率接近公稱濃度的等價(jià)實(shí)驗(yàn)顯示回收率接近公稱濃度的100%在公稱濃度在公稱濃度80%-120%之間優(yōu)化操作顯示較好回收之間優(yōu)化操作顯示

14、較好回收率率每個(gè)水平每個(gè)水平+ 2% v溶出溶出在公稱濃度在公稱濃度0%-120%之間優(yōu)化操作顯示較好回收之間優(yōu)化操作顯示較好回收率率每個(gè)水平每個(gè)水平+ 3%Automated Method 25v含量均勻性含量均勻性樣品基質(zhì)的活性成分回收率是公稱濃度的樣品基質(zhì)的活性成分回收率是公稱濃度的70 130% 中的最小范圍中的最小范圍 (3 個(gè)濃度個(gè)濃度/ 3次復(fù)測次復(fù)測 = 9 個(gè)樣品個(gè)樣品)所有回收率應(yīng)該是目標(biāo)濃度的所有回收率應(yīng)該是目標(biāo)濃度的 2%v批量測試批量測試樣品基質(zhì)的活性成分回收率是公稱濃度的樣品基質(zhì)的活性成分回收率是公稱濃度的80 120% 中的最小范圍中的最小范圍 (3 個(gè)濃度個(gè)濃度

15、/ 3次復(fù)測次復(fù)測 = 9 個(gè)樣品個(gè)樣品)所有回收率應(yīng)該是目標(biāo)濃度的所有回收率應(yīng)該是目標(biāo)濃度的 2%回收率 (準(zhǔn)確率)Automated Method 26v降解與雜質(zhì)降解與雜質(zhì)比較數(shù)據(jù)；大致情況應(yīng)該類似比較數(shù)據(jù)；大致情況應(yīng)該類似; 所有超出定量極限所有超出定量極限的雜質(zhì)或降解產(chǎn)物應(yīng)該存在，并且滿足在前面列出的雜質(zhì)或降解產(chǎn)物應(yīng)該存在，并且滿足在前面列出的限度的限度.在安慰劑中摻入可以得到的雜質(zhì)在安慰劑中摻入可以得到的雜質(zhì)/降解產(chǎn)物，涵蓋公降解產(chǎn)物，涵蓋公稱濃度的定量極限至稱濃度的定量極限至130%(3 個(gè)濃度個(gè)濃度/ 3次復(fù)測次復(fù)測 = 9 個(gè)樣品個(gè)樣品)所有回收率應(yīng)該是目標(biāo)濃度的所有回收率應(yīng)

16、該是目標(biāo)濃度的 10%回收率(準(zhǔn)確率) Automated Method 27v溶出溶出樣品基質(zhì)的活性成分回收率是在樣品基質(zhì)的活性成分回收率是在Q時(shí)間點(diǎn)屬時(shí)間點(diǎn)屬性的性的 20% 中的最小范圍中的最小范圍 (3 個(gè)濃度個(gè)濃度/ 3次復(fù)測次復(fù)測 = 9 個(gè)樣品個(gè)樣品) 所有回收率應(yīng)該是目標(biāo)濃度的所有回收率應(yīng)該是目標(biāo)濃度的 3% 準(zhǔn)確率可以通過滿意的專屬性、線性和準(zhǔn)確率可以通過滿意的專屬性、線性和精度來保證精度來保證回收率 (準(zhǔn)確率)Automated Method 28殘存度v所有樣品使用相同的液體通道所有樣品使用相同的液體通道v顯示系統(tǒng)有效的清洗和最小的交叉污染顯示系統(tǒng)有效的清洗和最小的交叉污

17、染v程序程序操作典型的樣品，接著做空白樣品操作典型的樣品，接著做空白樣品分析在空白中殘留的活性成分分析在空白中殘留的活性成分在空白中活性成分的濃度小于前面分析樣在空白中活性成分的濃度小于前面分析樣品的品的1% 或小于公稱濃度的或小于公稱濃度的1% Automated Method 29殘存度v片劑含量片劑含量分析三個(gè)典型樣品，每一個(gè)樣品后分析一個(gè)空白分析三個(gè)典型樣品，每一個(gè)樣品后分析一個(gè)空白計(jì)算觀察到的殘存度水平計(jì)算觀察到的殘存度水平Automated Method 30殘存度v溶出溶出 分離每個(gè)容器的取樣線分離每個(gè)容器的取樣線 一般來說，一次活性測試緊跟一次空白測試一般來說，一次活性測試緊跟

18、一次空白測試所以容器都具有共同的取樣線所以容器都具有共同的取樣線 在三個(gè)溶出容器中每一個(gè)都放入一片藥片在三個(gè)溶出容器中每一個(gè)都放入一片藥片 進(jìn)行溶出操作進(jìn)行溶出操作 接著進(jìn)行一次容器中沒有藥片的操作接著進(jìn)行一次容器中沒有藥片的操作 對其它兩個(gè)容器重復(fù)上面的步驟對其它兩個(gè)容器重復(fù)上面的步驟 計(jì)算觀察到的殘存度水平計(jì)算觀察到的殘存度水平Automated Method 31精度v精度精度精度說明產(chǎn)生一致性數(shù)據(jù)的能力精度說明產(chǎn)生一致性數(shù)據(jù)的能力可以比較兩個(gè)獨(dú)立操作的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差百分比和可以比較兩個(gè)獨(dú)立操作的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差百分比和平均值平均值 典型的接受標(biāo)準(zhǔn)典型的接受標(biāo)準(zhǔn)含量測試含量測試: + 2% （

19、平均值）（平均值）, + 2% （相對標(biāo)準(zhǔn)偏差百分比的差值）（相對標(biāo)準(zhǔn)偏差百分比的差值）溶出操作溶出操作: + 3% fo（平均值）（平均值） + 3%（相對標(biāo)準(zhǔn)偏差百分比的差值）（相對標(biāo)準(zhǔn)偏差百分比的差值）Automated Method 32v含量均勻性含量均勻性100%公稱濃度范圍需要公稱濃度范圍需要10個(gè)確測點(diǎn)個(gè)確測點(diǎn)自動(dòng)方法相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（自動(dòng)方法相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）在手動(dòng)方法）在手動(dòng)方法RSD 2% 范圍，且不得超過范圍，且不得超過6%沒有手動(dòng)方法存在，自動(dòng)方法的沒有手動(dòng)方法存在，自動(dòng)方法的RSD要滿足要滿足 6%v批量測試批量測試100%公稱濃度范圍需要公稱濃度范圍需要6個(gè)確測點(diǎn)

20、個(gè)確測點(diǎn)自動(dòng)方法的自動(dòng)方法的RSD在手動(dòng)方法在手動(dòng)方法RSD的的 2% 范圍范圍沒有手動(dòng)方法存在，自動(dòng)方法的沒有手動(dòng)方法存在，自動(dòng)方法的RSD要滿足要滿足 3% 精度Automated Method 33v降解物和雜質(zhì)降解物和雜質(zhì)對于已知雜質(zhì)數(shù)量的單批樣品或摻雜樣品的制劑需對于已知雜質(zhì)數(shù)量的單批樣品或摻雜樣品的制劑需要要6個(gè)確測點(diǎn)個(gè)確測點(diǎn) 對于單個(gè)雜質(zhì)：對于單個(gè)雜質(zhì)：RSD 15% 對于雜質(zhì)總量：對于雜質(zhì)總量： RSD 10%精度Automated Method 34v溶出溶出100%公稱濃度范圍需要公稱濃度范圍需要6個(gè)確測點(diǎn)個(gè)確測點(diǎn)自動(dòng)方法的自動(dòng)方法的RSD不超過手動(dòng)方法不超過手動(dòng)方法RSD的的2% 沒有手動(dòng)方法存在，自動(dòng)方法的沒有手動(dòng)方法存在，自動(dòng)方法的RSD要滿足要滿足 3%精度Automated Method 35v重現(xiàn)性重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)室之內(nèi)：如果有一個(gè)以上系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室之內(nèi)：如果有一個(gè)以上系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室之間：一般作為方法轉(zhuǎn)讓進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室之間：一般作為方法轉(zhuǎn)讓進(jìn)行v穩(wěn)定性穩(wěn)定性:樣品制備步驟的程式化在大量的方法建立中樣品制備步驟的程式化在大量的方法建立中都有描述都有描述分析測量的程式化將類似于一般的程式化評分析測量的程式化將類似于一般的程式化評價(jià)價(jià)重現(xiàn)性和程式化Automate