常用統(tǒng)計方法與男性實驗室質(zhì)控ppt課件

1、1常用統(tǒng)計方法與男性實驗室質(zhì)控2v質(zhì)量控制quality control（QC） 質(zhì)量管理的一部分，致力于滿足質(zhì)量要求。 3QC分類v內(nèi)部質(zhì)量控制(IQC)在實驗室內(nèi)部所進(jìn)行的QCv外部質(zhì)量評估(EQA)則是不同的實驗室就同一樣本進(jìn)行檢測并對所得結(jié)果進(jìn)行評估。 4vEQA必要條件v得到普遍認(rèn)可的標(biāo)準(zhǔn)方法以及形態(tài)、活力的標(biāo)準(zhǔn)定義在不同實驗室得到推廣應(yīng)用。 5設(shè)備、量設(shè)備、量具、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)具、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溯源到國家溯源到國家基準(zhǔn)基準(zhǔn)良好的管理良好的管理職責(zé)分工明確職責(zé)分工明確相關(guān)部門銜接相關(guān)部門銜接協(xié)調(diào)技能協(xié)調(diào)技能完整、有效、完整、有效、適應(yīng)的質(zhì)量體系使適應(yīng)的質(zhì)量體系使實驗室的質(zhì)量活動處實驗室的質(zhì)量活動

2、處于受控狀態(tài)，而不是于受控狀態(tài)，而不是隨意而為隨意而為 人員訓(xùn)練人員訓(xùn)練有素遵守規(guī)程，有素遵守規(guī)程，具有與從事工具有與從事工作相符合的素作相符合的素質(zhì)和技能質(zhì)和技能設(shè)備校準(zhǔn)設(shè)備校準(zhǔn)和檢定常年處于和檢定常年處于受控狀態(tài)受控狀態(tài)設(shè)施和環(huán)境設(shè)施和環(huán)境合檢測要求合檢測要求樣品管理樣品管理保證樣品的保證樣品的完整性和完整性和安全性安全性數(shù)據(jù)處數(shù)據(jù)處理、記錄、理、記錄、證書、報證書、報告正確告正確外部服外部服務(wù)質(zhì)量采務(wù)質(zhì)量采購物品的購物品的質(zhì)量質(zhì)量校準(zhǔn)和校準(zhǔn)和檢測方法文件檢測方法文件化處于完全化處于完全受控狀態(tài)受控狀態(tài)實驗室質(zhì)量控制的目的實驗室質(zhì)量控制的目的是把分析測試的誤差控制是把分析測試的誤差控制在容

3、許范圍內(nèi)，保證分析在容許范圍內(nèi)，保證分析的精密度、準(zhǔn)確度，使分的精密度、準(zhǔn)確度，使分析數(shù)據(jù)在給定的置信水平析數(shù)據(jù)在給定的置信水平內(nèi)有把握達(dá)到要求的質(zhì)量內(nèi)有把握達(dá)到要求的質(zhì)量實驗室質(zhì)量控制絕不僅僅是檢測過程的控制，而是貫穿于實驗室全部質(zhì)量活動的始終6測量誤差的實質(zhì) v任何測量都會有一定程度的誤差，其大小描述為帶上、下限的可信范圍。上下限靠得很近就可視為精確測量，與真值的背離越小、結(jié)果就越準(zhǔn)確。v誤差有兩種類型，即“隨機(jī)誤差”和“系統(tǒng)性誤差”。 7v隨機(jī)誤差 random errorl測量結(jié)果與在重復(fù)性條件下對同一被測量進(jìn)行無限多次測量所得結(jié)果的平均值之差。l不可消除、可降低l是由各種未知可變因素

4、引起的，源于計數(shù)和加樣的機(jī)會性差異所導(dǎo)致的精確度不足，此誤差可通過同一技術(shù)員使用同一儀器進(jìn)行重復(fù)測定來評測。 8v系統(tǒng)誤差 systematic errorl在重復(fù)性條件下，對同一被測量進(jìn)行無限多次測量所得結(jié)果的平均值與被測量的真值之差。l可消除，應(yīng)避免l由那些僅單向性改變結(jié)果的因素所引起，因此其所導(dǎo)致的結(jié)果背離不可能通過重復(fù)測量檢測出來。常見于儀器和試劑引起的誤差、方法誤差以及操作誤差。9常用術(shù)語v偏倚 biasl試驗結(jié)果偏離可接受參考值的系統(tǒng)偏離（帶有正負(fù)號）。v可報告范圍 reportable rangel在儀器、試劑盒或系統(tǒng)的測定響應(yīng)之間的關(guān)系，顯示是有效的期間內(nèi)試驗值范圍。10v不精

5、密度 imprecisionl一組重復(fù)測定結(jié)果的隨機(jī)離散，其值由統(tǒng)計量定量表示為標(biāo)準(zhǔn)差或變異系數(shù)。v標(biāo)準(zhǔn)差 standard deviationl觀察值或測定結(jié)果中不精密度的統(tǒng)計度量。變異性/離散的度量是總體方差的正平方根。反映變異程度。 1)(2nxxS11v標(biāo)準(zhǔn)差的特性l觀測值間變異大，標(biāo)準(zhǔn)差也大，反之則小。l在計算標(biāo)準(zhǔn)差時，在各觀測值加上或減去一個常數(shù)，其數(shù)值不變。l當(dāng)每個觀測值乘以或除以一個常數(shù)a，則所得的標(biāo)準(zhǔn)差是原來標(biāo)準(zhǔn)差的a倍或1/a倍。l在資料服從正態(tài)分布的條件下，資料中約有68.26%的觀測值在平均數(shù)左右一倍標(biāo)準(zhǔn)差（S）范圍內(nèi)；約有95.43%的觀測值在平均數(shù)左右兩倍標(biāo)準(zhǔn)差（2

6、S）范圍內(nèi)；約有99.73%的觀測值在平均數(shù)左右三倍標(biāo)準(zhǔn)差（3S）范圍內(nèi)。也就是說全距近似地等于6倍標(biāo)準(zhǔn)差，可用（全距/6）來粗略估計標(biāo)準(zhǔn)差。 12v變異系數(shù) l變異系數(shù)可以消除單位和（或）平均數(shù)不同對兩個或多個資料變異程度比較的影響。 %100 xSVC13v標(biāo)準(zhǔn)誤標(biāo)準(zhǔn)誤Standard Errorv即樣本均數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)差，是描述均數(shù)抽樣分布地離散程度及衡量均數(shù)抽樣誤差大小的尺度。14v全距range：一組數(shù)中最大和最小數(shù)之差v四分位數(shù)quartile：將數(shù)列等分為四部分的數(shù)v總體population：同質(zhì)觀察單位的全體 v樣本sample：從總體中抽取若干個觀察單位v可信限(confidenc

7、e interval， CI)表示在一定幾率水平下，通過樣本均數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)誤差估計的總體均數(shù)所在的可能范圍。 XXstXstX,15v平均數(shù)（mean ）是統(tǒng)計學(xué)中最常用的統(tǒng)計量，用來表明資料中各觀測值相對集中較多的中心位置。 l算術(shù)平均數(shù)（arithmetic mean）l中位數(shù)（median）l眾數(shù)（mode）出現(xiàn)次數(shù)最多 l幾何平均數(shù)（geometric mean）l調(diào)和平均數(shù)（harmonic mean） nxx2/ ) 1( nx2)12/(2/nndxxM)lglg(lg1lg211nxxxnGxnxxxnnH1111111)(12116精子密度測量中的計量誤差精子密度測量中的計量誤差

8、v如果計數(shù)了N個精子，取樣的方差就是Nv標(biāo)準(zhǔn)誤為v百分誤為100v95可信限約等于N1.96 NN/NN17v計數(shù)100個精子，標(biāo)準(zhǔn)誤10(10)，95可信限為80120。v計數(shù)200個精子，標(biāo)準(zhǔn)誤14(7)，95可信限為172228v要達(dá)到2.5百分誤的精確度，就必須計數(shù)1600個精子。 18精子活力和形態(tài)測量中的計量誤差精子活力和形態(tài)測量中的計量誤差 v當(dāng)把精子分成兩個或兩個以上類別時(如“正?；颉安徽！毙螒B(tài)，“前向性”或“非前向性”運(yùn)動等)，每個類別里估測百分比(p)的標(biāo)準(zhǔn)誤取決于真正的、但未知的百分率以及所計數(shù)的精子數(shù)(N)。其估測標(biāo)準(zhǔn)誤為 p)/N-p(10019v計數(shù)100個精子

9、且正常形態(tài)的實際百分率為20，標(biāo)準(zhǔn)誤4.0，相應(yīng)的95%可信限是12.29%27.8。v計數(shù)200個精子，標(biāo)準(zhǔn)誤2.89%，95可信限是14.525.5。v計數(shù)400個精子，標(biāo)準(zhǔn)誤2.0%，95%可信限為16.123.9。 20v加大精子的檢測數(shù)量當(dāng)然可以降低計量誤差。但有得必有失，得是提高統(tǒng)計精確度，而失足技術(shù)員可能因疲勞而喪失準(zhǔn)確性。必須在兩者之間把握好平衡。21精液分析中的其他誤差 v由同一技術(shù)員采用同一程序來重復(fù)分析有可能產(chǎn)生比單純計量誤差更大的結(jié)果變異，說明存在某些額外的隨機(jī)誤差 v樣本混勻不充分(常見于粘稠或凝集的樣本)、技術(shù)員緊張(計數(shù)不穩(wěn)定或記錄錯誤)、技術(shù)粗糙(如在加樣或涂片

10、、計數(shù)板準(zhǔn)備過程中不仔細(xì))或儀器的變異(如自動加樣器磨損就可能降低加樣和稀釋的可重復(fù)性)等。v而反過來如果所得結(jié)果比預(yù)期的計量誤差更小的話，則提示可能有記錄錯誤或是有受先前測量值誘導(dǎo)的可能性。 22v由不同技術(shù)員來重復(fù)測量所產(chǎn)生的差異可能來自系統(tǒng)性偏差、持續(xù)的計算誤差的偏差、或?qū)π螒B(tài)和活力的分類標(biāo)準(zhǔn)不同等。例如，常常高估活動精子的百分率，原因在于眼睛對于運(yùn)動的物體要敏感。通過系統(tǒng)性地先計數(shù)所有的活動精子，然后再計數(shù)同一區(qū)域內(nèi)的不活動精子，就可以降低此種誤差。 23質(zhì)量控制的實用性方案 v假定常規(guī)已經(jīng)得到執(zhí)行l(wèi)隨時樣本結(jié)果的監(jiān)測和對比l每周分析不同技術(shù)員所做的主要精液指標(biāo)的重復(fù)測量值l每月分析檢

11、測結(jié)果的月均值l每季參加EQA方案，校正加樣器l每年校正計數(shù)板和其他設(shè)備l實驗室的QC活動隨技術(shù)員經(jīng)驗和工作量的不同而有所變化。應(yīng)有15的樣本進(jìn)行IQC 24樣本自身的常規(guī)監(jiān)測和對比v針對同一樣本同等體積的重復(fù)計量，其差異應(yīng)為零，標(biāo)準(zhǔn)誤等于兩部分計量總和的平方根。v在95的重復(fù)樣本中，兩次計量的差異要小于1.96個標(biāo)準(zhǔn)誤。 25v對于不同運(yùn)動級別精子比率和形態(tài)特征的重復(fù)檢測v根據(jù)每例樣本中所計數(shù)的精子數(shù)N得出兩個獨(dú)立的百分率p1和p2，并進(jìn)行比較。v預(yù)期的差異d的限度表達(dá)為 d=pl-p21.96v =(p1+p2)/2 N/ )p100(p2p26每周內(nèi)部質(zhì)量控制v檢測技術(shù)員自身或技術(shù)員之間

12、的差異v一種簡單的IQC方法是將樣本分成多份進(jìn)行重復(fù)檢測，并且分析的所有步驟均需重復(fù)進(jìn)行。v針對同一涂片或樣本池檢測兩次并不是真正的重復(fù)，不可能發(fā)現(xiàn)樣本制備和稀釋過程中出現(xiàn)的誤差。v重復(fù)檢測應(yīng)按常規(guī)檢測一模一樣的方式進(jìn)行，而且不要讓技術(shù)員知道他所檢測的是IQC樣本。27v儲存的精液樣本可用于IQC，優(yōu)勢在于其真值或目標(biāo)值是已知的。v更簡單的方法是讓不同的技術(shù)員各自獨(dú)立測試同一份新鮮樣本或幾份樣本的混合樣本，這佯就可測定他們之間的差異性。但這樣由于真值是未知的，所以要求所有的技術(shù)員在幾乎同一時間首先測定活力。 28用儲存樣本進(jìn)行IQC：精子密度29質(zhì)控圖的制作vLevey-Jennings質(zhì)控圖

13、最常用vZ-分?jǐn)?shù)圖vWestgard質(zhì)控圖vYouden圖vMonica質(zhì)控圖 30統(tǒng)計處理v至少測定了5例(最好是1O例)QC樣本v采用Xbar圖和S圖v設(shè)置警戒限和處置限1、XbarA2.nSbar和XbarA3.nSbar系數(shù)A2.n和A3.n從標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)計表中查找2、直接計算Xbar2s/ 和Xbar3s/ ，其中s為技術(shù)員間的集合標(biāo)準(zhǔn)差(pooled standard deviation) nn31v常見的數(shù)據(jù)分布有三個類型：正態(tài)分布、二項分布、普哇松（Poisson）分布。在臨床檢驗工作中定量分析屬正態(tài)分布，白細(xì)胞分類屬二項分布，細(xì)胞計數(shù)及細(xì)菌計數(shù)屬普哇松分布。相應(yīng)三種分布，質(zhì)控圖也有

14、三個類型：用于正態(tài)分布時有xS控制圖、xR控制圖、xR控制圖等（LeveyJennings質(zhì)控圖 ）；用于二項分布的有p控制圖、pn控制圖等；用于普哇松分布的有c控制圖、u控制圖等。 3233QC圖的基本控制原則 控制原則誤差敏感一個結(jié)果超出處置限隨機(jī)誤差或系統(tǒng)誤差連續(xù)兩個結(jié)果都超出警戒上限或都低于警戒下限系統(tǒng)誤差連續(xù)兩個結(jié)果，一個高于警戒線上線，一個低于警戒下限隨機(jī)誤差連續(xù)八個結(jié)果全部高于或全低于均值系統(tǒng)性誤差34實例135使用Excel制作質(zhì)控圖363738vXbar=(38.0+37.5+39.0)/10=39.7vSbar=(3.27+3.70+3.74)/10=3.40vN=4，A2

15、.n=1.085，A3.n=1.628v內(nèi)控制限（警戒限）：XbarA2.nSbar=39.71.0853.40，即（36.0，43.3）百萬/ml；v外控制限（處置限）：XbarA3.nSbar=39.71.6283.40，即（34.1，45.2）百萬/ml。3910/)sss(210222110/)74. 370. 327. 3(222n4n4技術(shù)員間標(biāo)準(zhǔn)差= SbarCn=3.401.085=3.69或計算集合標(biāo)準(zhǔn)差：兩種方法結(jié)果相近。警戒限：Xbar2s/=39.723.84/(35.9， 43.5)=39.733.84/(33.9， 45.5)S=3.84處置限：Xbar3s/404

16、142434445樣本樣本1 12 23 34 45 56 67 78 89 91010均數(shù)38.00 37.50 39.50 40.50 38.00 37.00 42.00 43.50 41.50 39.00 處置上限45.20 45.20 45.20 45.20 45.20 45.20 45.20 45.20 45.20 45.20 警戒上限43.30 43.30 43.30 43.30 43.30 43.30 43.30 43.30 43.30 43.30 Xbar39.65 39.65 39.65 39.65 39.65 39.65 39.65 39.65 39.65 39.65 警戒

17、下限36.00 36.00 36.00 36.00 36.00 36.00 36.00 36.00 36.00 36.00 處置下限34.10 34.10 34.10 34.10 34.10 34.10 34.10 34.10 34.10 34.10 4647484950v利用(均數(shù)-Xbar)/Sbar作質(zhì)控圖樣本12345678910離均差/Sbar -0.485 -0.632-0.0440.2497-0.485-0.7790.6904 1.131 0.5435-0.19151使用SPSS13.0制作質(zhì)控圖5253545556575859606162檢驗技術(shù)員間的系統(tǒng)性差異檢驗技術(shù)員間的系

18、統(tǒng)性差異 v可以通過對QC樣本進(jìn)行技術(shù)員因素和QC樣本因素的雙側(cè)方差分析來檢驗 6364ANOVAANOVAresult48.500316.1671.034.389562.6003615.628611.10039Between GroupsWithin GroupsTotalSum ofSquaresdfMean SquareFSig.65用儲存樣本進(jìn)行IQC：精子活力和形態(tài)66v檢測精子活力和形態(tài)的QC程序同上面的精子密度檢測步驟一樣，只不過檢測的是百分比。v由于所計數(shù)的精子數(shù)量很大，所以控制限的設(shè)定采用正態(tài)分布。v百分率大約在2080的范圍是適宜的，但如果百分率過低(90)就差一些。67所

19、測定百分比(p)的標(biāo)準(zhǔn)差為p)/N-p(100其中N代表已分類的精子數(shù)量；若共分類了400精子，p值為2080；標(biāo)準(zhǔn)差就是2.0%2.5%；當(dāng)p值等于50時，值最大。 68v可將率進(jìn)行角(或弧度正弦平方根)轉(zhuǎn)換，從而使用定量資料的指控圖100/psinz1)N2/(1Sz精子密度的QC，只取決于所計量的精子數(shù)N 69月平均監(jiān)測月平均監(jiān)測707172檢測技術(shù)員間的系統(tǒng)性差異精子密度(百萬/ml)樣本12345技術(shù)員1108451005092技術(shù)員2103471025096技術(shù)員310446894188均值105.0 46.0 97.0 47.0 92.0 采用方差分析737475Tests of

20、 Between-Subjects EffectsTests of Between-Subjects EffectsDependent Variable: result9916.800a61652.800145.621.00089861.400189861.4007917.304.000109.200254.6004.811.0429807.60042451.900216.026.00090.800811.35099869.0001510007.60014SourceCorrected ModelInterceptpersonnumberErrorTotalCorrected TotalTyp

21、e III Sumof SquaresdfMean SquareFSig.R Squared = .991 (Adjusted R Squared = .984)a. 76Multiple ComparisonsMultiple ComparisonsDependent Variable: resultLSD-.602.131.785-5.514.315.40*2.131.035.4910.31.602.131.785-4.315.516.00*2.131.0231.0910.91-5.40*2.131.035-10.31-.49-6.00*2.131.023-10.91-1.09(J) pe

22、rson231312(I) person123MeanDifference(I-J)Std. ErrorSig.Lower BoundUpper Bound95% Confidence IntervalBased on observed means.The mean difference is significant at the .05 level.*. 77定性試驗的質(zhì)控個值控制圖。根據(jù)容許區(qū)間的原理繪制，適用于單個測定值的控制。 率的控制圖。不合格品控制圖，適用于不合格品控制圖，適用于屬性資料的質(zhì)量控制。屬性資料的質(zhì)量控制。 78不同試驗員間不同試驗員間已試驗員甲試驗員符合不符合符 合不

23、符合配對卡方檢驗、配對卡方檢驗、Kappa值值79對新方法的評價v靈敏度：所有病人中獲得陽性結(jié)果的百分比 v特異性：所有非病人中獲得陰性結(jié)果的百分比 v陽性預(yù)示值：所有陽性結(jié)果中正確的陽性百分比 v陰性預(yù)示值：所有陰性結(jié)果中正確的陰性百分比 v約登指數(shù)靈敏度特異性1，約登指數(shù)越接近1，表示分析方法越準(zhǔn)確。vKappa值 ：一致性80靈敏度=a/(a+c) 100%特異度=d/(b+d) 100%陽性預(yù)測值=a/(a+b) 100%陰性預(yù)測值=d/(c+d) 100%診斷試驗金標(biāo)準(zhǔn)確診合計病例非病例陽性a(真陽性)b(假陽性)a+b陰性c(假陽性)d(真陰性)c+d合計a+cb+dN81應(yīng)用質(zhì)控圖中應(yīng)注意的問題應(yīng)用質(zhì)控圖中應(yīng)注意的問題 v1.質(zhì)控圖繪制后只有滿足了以下兩個條件方可用于日常質(zhì)控：l（1）上、下控制界線必須小于臨床允許誤差；l（2）20次質(zhì)控值的分布，按Wes