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文檔簡介

1、能將微量的DNA大幅增加,是分子生物學(xué)研究和實驗的常規(guī)方法,PCR實驗室廣泛應(yīng)用于生物學(xué)各個領(lǐng)域,例如:艾滋病檢測,乙型肝炎,禽疫病,癌基因的檢測和診斷,DNA指紋,個體識別,親子鑒定及法醫(yī)物證等等,今天為大家進行詳解。一.PCR實驗室布局PCR實驗室原則上為試劑準(zhǔn)備區(qū),樣品制備區(qū),擴增區(qū)和擴增產(chǎn)物分析區(qū)四個單獨的工作區(qū)域,并設(shè)有專用走廊,各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)緩沖間,工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。不同功能的工作區(qū)應(yīng)是分隔獨立的,各工作區(qū)有明顯的標(biāo)志,不能直通,如果緊密連接,需安裝物品傳遞窗。前兩區(qū)為擴增前區(qū),后兩區(qū)為擴增后區(qū),即從:試劑準(zhǔn)備區(qū)樣品制備區(qū)PCR擴增室產(chǎn)物分析室,不得逆向流動。實驗室的氣

2、流也應(yīng)從擴增前區(qū)流向擴增后區(qū),不得逆向流動。各工作區(qū)頂部應(yīng)該安裝紫外燈,紫外燈波長為254mm,每20一支40W的紫外燈。二.實驗室各區(qū)功能及主要設(shè)備1. 試劑準(zhǔn)備區(qū):主要進行試劑的制備,分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑盒用于樣品制作的材料應(yīng)直接運送至該區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的試劑。本區(qū)主要設(shè)備有天平,冰箱,離心機,加樣器,振蕩器等。對于氣流壓力的控制,本區(qū)并沒有嚴(yán)格的要求,一般為+10Pa。2. 樣品制備區(qū):主要進行樣品的保存,核酸提取,貯存及其加入至擴增反應(yīng)管和測定DNA的合成。本區(qū)主要設(shè)備有冰箱,生物安全柜,離心機,加樣器,振蕩器等。本區(qū)

3、的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為正壓,以避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染,一般為+10Pa。3. 擴增區(qū):主要進行DNA擴增。此外,已制備的DNA模板(來自樣品制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來自試劑準(zhǔn)備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進行。本區(qū)主要設(shè)備有:擴增儀,冰箱,離心機,加樣器等。本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為負壓,以避免氣溶從本區(qū)漏出一般為-25Pa。4. 擴增產(chǎn)物分析區(qū):擴增產(chǎn)物的測定。本區(qū)主要設(shè)備有酶標(biāo)儀,洗板機.加樣器和水浴箱等。本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區(qū)域為負壓,一般為-25Pa,以避免擴增產(chǎn)物從本區(qū)擴散至其它區(qū)域三. PCR

4、實驗室通風(fēng)系統(tǒng)及壓力控制各區(qū)域之間應(yīng)具備單間的實驗工藝流,物流,人流與氣流,形成單向流程的保護屏障,避免實驗室之間的相互干擾,防止氣溶膠擴散對實驗過程造成污染。PCR實驗室并沒有嚴(yán)格的凈化要求,但是為避免各個實驗區(qū)域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式,嚴(yán)格控制送,排風(fēng)的比例以保證個實驗區(qū)的壓力要求。四.PCR實驗室裝飾實驗室圍護結(jié)構(gòu)應(yīng)牢固,氣密性好;所有陰陽角宜采用圓弧過度;墻體內(nèi)壁光潔,不積塵,耐腐蝕,易清洗消毒;地面使用PVC卷材或環(huán)氧樹脂自流坪,材料應(yīng)滿足無縫隙,無滲漏,光潔,耐腐蝕的要求。五.PCR實驗室注意事項1.幾個區(qū)域的大小設(shè)置情況,試劑準(zhǔn)備區(qū),擴增區(qū),擴增產(chǎn)物分析區(qū),空間可以相對小一些,樣品制備區(qū)要放置生物安全柜和低溫冰箱,空間應(yīng)大一些。2.試劑準(zhǔn)備區(qū),樣品制備區(qū)設(shè)緊急洗眼器,以保證操作人員的安全。西安博爾實驗室承接各類實驗室整體建設(shè),15年實驗室行業(yè)解決方案經(jīng)驗,做過上百個行業(yè)的實驗室建設(shè):化學(xué)實驗室設(shè)計物理實驗室設(shè)計研發(fā)實驗室設(shè)計PCR實驗室設(shè)計微生物實驗室設(shè)計醫(yī)學(xué)實驗室設(shè)計BSL-2實驗室設(shè)計醫(yī)藥實驗室設(shè)計分子生物實驗室設(shè)計食品檢測實驗室設(shè)計藥品檢驗實驗室設(shè)計細胞實驗室設(shè)計動物房實驗室設(shè)計石油化工實驗室設(shè)計環(huán)境監(jiān)測實驗室設(shè)計公安系統(tǒng)實驗室設(shè)計

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