糖化血紅蛋白標準化及檢測方法比較PPT課件

1、糖化血紅蛋白標準化及不同檢測方法的差異基蛋生物 市場推廣部PPT模板下載： 行業(yè)PPT模板： 節(jié)日PPT模板： PPT素材下載： PPT圖表下載： 優(yōu)秀PPT下載： PPT教程： Word教程： Excel教程： 資料下載： PPT課件下載： 范文下載： 試卷下載： 教案下載： 內(nèi)容目錄糖化血紅蛋白標準化糖化血紅蛋白標準化糖化血紅蛋白（糖化血紅蛋白（GHB）檢測方法及產(chǎn)品示例檢測方法及產(chǎn)品示例常用檢測方法之比較常用檢測方法之比較1234糖化血紅蛋白（GHb）GHb是指結(jié)合了任何形式碳水化合物的血紅蛋白，血紅蛋白與糖基發(fā)生非酶促，形成了不可逆的復(fù)合物。HbHbHbAHbA0 0HbAHbA1 1

2、HbA1aHbA1aHbA1bHbA1bHbA1cHbA1cHbAHbA()HbAHbA2 2()HbFHbF()95%95%2%2%1-3.5%1-3.5%成人血紅蛋白分三種，成人血紅蛋白分三種，HbAHbA為主要成人為主要成人HbHb非糖化非糖化HbHb糖化糖化HbHb6-8%6-8%87-89%87-89%血紅蛋白血紅蛋白1%1%1%1%4%-6%4%-6%糖化血紅蛋白的形成血紅蛋白HbA由兩個亞基和兩個亞基組成，和亞基上都有糖化位點，其中亞基第1位纈氨酸主鏈氨基糖化率最高。根據(jù)糖種類，糖基化血紅蛋白可分為葡萄糖糖化、果糖糖化及乳糖糖基化血紅蛋白等。人體內(nèi)游離的葡萄糖含量遠高于其他糖類物

3、質(zhì)， 亞基的氮端纈氨酸主鏈氨基的糖化概率最高，因此體內(nèi)大部分糖基化血紅蛋白為 亞基氮端纈氨酸與葡萄糖的加合物，該物質(zhì)被命名為HbA1c。HbA1c糖基化位點結(jié)構(gòu)圖亞基亞基血紅素血紅素血紅素血紅素檢測方法學分類1、親和層析、親和層析2、免疫法、免疫法3、酶法、酶法4、顯色法、顯色法根據(jù)根據(jù)Ghb和非和非GHb帶電不同帶電不同基于基于Hb上糖基化上糖基化基團的結(jié)構(gòu)特點基團的結(jié)構(gòu)特點1、離子交換層析、離子交換層析2、電泳法、電泳法3、等電點聚焦法、等電點聚焦法檢測方法：離子交換層析主要有高效液相色譜法( high performance liquid chromatography，HPLC) 和手工

4、微柱法。此方法是基于血紅蛋白 鏈N 末端纈氨酸糖化后所帶電荷不同而建立。在中性pH條件下，HbA1c 攜帶的正電荷相對較少，因此可通過離子交換層析法將其與其他組分分離。檢測方法：毛細管電泳法毛細管電泳能分離檢測糖化血紅蛋白和血紅蛋白的變異體，樣品用量少、操作簡便、重復(fù)性好、省時、高效。完全自動化操作，簡單易用，在減少人為誤差的基礎(chǔ)上，重復(fù)性也得到了極大提高。SEBIA全自動高壓液相毛細管電泳儀檢測方法：瓊脂凝膠電泳法Hb于酸性緩沖液條件下(pH6.0)，在瓊脂糖凝膠上的電泳遷移取決于Hb在凝膠上的吸附情況及其所帶的電荷。HbA0因其末端的纈氨酸殘基對凝膠的負電荷有高度的親和力，因此它的遷移速率

5、減慢。HbA1c因它所連接的糖的阻斷作用，不可再與凝膠結(jié)合，利用HbA1c和HbA0對凝膠的親和力不同，導(dǎo)致的電泳遷移速率也不同，通過電泳將各成分分開。SEBIA蛋白質(zhì)電泳儀檢測方法：等電點聚集法在聚丙烯酞凝膠中加入載體兩性介質(zhì)（如ampholin）的薄板上形成一個由陽極到陰極逐漸增加的pH梯度。溶血液中各個組分將移動到各自等電點的pH位置上，這樣就得到比一般電泳法更好的分劃效果和比較集中的色帶。GE Ettan IPGphor 3等電聚焦電泳儀檢測方法：親和層析法由交聯(lián)了間氨基苯硼酸間氨基苯硼酸的瓊脂糖珠作為分離載體。當總的GHb通過載體時，硼酸可與整合在血紅蛋白分子中的葡萄糖順位二醇基發(fā)生

6、可逆性結(jié)合，使糖化的Hb選擇性地結(jié)合于凝膠柱上，其他非糖化Hb等隨緩沖液流出；然后用另一種含糖或多羥化合物的緩沖液將GHb洗脫下來，利用兩部分Hb本身的顏色，在415nm條件下測定并計算出親和色譜所測的GHb。伯樂In2it糖化血紅蛋白儀Alere Afinion AS100 Analyzer檢測方法：免疫法化學發(fā)光法：又叫離子捕獲法，采用離子捕捉免疫分析法，應(yīng)用抗原抗體反應(yīng)原理，聯(lián)合熒光標記物，通過連接帶負電的多陰離子復(fù)合物，吸附到帶正電的纖維表面，經(jīng)過一系列徹底清洗等步驟后，測定熒光強度變化率，計算濃度。檢測方法：免疫法比濁法：又有膠乳凝集法和免疫比濁法兩種?？蓪崿F(xiàn)和自動化分析儀很好地結(jié)合

7、起來，具有快速、準確、特異性強、重復(fù)性好、靈敏度高、線性范圍寬等優(yōu)點，可以使用自動化分析儀進行批量檢測。檢測方法：免疫法免疫層析法：免疫層析法操作簡便易行、快速準確、試劑穩(wěn)定。更易于實現(xiàn)POC檢測，有助于醫(yī)生即時獲悉患者血糖水平，并及時給予患者醫(yī)療指導(dǎo)，以避免糖尿病診斷和治療的延誤，未來有著較為廣闊的應(yīng)用前景。Bayer 拜安時手持式糖化檢測儀檢測方法：酶法全血經(jīng)溶血處理后，用特異蛋白內(nèi)切酶將酶解消化成果糖氨基酸，再經(jīng)果糖氨基酸氧化酶作用下產(chǎn)生過氧化氫（H2O2），H2O2的濃度與血液中GHb的含量呈正比。 H2O2在過氧化物酶的作用下與相應(yīng)的色原耦聯(lián)，發(fā)生顏色變化，根據(jù)其變化程度可得H2O2

8、濃度，進而得知樣本中GHb的含量。積水醫(yī)療酶法生化試劑糖化血紅蛋白檢測標準化瑞典瑞典Mono S 方法方法日本日本JDS/JSCC 方法方法美國美國NGSP方法方法對不同的對不同的HbA1c檢測檢測方法采用統(tǒng)一參考標方法采用統(tǒng)一參考標準準(采用采用HPLC Bio-Rex 70 陽離子交換柱陽離子交換柱)進行進行校準，使不同方法所校準，使不同方法所測結(jié)果具有可比性測結(jié)果具有可比性2000 年，年，JSCC 啟用啟用KO500 陽離子陽離子HPLC ，與，與JDS 合作合作設(shè)計了新的設(shè)計了新的HbA1c檢測校檢測校準物，通過新校準品校準準物，通過新校準品校準后的后的KO500 HPLC HbA1

9、c檢檢測法，成為測法，成為JDS/JSCC 的參的參考標準化方案考標準化方案2004 年，年，GE Healthcare 在在其離子交換操作手冊中，其離子交換操作手冊中，詳細介紹了詳細介紹了Mono S HPLC 方法用于檢測方法用于檢測HbA1c的操的操作步驟。證實作步驟。證實Mono S 5/50 GL 柱檢測精度上具有優(yōu)越柱檢測精度上具有優(yōu)越性。性。IFCC法：法：2007 年國際臨床化學聯(lián)合會年國際臨床化學聯(lián)合會(IFCC) 重新明確了重新明確了HbA1c 的命名、的命名、性質(zhì)、單位性質(zhì)、單位: 全稱為全稱為 鏈血紅蛋白鏈血紅蛋白鏈鏈N 末端脫氧果糖基血紅蛋白末端脫氧果糖基血紅蛋白; 特特別強調(diào)別強調(diào)HbA1c 測定的是測定的是“物質(zhì)分數(shù)物質(zhì)分數(shù)”，而不是，而不是“質(zhì)量分數(shù)質(zhì)量分數(shù)”; 推薦使推薦使用用( mmol /mol) 作為作為HbA1c 的單位，此建議為的單位，此建議為HbA1c 結(jié)果數(shù)據(jù)提供了結(jié)果數(shù)據(jù)提供了非常明確的計量單位，可溯源到溯源鏈的最高等級國際單位制。非常明確的計量單位，可溯源到溯源鏈的最高等級國際單位制。 糖化血紅蛋白檢測標準化2004 年，Hoelzel 等發(fā)表了關(guān)于HbA1c檢測的IFCC 標準法與美國、日本、瑞典3 個國家標準法之間的比較