生物有機(jī)肥產(chǎn)品登記流程

1、 WORD格式可編輯 填寫肥料正式登記表1. 生產(chǎn)者基本資料（1） 生產(chǎn)者注冊證明材料（2） 生產(chǎn)企業(yè)基本情況資料（3） 國外及中國港、澳、臺地區(qū)產(chǎn)品補(bǔ)充在其他國家（地區(qū)）新登記使用情況（4） 其他需要補(bǔ)充的證明文件等材料2. 產(chǎn)品執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)3. 產(chǎn)品標(biāo)簽樣式4. 肥料效應(yīng)示范資料提交由農(nóng)業(yè)部認(rèn)定單位最近4年以內(nèi)在2個(gè)以上（含）不同省完成并出具的示范試驗(yàn)資料。經(jīng)濟(jì)作物面積5畝以上、大田作物20畝以上，對照1-2畝。肥料效應(yīng)示范試驗(yàn)應(yīng)包括以下資料（1） 田間示范試驗(yàn)肥料的樣品報(bào)告。由省級以上經(jīng)計(jì)量認(rèn)證的肥料檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)檢測出具（2） 田間示范試驗(yàn)報(bào)告。報(bào)告應(yīng)是與標(biāo)簽（說明書）標(biāo)明的產(chǎn)品主要功效相對應(yīng)的

2、、經(jīng)臨時(shí)登記作物的天際示范試驗(yàn)結(jié)果（3） 作用方式和作用機(jī)制研究報(bào)告。根據(jù)申請者提供的產(chǎn)品資料情況，由農(nóng)業(yè)部確定是否需要必須提交（4） 國外及中國港、澳、臺地區(qū)產(chǎn)品在本國（地區(qū)）或其他國家（地區(qū)）新的肥效試驗(yàn)報(bào)告結(jié)果。5. 毒性報(bào)告 由農(nóng)業(yè)部確定6. 殘留試驗(yàn)及殘留檢測方法試驗(yàn)7. 肥料樣品由產(chǎn)品所在省級農(nóng)業(yè)行政主管部門抽取成品肥料樣品并封口產(chǎn)品包裝及標(biāo)簽 GB 18382-2001要求：1. 菌種：安全、有效，由明確來源和種名2. 外觀：粉劑應(yīng)松散、無惡臭味；顆粒應(yīng)無明顯機(jī)械雜質(zhì)、大小均勻、無腐敗味3. 技術(shù)指標(biāo)：NY 884-2004前 言本標(biāo)準(zhǔn)的5.1、5.3和第8章條文為強(qiáng)制性條款，其

3、余為推薦性條款。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄C和附錄D為規(guī)范性附錄，附錄B為資料性附錄。農(nóng)用微生物菌劑1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了農(nóng)用微生物菌劑（即微生物接種劑）的術(shù)語和定義、產(chǎn)品分類、要求、試驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則、包裝、標(biāo)識、運(yùn)輸和貯存。本標(biāo)準(zhǔn)適用于農(nóng)用微生物菌劑類產(chǎn)品。2規(guī)范性引用文件（略）3術(shù)語和定義（略）4產(chǎn)品分類產(chǎn)品按劑型可分為液體、粉劑、顆粒型；按內(nèi)含的微生物種類或功能特性可分為根瘤菌菌劑、固氮菌菌劑、解磷類微生物菌劑、硅酸鹽微生物菌劑、光合細(xì)菌菌劑、有機(jī)物料腐熟劑、促生菌劑、菌根菌劑、生物修復(fù)菌劑等。5要求5.1菌種 生產(chǎn)用的微生物菌種應(yīng)安全、有效。生產(chǎn)者應(yīng)提供菌種的分類鑒定報(bào)告，包括屬及種的學(xué)名、形

4、態(tài)、生理生化特性及鑒定依據(jù)等完整資料。生產(chǎn)者應(yīng)提供菌種安全性評價(jià)資料。采用生物工程菌，應(yīng)具有允許大面積釋放的生物安全性有關(guān)批文。5.2產(chǎn)品外觀（略）5.3產(chǎn)品技術(shù)指標(biāo)5.3.1農(nóng)用微生物菌劑產(chǎn)品的技術(shù)指標(biāo)見表1，其中有機(jī)物料腐熟劑產(chǎn)品的技術(shù)指標(biāo)按表2執(zhí)行。 表1 農(nóng)用微生物菌劑產(chǎn)品的技術(shù)指標(biāo)項(xiàng) 目劑 型液 體粉 劑顆 粒有效活菌數(shù)(cfu)a，億/g(mL)2.02.01.0霉菌雜菌數(shù)，個(gè)/g(mL)3.01063.01063.0106雜菌率， %10.020.030.0水分，%-35.020.0細(xì)度，%-8080pH值5.08.05.58.55.58.5保質(zhì)期b，月36a 復(fù)合菌劑，每一種有

5、效菌的數(shù)量不得少于0.01億/g(mL)；以單一的膠質(zhì)芽胞桿菌（Bacillus mucilaginosus）制成的粉劑產(chǎn)品中有效活菌數(shù)不少于1.2億/g。b 此項(xiàng)僅在監(jiān)督部門或仲裁雙方認(rèn)為有必要時(shí)檢測。 表2 有機(jī)物料腐熟劑產(chǎn)品的技術(shù)指標(biāo)項(xiàng)目劑 型液 體粉 劑顆 粒有效活菌數(shù)(cfu)， 億/g(mL)1.00.500.50纖維素酶活a，U/g（mL）30.030.030.0蛋白酶活b，U/g(mL)15.015.015.0水 分，%-35.020.0細(xì) 度，%-7070pH值5.08.55.58.55.58.5保質(zhì)期c，月36a 以農(nóng)作物秸稈類為腐熟對象測定纖維素酶活。b 以畜禽糞便類為腐

6、熟對象測定蛋白酶活。c 此項(xiàng)僅在監(jiān)督部門或仲裁雙方認(rèn)為有必要時(shí)檢測。5.3.2農(nóng)用微生物菌劑產(chǎn)品中無害化指標(biāo)見表3。 表3 農(nóng)用微生物菌劑產(chǎn)品的無害化技術(shù)指標(biāo)參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)極限糞大腸菌群數(shù)，個(gè)/g(mL)100蛔蟲卵死亡率，%95砷及其化合物（以As計(jì)），mg/kg75鎘及其化合物（以Cd計(jì)），mg/kg10鉛及其化合物（以Pb計(jì)），mg/kg100鉻及其化合物（以Cr計(jì)），mg/kg150汞及其化合物（以Hg計(jì)），mg/kg56試驗(yàn)方法6.1儀器設(shè)備（略）6.2試劑（略）6.3產(chǎn)品參數(shù)的檢測6.3.1外觀(感官)的測定取少量樣品放到白色搪瓷盤(或白色塑料調(diào)色板)中，仔細(xì)觀察樣品的顏色、形狀、質(zhì)地。

7、6.3.2有效活菌數(shù)的測定采用平板計(jì)數(shù)法，根據(jù)所測微生物的種類選用適宜的培養(yǎng)基。若采用最大可能數(shù)（Most Probable Number，MPN）5管法，遵照附錄C的規(guī)定。6.3.2.1系列稀釋稱取樣品10 g（精確到0.01 g），加入帶玻璃珠的100 mL的無菌水中(液體菌劑取l0.0 mL加入90 mL的無菌水中)，靜置20 min，在旋轉(zhuǎn)式搖床上200 r/min充分振蕩30 min，即成母液菌懸液（基礎(chǔ)液）。用無菌移液管分別吸取5.0mL上述母液菌懸液加入45 mL無菌水中，按1:10進(jìn)行系列稀釋，分別得到1:1101，1:1102，1:1103，1:1104稀釋的菌懸液（每個(gè)稀釋

8、度應(yīng)更換無菌移液管）。6.3.2.2加樣及培養(yǎng)每個(gè)樣品取3個(gè)連續(xù)適宜的稀釋度，用無菌移液管分別吸取不同稀釋度菌懸液0.1 mL，加至預(yù)先制備好的固體培養(yǎng)基平板上，分別用無菌玻璃刮刀將不同稀釋度的菌懸液均勻地涂于瓊脂表面。每一稀釋度重復(fù)3次，同時(shí)以無菌水作空白對照，于適宜的條件下培養(yǎng)。6.3.2.3菌落識別根據(jù)所檢測菌種的技術(shù)資料，每個(gè)稀釋度取不同類型的代表菌落通過涂片、染色、鏡檢等技術(shù)手段確認(rèn)有效菌。當(dāng)空白對照培養(yǎng)皿出現(xiàn)菌落數(shù)時(shí)，檢測結(jié)果無效，應(yīng)重做。6.3.2.4菌落計(jì)數(shù)以出現(xiàn)20300個(gè)菌落數(shù)的稀釋度的平板為計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)（絲狀真菌為10150個(gè)菌落數(shù)），分別統(tǒng)計(jì)有效活菌數(shù)目和雜菌數(shù)目。當(dāng)只有一

9、個(gè)稀釋度，其平均菌落數(shù)在20300個(gè)之間時(shí)，則以該平均菌落數(shù)計(jì)算。若有兩個(gè)稀釋度，其平均菌落數(shù)均在20300個(gè)之間時(shí)，應(yīng)按兩者菌落總數(shù)之比值決定。若其比值小于等于2應(yīng)計(jì)算兩者的平均數(shù)；若大于2則以稀釋度小的菌落平均數(shù)計(jì)算。有效活菌數(shù)按式（1）或式（2）計(jì)算： nm=kv1/(m0v2)10-8 （1）nv=kv1/(v0v2)10-8 （2）式中：nm 質(zhì)量有效活菌數(shù)， 億/g nv 體積有效活菌數(shù)， 億/mL 菌落平均數(shù)， 個(gè)k 稀釋倍數(shù)v1 基礎(chǔ)液體積， mLv2 菌懸液加入量， mLv0 樣品量， mLm0 樣品量， g6.3.3霉菌雜菌數(shù)的測定采用馬丁培養(yǎng)基，測定方法同6.3.2。6.

10、3.4雜菌率的測定除樣品有效菌外其它的菌均為雜菌。樣品中雜菌率按式（3）計(jì)算： m=n1/(n1+n)100 （3）式中：m 樣品雜菌率， % n1 雜菌數(shù)， 億/g(mL) n 有效活菌數(shù)， 億/g(mL)6.3.5水分的測定將空鋁盒置于干燥箱中105 2 烘干 0.5 h，冷卻后稱量記錄空鋁盒的質(zhì)量。然后稱取2份平行樣品（顆粒型樣品，應(yīng)先粉碎過1.0 mm試驗(yàn)篩），每份20 g（精確到0.01 g），分別加入鋁盒中并記錄質(zhì)量。將裝好樣品的鋁盒置于干燥箱中105 2 下烘干4 h6 h。取出置于干燥器中冷卻20 min后進(jìn)行稱量。水分含量按式（4）計(jì)算（結(jié)果為兩次測定的平均值）： w= (m

11、1-m2)/(m1-m0)100 （4）式中：w 樣品水分含量， %m0 空鋁盒的質(zhì)量， gm1 樣品和鋁盒的質(zhì)量， gm2 烘干后樣品和鋁盒的質(zhì)量， g6.3.6細(xì)度的測定6.3.6.1粉劑樣品稱取樣品50 g（精確到0.1 g），放入300 mL燒杯中，加200 mL水浸泡10 min30 min后倒入孔徑0.18 mm的試驗(yàn)篩中，然后用水沖洗，并用刷子輕輕地刷篩面上的樣品，直至篩下流出清水為止。將試驗(yàn)篩連同篩上樣品放入干燥箱中，在105 2 烘干4 h6 h。冷卻后稱量篩上樣品質(zhì)量。樣品細(xì)度按式（5）計(jì)算：s=1-m1/m0（1-w）100 （5）式中：s 篩下樣品質(zhì)量分?jǐn)?shù)， %m0 樣

12、品質(zhì)量， gw 樣品含水量， %m1 篩上干樣品質(zhì)量， g6.3.6.2顆粒樣品稱取樣品50 g（精確到0.1 g），將兩個(gè)不同孔徑的試驗(yàn)篩（1.0 mm和4.75 mm）摞在一起放在底盤上(大孔徑試驗(yàn)篩放在上面)。樣品倒入大孔徑試驗(yàn)篩內(nèi)篩樣品，然后稱小孔徑試驗(yàn)篩上的樣品質(zhì)量。顆粒細(xì)度按式（6）計(jì)算： g=m1/m0100 （6）式中：g樣品質(zhì)量分?jǐn)?shù)， %m1小孔徑試驗(yàn)篩上樣品質(zhì)量，gm0樣 品 質(zhì) 量， g6.3.7pH值的測定打開酸度計(jì)電源預(yù)熱30 min，用標(biāo)準(zhǔn)溶液校準(zhǔn)。pH值的測定，每個(gè)樣品重復(fù)三次，計(jì)算三次的平均值。6.3.7.1液體樣品用量筒取40mL樣品放入50 mL的燒杯中，直

13、接用酸度計(jì)測定，儀器讀數(shù)穩(wěn)定后記錄。6.3.7.2粉劑樣品稱取樣品15 g，放入50 mL的燒杯中，按1:2(樣品:無離子水)的比例將無離子水加到燒杯中(如果樣品含水量低，可根據(jù)基質(zhì)類型按1:31:5的比例加無離子水)，攪拌均勻。然后靜置30 min，測樣品懸液的pH值，儀器讀數(shù)穩(wěn)定后記錄。6.3.7.3顆粒樣品樣品先研碎過1.0 mm試驗(yàn)篩，按照6.3.7.2的方法測定。6.3.8糞大腸菌群數(shù)的測定應(yīng)符合GB/T 19524.1肥料中糞大腸菌群的測定的規(guī)定。6.3.9蛔蟲卵死亡率的測定應(yīng)符合GB/T 19524.2肥料中蛔蟲卵死亡率的測定的規(guī)定。6.3.10纖維素酶活、蛋白酶活的測定應(yīng)符合附

14、錄D的規(guī)定。6.3.11砷、鎘、鉛、鉻、汞的測定應(yīng)符合GB 188772002中的5.125.17的規(guī)定。6.3.12保質(zhì)期的檢驗(yàn)在產(chǎn)品說明書標(biāo)明的保質(zhì)期前，按6.3.16.3.11方法測定產(chǎn)品相應(yīng)指標(biāo)。7檢驗(yàn)規(guī)則本標(biāo)準(zhǔn)中產(chǎn)品技術(shù)指標(biāo)的數(shù)字修約應(yīng)符合GB 8170的規(guī)定；產(chǎn)品質(zhì)量合格判定應(yīng)符合GB 1250中修約值比較法的規(guī)定。7.1抽樣按每一發(fā)酵罐菌液（或每批固體發(fā)酵）加工成的產(chǎn)品為一批，進(jìn)行抽樣檢驗(yàn)，抽樣過程嚴(yán)格避免雜菌污染。7.1.1抽樣工具無菌塑料袋(瓶)，金屬勺、抽樣器、量筒、牛皮紙袋、膠水、抽樣封條及抽樣單等。7.1.2抽樣方法和數(shù)量一般在成品庫中抽樣，采用隨機(jī)法抽取。抽樣以件為單

15、位，小包裝以每一包裝箱為一件。隨機(jī)抽取35件，每件中隨機(jī)抽取一袋(瓶)；若每袋(瓶)包裝小于500 g（mL）的產(chǎn)品，應(yīng)多抽幾件。大包裝產(chǎn)品以一袋(桶)為一件，隨機(jī)抽取510件，在無菌條件下，每件取樣500 g(mL)，然后將抽取樣品混勻，按四分法分裝3袋(瓶)，每袋（瓶）不少于500 g(mL)。7.2檢驗(yàn)分類（略）7.3判定規(guī)則7.3.1具下列任何一條款者，均為合格產(chǎn)品a.檢驗(yàn)結(jié)果各項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)均符合標(biāo)準(zhǔn)要求的產(chǎn)品；b.在產(chǎn)品的外觀、水分、細(xì)度、pH值等檢測項(xiàng)目中，有1項(xiàng)不符合要求，而其它各項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)符合要求的產(chǎn)品。7.3.2具下列任何一條款者，均為不合格產(chǎn)品a.有效活菌數(shù)不符合技術(shù)指標(biāo)；b

16、.霉菌雜菌數(shù)不符合技術(shù)指標(biāo)；c.雜菌率不符合技術(shù)指標(biāo)；d.糞大腸菌群不符合技術(shù)指標(biāo)；e. 蛔蟲卵死亡率不符合技術(shù)指標(biāo)；f. 砷、鎘、鉛、鉻、汞中任一含量不符合技術(shù)指標(biāo)；g. 有機(jī)物料腐熟劑產(chǎn)品中所測酶活不符合技術(shù)指標(biāo)；h.在外觀、水分、細(xì)度、pH值等檢測項(xiàng)目中，有2項(xiàng)（含）以上不符合要求。8包裝、標(biāo)識、運(yùn)輸和貯存 參見NY 885-2004農(nóng)用微生物產(chǎn)品標(biāo)識要求附錄A 常用檢測培養(yǎng)基 參見NY/T 1114-2004微生物肥料實(shí)驗(yàn)用培養(yǎng)基技術(shù)條件附錄B（資料性附錄）常用染色劑B.1革蘭氏染色劑B.1.1結(jié)晶紫染色液（Hucker氏配方）甲液：結(jié)晶紫（Crystal violet） 2.0 g

17、乙醇(95%) 20.0 mL乙液：草酸銨(NH4)2C2O4H2O 0.8g 蒸餾水 80.0 mL甲、乙兩液相混，過濾，棕色瓶保存。B.1.2盧哥(Lugol)氏碘液碘(I2)片 1.0 g碘化鉀(KI) 2.0 g蒸餾水 300 mL先溶碘化鉀于少量蒸餾水中，再將碘溶于碘化鉀溶液中，可稍加熱，最后加足蒸餾水，棕色瓶保存。B.1.3脫色液 95%的乙醇液。B.1.4復(fù)染液 0.5%的番紅水溶液（Safranin O)2.5%的番紅酒精溶液 20 mL蒸餾水 80 mLB.2芽胞染色液B.2.1孔雀綠染色液（Malachite green）孔雀綠 5.0 g蒸餾水 100 mLB.2.20.

18、5%番紅染色液B.3石碳酸復(fù)紅染色液甲液：堿性復(fù)紅(Basic fuchsin) 0.3 g 95%酒精 10.0 mL乙液：石碳酸(Phenoecrystals C.P) 5.0 g 蒸餾水 95 mL將甲、乙兩液混合后即得石碳酸復(fù)紅染色液原液。染色時(shí)，將原液稀釋510倍使用。附錄C（規(guī)范性附錄）稀釋法（MPN 5管法）C.1稀釋稱取樣品10.0 g，加入帶玻璃珠的100 mL的無菌水中(液體菌劑取l0.0 mL加入90 mL的無菌水中)，靜置20 min，在旋轉(zhuǎn)式搖床上200 r/min充分振蕩30 min，即得到1101稀釋度的菌懸液。用無菌移液管吸取5.0mL上述菌懸液加入到裝有45m

19、L無菌水的三角瓶中，充分振蕩搖勻，得到1102稀釋度的菌懸液，依此方法制成1103、1104、1105稀釋度的菌懸液（每個(gè)稀釋度應(yīng)更換無菌移液管）。C.2加樣選擇適宜的5個(gè)連續(xù)稀釋度，用無菌移液管分別吸取不同稀釋度的菌懸液1.0 mL，加到已準(zhǔn)備好的盛有9.0 mL無菌培養(yǎng)基的螺口試管中，每一稀釋度重復(fù)接5支試管（不同稀釋度間更換無菌移液管），同時(shí)用無菌培養(yǎng)液作對照。C.3培養(yǎng)接種后立即擰緊塑料帽并搖勻，將接種好的試管放到適宜的條件下培養(yǎng)。C.4計(jì)算根據(jù)各稀釋系列試管中有無待測微生物生長或其生理反應(yīng)的正或負(fù)得出數(shù)量指標(biāo)，并在相應(yīng)的MPN統(tǒng)計(jì)表中查出近似值（見表C1），即可計(jì)算出待測樣品的有效活

20、菌數(shù)，以億個(gè)/mL或億個(gè)/g表示。計(jì)算方法：1mL（g）樣品中的有效活菌數(shù)=菌數(shù)近似值數(shù)量指標(biāo)第一位數(shù)的稀釋倍數(shù)C.5計(jì)數(shù)規(guī)則在稀釋系列中必須最后一個(gè)稀釋度所有重復(fù)間都沒有微生物生長。確定數(shù)量指標(biāo)系取稀釋系列中所有重復(fù)都有生長(或是正反應(yīng))的最高稀釋度為數(shù)量指標(biāo)的第一位數(shù)字，總共取三個(gè)連續(xù)稀釋管的結(jié)果查表。C.5.1在全部5支試管中均出現(xiàn)生長的稀釋度中，把出現(xiàn)生長的稀釋度倍數(shù)最高的那一級放入數(shù)列。例如：為5-5-3-0-0時(shí)，則取5-3-0數(shù)列；C.5.2在全部5支試管中均不出現(xiàn)生長的稀釋度中，把稀釋度倍數(shù)最低的那一級放入數(shù)列。例如：為5-3-0-0-0時(shí)，則取5-3-0數(shù)列；C.5.3如果應(yīng)用上述兩條規(guī)則，會出現(xiàn)采用如5-5-4-3-0這樣的4個(gè)等級的稀釋度的情況。此時(shí)，可先取前面的5-4-3數(shù)列，后取4-3-0數(shù)列，分別求出lgMPN，然后算出其真數(shù)的平均值。在此列中，數(shù)