氣相色譜簡單應(yīng)用SOP

1、氣相色譜的應(yīng)用與實(shí)際操作一、 氣相色譜法簡介樣品氣相色譜是一種利用物質(zhì)的沸點(diǎn)、極性及吸附過程的差異來實(shí)現(xiàn)混合物分離的一種技術(shù)，其過程如圖1-1所示。 載氣進(jìn)樣汽化色譜柱分離檢測器信號記錄 圖1-1 GC分析流程圖二、 氣相色譜的簡單應(yīng)用1、定性鑒定對于簡單樣品，可以通過對照標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)來定性。即在相同的色譜條件下，分別注射標(biāo)準(zhǔn)樣品和實(shí)際樣品，根據(jù)保留值即可確定色譜圖上的峰是何種物質(zhì)。2、定量分析 常用的色譜定量方法有峰面積百分比法、歸一化法、內(nèi)標(biāo)法、外標(biāo)法和標(biāo)準(zhǔn)加入法。此處以6種含磷有機(jī)物為例，采用外標(biāo)法進(jìn)行定量分析。三、 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備1. 實(shí)驗(yàn)試劑試劑名稱試劑信息丙酮色譜純正己烷色譜純1 : 1丙酮

2、：正己烷V : V對氧P100 ppm對SP100 ppmO,P-DDT100 ppmP,P-DDT100 ppm馬拉硫磷100 ppm水胺硫磷100 ppm 2.實(shí)驗(yàn)器材器材名稱規(guī)格或型號一次性吸管1 mL定量小管1 mLGC進(jìn)樣瓶2 mL，棕色進(jìn)樣針5L均質(zhì)器ika T18，USA移液槍10L氣相色譜儀Agilent 6890，美國四、 實(shí)驗(yàn)操作1、混標(biāo)的配制分別移取濃度為100ppm的對氧P、對SP、馬拉硫磷、水胺硫磷、P,P-DDT和O,P-DDT六種含磷有機(jī)物的標(biāo)準(zhǔn)品各10L于同一定量管中，用1:1丙酮：正己烷（V : V）定容至1mL，轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣瓶內(nèi)。2、單標(biāo)的配制分別移取濃度10

3、0ppm的對氧P、對SP、馬拉硫磷、水胺硫磷、P,P-DDT和O,P-DDT六種含磷有機(jī)物的標(biāo)準(zhǔn)品各10L于不同定量管中，用1:1丙酮：正己烷（V : V）各自定容至1mL，轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣瓶內(nèi)。3、氣相色譜的使用（1）儀器操作流程儀器打開順序：氮?dú)饪傞y 氣相色譜儀開關(guān) 計算機(jī)開關(guān) 打開軟件 烘烤分離柱排出雜質(zhì) 設(shè)置各項(xiàng)參數(shù)及升溫程序 進(jìn)樣 氣相色譜圖 數(shù)據(jù)分析 長時間未使用時，需設(shè)置烘烤程序，待色譜柱中的水分及其他雜質(zhì)被排除完畢后，基線降低至1000以下時，方可進(jìn)樣。（2）軟件操作流程在線實(shí)驗(yàn)操作1.進(jìn)入主界面ECD檢測器2.打開參數(shù)編輯器，設(shè)定爐升溫程序，烘烤分離柱，將殘留水分與雜質(zhì)排出。 3.

4、待柱子烘烤完畢后，檢測器與進(jìn)樣器進(jìn)行升溫，選擇不分流模式，同時以氮?dú)庾鳛檩d氣，并填寫進(jìn)樣器的溫度，壓力和流速。4.選擇進(jìn)樣的模式為恒流，進(jìn)樣器和檢測器的類型分別選擇前進(jìn)樣器和前檢測器。此處界面可查看分離柱的相關(guān)信息（柱長，內(nèi)徑和涂層厚度），同時可設(shè)置載氣的壓力和流速。 5.設(shè)計分離的升溫程序并保存方法，右界面可查看最高爐溫。6.待基線將至1000以下后，調(diào)取已保存的升溫程序。在Sample Info填寫樣品名稱，選擇保存地址，保存樣品信息后，開始進(jìn)樣。文件位置文件名離線數(shù)據(jù)分析 （3）進(jìn)樣及數(shù)據(jù)分析Pre Run 進(jìn)樣針吸取2L的樣品快速注入進(jìn)樣器 STAR 出峰 數(shù)據(jù)分析 進(jìn)樣時，進(jìn)樣針須先

5、用色譜純的正己烷清洗三遍，再用標(biāo)準(zhǔn)品或樣品潤洗三遍，排出進(jìn)樣針中的氣泡后（抽吸一定量的溶液，迅速按壓排出），吸取2L標(biāo)準(zhǔn)品或樣品進(jìn)行進(jìn)樣。進(jìn)樣后，進(jìn)樣針須再用色譜純的丙酮再清洗三遍。 （4）數(shù)據(jù)分析 1）定性分析先后將配制好的混標(biāo)，和各個單標(biāo)分別進(jìn)樣?；鞓?biāo)的色譜圖中除溶劑峰外，響應(yīng)較大的峰數(shù)目理論上應(yīng)與單標(biāo)的數(shù)目相同，若有出入，可能為混合標(biāo)準(zhǔn)品配制失誤或升溫程序不夠合理，導(dǎo)致目標(biāo)物未能較好地分離。在確保混標(biāo)配制無誤的情況下，出峰數(shù)少于混合標(biāo)準(zhǔn)物種的目標(biāo)物數(shù)目時，則應(yīng)適當(dāng)調(diào)整升溫程序，降低升溫速度，使各物質(zhì)氣化時間間隔拉長，從而增大出峰時間間隔?；鞓?biāo)中各峰的出峰時間若與單標(biāo)如物質(zhì)A1的出峰時間一

6、致，即可判定在此處出峰的物質(zhì)為A1，由此可一一對混標(biāo)所出的各峰進(jìn)行定性分析，同時也可排除混合標(biāo)準(zhǔn)物中所存在的雜質(zhì)峰。操作步驟 1.打開離線軟件，調(diào)取混標(biāo)數(shù)據(jù)和各個單標(biāo)數(shù)據(jù)。對SP對OP文字刪除按鈕對SP對OP2.用刪除文字按鈕刪除各個樣品的文字信息，將單標(biāo)的出峰位置與混標(biāo)進(jìn)行比對，對混標(biāo)所出的峰所對應(yīng)的物質(zhì)進(jìn)行定性。如圖所示，在10.62處的峰所對應(yīng)的物質(zhì)為對SP，而在9.94處出峰的物質(zhì)為對OP。一一調(diào)出單標(biāo)所出的峰和混標(biāo)的各峰進(jìn)行對照，即可知哪些峰為目標(biāo)物，哪些峰為雜質(zhì)峰。經(jīng)分析，6種含磷有機(jī)物及其保留時間如下：樣品名D-OPMLLLD-SPSALLO,P-DDTP,P-DDTtR/min

7、9.93610.52410.61410.96714.31515.2182)定量分析將不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)品分別進(jìn)樣，對不同濃度的各個目標(biāo)物所出峰進(jìn)行面積積分，建立峰面積關(guān)于目標(biāo)物濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線（標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)R20.995）。待測樣品進(jìn)樣后，根據(jù)出峰位置進(jìn)行定性，同時根據(jù)各峰的峰面積及其標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計算出各種目標(biāo)物的濃度。操作步驟 1.打開樣品出峰數(shù)據(jù)，選擇積分模式，刪除文字信息后，選擇積分按鈕對各個目標(biāo)物所出峰進(jìn)行面積積分（由峰底部的積分起點(diǎn)畫一條積分線指向積分終點(diǎn)），選擇New Calibration Table建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，將各物質(zhì)的第一個濃度（此處為200ppb）與其峰面積作為標(biāo)準(zhǔn)曲線的第一個點(diǎn)。積分終點(diǎn)積分起點(diǎn)積分按鈕積分模式保留時間與峰面積信息建立新標(biāo)線填寫濃度200ppb積分區(qū)間添加標(biāo)準(zhǔn)品濃度調(diào)整積分位置，填寫各峰所對應(yīng)的物質(zhì)的名稱。2.調(diào)取第二個梯度濃度，同樣對各個目標(biāo)物的出峰進(jìn)行積分后，選擇Add Level，增加新的濃度400ppb，作為標(biāo)線的第二個點(diǎn)。顯示初步的標(biāo)準(zhǔn)曲線，同樣修改積分區(qū)間，使積分更加準(zhǔn)確。標(biāo)準(zhǔn)曲線及相關(guān)系數(shù)R2同樣再添加一個濃度為800ppb的樣品，得出各個目標(biāo)物由三個濃度而構(gòu)成的峰面積關(guān)于濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線（若要得到更準(zhǔn)確的標(biāo)準(zhǔn)曲線，可適當(dāng)增加24個點(diǎn)）。如圖所示，由三個濃度得出