菊花的組織培養(yǎng)

1、白毛刺白毛刺 白毛獅子白毛獅子 白玉珠簾白玉珠簾 飛鳥美人飛鳥美人 古龍須古龍須 組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)是指在是指在人工培養(yǎng)基人工培養(yǎng)基上，上，離體培養(yǎng)離體培養(yǎng)植物的器官、組織、細(xì)植物的器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體，并使其生長(zhǎng)、增殖、分化以及再生植株的技術(shù)。胞和原生質(zhì)體，并使其生長(zhǎng)、增殖、分化以及再生植株的技術(shù)。 （一）細(xì)胞分化的概念（一）細(xì)胞分化的概念 在個(gè)體發(fā)育中，由一個(gè)或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代，在個(gè)體發(fā)育中，由一個(gè)或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生 的過程。的過程。穩(wěn)定性差異穩(wěn)定性差異（二）細(xì)胞分化的特點(diǎn)：（二）細(xì)胞分化的特點(diǎn)： 持久性、穩(wěn)定性、不

2、可逆性持久性、穩(wěn)定性、不可逆性（三）細(xì)胞分化的原因：（三）細(xì)胞分化的原因： 在個(gè)體發(fā)育過程中，不同的細(xì)胞中遺傳信息的執(zhí)行情在個(gè)體發(fā)育過程中，不同的細(xì)胞中遺傳信息的執(zhí)行情況不同況不同（或是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果）。（或是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果）。（四）細(xì)胞分化的結(jié)果（意義）：（四）細(xì)胞分化的結(jié)果（意義）： 使多細(xì)胞生物體中的細(xì)胞趨向?qū)ｉT化，有利于提高使多細(xì)胞生物體中的細(xì)胞趨向?qū)ｉT化，有利于提高各種生理功能的效率。各種生理功能的效率。（五）細(xì)胞的全能性（五）細(xì)胞的全能性是指已經(jīng)是指已經(jīng) ，仍然具有，仍然具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。分化的細(xì)胞分化的細(xì)胞 生物體的每一個(gè)細(xì)胞都包含有該物

3、種所特有的全套遺生物體的每一個(gè)細(xì)胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成為完整個(gè)體所必需的全部基因。傳物質(zhì)，都有發(fā)育成為完整個(gè)體所必需的全部基因。1 1、植物細(xì)胞為什么具有全能性呢？、植物細(xì)胞為什么具有全能性呢？2 2、細(xì)胞全能性的大小比較、細(xì)胞全能性的大小比較受精卵受精卵 生殖細(xì)胞生殖細(xì)胞 體細(xì)胞體細(xì)胞 幼嫩細(xì)胞幼嫩細(xì)胞 衰老細(xì)胞衰老細(xì)胞植物細(xì)胞植物細(xì)胞 動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞 一、基礎(chǔ)知識(shí)一、基礎(chǔ)知識(shí)（一）植物的組織培養(yǎng)的基本過程（一）植物的組織培養(yǎng)的基本過程一、基礎(chǔ)知識(shí)一、基礎(chǔ)知識(shí)（一）植物的組織培養(yǎng)的基本過程（一）植物的組織培養(yǎng)的基本過程一、基礎(chǔ)知識(shí)一、基礎(chǔ)知識(shí)（一）植物的組織培養(yǎng)的

4、基本過程（一）植物的組織培養(yǎng)的基本過程1 1、愈傷組織：、愈傷組織：離體的植物組織或細(xì)胞經(jīng)過細(xì)胞分裂形成的排列離體的植物組織或細(xì)胞經(jīng)過細(xì)胞分裂形成的排列疏松而無(wú)規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無(wú)定形狀疏松而無(wú)規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。態(tài)的薄壁細(xì)胞。2 2、脫分化或去分化、脫分化或去分化：由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生 愈傷組愈傷組織的過程。織的過程。3 3、再分化、再分化：由愈傷組織重新分化成根或芽等器官的過程。由愈傷組織重新分化成根或芽等器官的過程。離體的植物器官、組織或細(xì)胞。離體的植物器官、組織或細(xì)胞。4 4、外植體、外植體：（二）植物的組織培

5、養(yǎng)的原理（二）植物的組織培養(yǎng)的原理植物細(xì)胞具有全能性植物細(xì)胞具有全能性（三）影響植物組織培養(yǎng)的因素（三）影響植物組織培養(yǎng)的因素 1 1、植物材料的選擇、植物材料的選擇 同一植物材料的年齡、保存時(shí)間的同一植物材料的年齡、保存時(shí)間的 長(zhǎng)短等都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。長(zhǎng)短等都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 菊花的組織培養(yǎng)一般選擇未開花菊花的組織培養(yǎng)一般選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝。植株的莖上部新萌生的側(cè)枝。MSMS培養(yǎng)基主要成分包括培養(yǎng)基主要成分包括大量元素大量元素: N: N、P P、 S S 、 K K、CaCa、MgMg等等微量元素微量元素:B:B、MnMn、CuCu、ZnZn、FeFe、MoMo、I I、C

6、oCo等等有機(jī)物有機(jī)物：甘氨酸、煙酸、肌醇、維：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等生素、蔗糖等植物激素植物激素：生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素和：生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素和赤霉素等赤霉素等2、培養(yǎng)基的配制、培養(yǎng)基的配制 不同的離體植物組織或細(xì)胞，對(duì)營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境等不同的離體植物組織或細(xì)胞，對(duì)營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境等條件的要求相對(duì)特殊，需配制適宜的培養(yǎng)基。條件的要求相對(duì)特殊，需配制適宜的培養(yǎng)基。MS培養(yǎng)基培養(yǎng)基 1962年由年由Murashige和和Skoog為培養(yǎng)煙草細(xì)胞而設(shè)計(jì)的。特點(diǎn)是無(wú)為培養(yǎng)煙草細(xì)胞而設(shè)計(jì)的。特點(diǎn)是無(wú)機(jī)鹽和離子濃度較高，為較穩(wěn)定的平衡溶液。機(jī)鹽和離子濃度較高，為較穩(wěn)定的平衡溶液。其養(yǎng)分的數(shù)量和比例較合適，可

7、滿足植物的其養(yǎng)分的數(shù)量和比例較合適，可滿足植物的營(yíng)養(yǎng)和生理需要。它的硝酸鹽含量較其他培營(yíng)養(yǎng)和生理需要。它的硝酸鹽含量較其他培養(yǎng)基為高，廣泛地用于植物的器官、花藥、養(yǎng)基為高，廣泛地用于植物的器官、花藥、細(xì)胞和原生質(zhì)體培養(yǎng)，效果良好。有些培養(yǎng)細(xì)胞和原生質(zhì)體培養(yǎng)，效果良好。有些培養(yǎng)基是由它演變而來(lái)的。基是由它演變而來(lái)的。 你能說出各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎？同專題你能說出各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎？同專題2 2中微生物中微生物培養(yǎng)基的配方相比，培養(yǎng)基的配方相比，MSMS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同？同？ 微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的

8、的無(wú)機(jī)鹽無(wú)機(jī)鹽；蔗糖提供；蔗糖提供碳源碳源，同時(shí)能夠維持細(xì)胞的，同時(shí)能夠維持細(xì)胞的滲透壓滲透壓；甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足；甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的產(chǎn)生的特殊營(yíng)養(yǎng)需求特殊營(yíng)養(yǎng)需求。微生物培養(yǎng)基以微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主為主。與微生物的培養(yǎng)不同，。與微生物的培養(yǎng)不同，MSMS培養(yǎng)基則需提供培養(yǎng)基則需提供大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)，無(wú)機(jī)鹽混合物包括植物生長(zhǎng)必須，無(wú)機(jī)鹽混合物包括植物生長(zhǎng)必須的大量元素和微量元素兩大類。的大量元素和微量元素兩大類。生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素作用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素

9、作用 植物中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫植物中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。在生長(zhǎng)素存在的情況分化和再分化的關(guān)鍵性激素。在生長(zhǎng)素存在的情況下，細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)的趨勢(shì)。下，細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)的趨勢(shì)。使用順序使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果先先使用生長(zhǎng)素，使用生長(zhǎng)素，后后使用細(xì)胞分裂素使用細(xì)胞分裂素 有利于細(xì)胞分裂，但不利分化有利于細(xì)胞分裂，但不利分化先先使用細(xì)胞分裂素使用細(xì)胞分裂素后后使用生長(zhǎng)素使用生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂也分化細(xì)胞既分裂也分化同時(shí)使用同時(shí)使用分化頻率高分化頻率高生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素同時(shí)使用，用量的比例生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素同時(shí)使用，用量的比例對(duì)植

10、物細(xì)胞發(fā)育方向的影響。對(duì)植物細(xì)胞發(fā)育方向的影響。生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素/ /細(xì)胞分裂素比值細(xì)胞分裂素比值結(jié)果結(jié)果 比值高時(shí)比值高時(shí) 促根分化，抑芽形成促根分化，抑芽形成 比值低時(shí)比值低時(shí) 促芽分化，抑根形成促芽分化，抑根形成 比值適中比值適中 促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng)促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng) 思考：以下培養(yǎng)基出現(xiàn)的現(xiàn)象反應(yīng)了什么問題？思考：以下培養(yǎng)基出現(xiàn)的現(xiàn)象反應(yīng)了什么問題？（四）植物組織培養(yǎng)過程圖解（四）植物組織培養(yǎng)過程圖解離離體體組組織織或或細(xì)細(xì)胞胞植植物物體體脫分化脫分化細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素愈愈傷傷組組織織芽芽根根生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素 細(xì)細(xì)胞分裂素胞分裂素再分化再分化不需要光不需要光需要光需要光3 3、環(huán)境條

11、件（如、環(huán)境條件（如pHpH、溫度、光照等）、溫度、光照等） pH pH控制在控制在5.85.8左右，溫度控制在左右，溫度控制在18182222, ,每日用日光燈照射每日用日光燈照射12h12h。（五）植物的組織培養(yǎng)的條件（五）植物的組織培養(yǎng)的條件1 1、離體的組織或細(xì)胞（外植體）、離體的組織或細(xì)胞（外植體）3、一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)2、無(wú)菌、無(wú)菌4、植物激素和其他外界條件、植物激素和其他外界條件1、培育無(wú)病毒植株、培育無(wú)病毒植株（六）植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用（六）植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用 2、快速繁殖植株、快速繁殖植株3、培養(yǎng)紫草愈傷組織、培養(yǎng)紫草愈傷組織, ,提取紫草素提取紫草素（治療燙傷和割

12、傷的藥物以及染料和（治療燙傷和割傷的藥物以及染料和化妝品的原料）化妝品的原料）4、培育轉(zhuǎn)基因植物、培育轉(zhuǎn)基因植物 5 誘導(dǎo)離體的植物組織形成具有生誘導(dǎo)離體的植物組織形成具有生根發(fā)芽能力的胚狀結(jié)構(gòu)，包裹上人根發(fā)芽能力的胚狀結(jié)構(gòu)，包裹上人造種皮，制成人工種子，可以解決造種皮，制成人工種子，可以解決有些作物品種繁殖能力差，結(jié)子困有些作物品種繁殖能力差，結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問題。難或發(fā)芽率低等問題。二、實(shí)驗(yàn)操作二、實(shí)驗(yàn)操作（一）制備（一）制備MSMS固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基 MSMS培養(yǎng)基包括培養(yǎng)基包括2020多種營(yíng)養(yǎng)成分，實(shí)驗(yàn)多種營(yíng)養(yǎng)成分，實(shí)驗(yàn)室一般使用室一般使用4 4保存配制好的培養(yǎng)基母液保存配制好的

13、培養(yǎng)基母液來(lái)制備。來(lái)制備。1 1、配置各種母液、配置各種母液無(wú)機(jī)物中大量元素濃縮無(wú)機(jī)物中大量元素濃縮1010倍，微量元素倍，微量元素濃縮濃縮100100倍，常溫保存。倍，常溫保存。激素類、維生素類以及用量較小的有機(jī)物一般可按激素類、維生素類以及用量較小的有機(jī)物一般可按1mg/ml1mg/ml的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制成母液。的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制成母液。用母液配制培養(yǎng)基時(shí)，需要根據(jù)各種母液的濃縮倍用母液配制培養(yǎng)基時(shí)，需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù)，計(jì)算用量。數(shù)，計(jì)算用量。2 2、配制培養(yǎng)基、配制培養(yǎng)基 配制配制1L MS1L MS培養(yǎng)基培養(yǎng)基 調(diào)調(diào)pHpH分裝分裝培養(yǎng)基培養(yǎng)基計(jì)算計(jì)算稱量稱量溶化溶化加母液加母

14、液定容定容調(diào)整調(diào)整pHpH分裝分裝滅菌滅菌由于菊花的莖段的組織培養(yǎng)比由于菊花的莖段的組織培養(yǎng)比較容易，因此不必添加植物激較容易，因此不必添加植物激素素. .注：注：3、滅菌、滅菌高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌方法方法：對(duì)象：對(duì)象： 分裝好的培養(yǎng)基和其他器械分裝好的培養(yǎng)基和其他器械1 1、選材、選材：（二）外植體消毒（二）外植體消毒2 2、消毒、消毒菊花莖段，取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝菊花莖段，取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝. .流水沖洗：流水沖洗： 菊花莖段用流水沖洗后可加少許洗衣粉，用菊花莖段用流水沖洗后可加少許洗衣粉，用軟刷輕輕刷洗軟刷輕輕刷洗，刷洗后在流水下沖洗，刷洗后在流水下沖洗20min20min左右。左右。 酒

15、精處理：酒精處理： 用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入體積分用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入體積分?jǐn)?shù)為數(shù)為7070的酒精中搖動(dòng)的酒精中搖動(dòng)2323次，持續(xù)次，持續(xù)67s67s，立即將外，立即將外植體取出，在無(wú)菌水中清洗。植體取出，在無(wú)菌水中清洗。消毒液處理消毒液處理 取出后用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入取出后用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.10.1的的氯化汞氯化汞溶液中溶液中1 12min2min，取出后在無(wú)，取出后在無(wú)菌水中至少清洗菌水中至少清洗3 3次，漂凈消毒液次，漂凈消毒液. .（三）接種（三）接種 污染的主要來(lái)源是空氣中的細(xì)菌和孢子，接

16、種室消毒污染的主要來(lái)源是空氣中的細(xì)菌和孢子，接種室消毒是至關(guān)重要的。用是至關(guān)重要的。用7070的酒精噴霧使空氣消毒的酒精噴霧使空氣消毒, ,酒精或新酒精或新潔爾滅搽洗工作臺(tái)并用紫外線照射潔爾滅搽洗工作臺(tái)并用紫外線照射2020分鐘分鐘. .1 1、接種室消毒、接種室消毒2 2、無(wú)菌操作、無(wú)菌操作 操作要在酒精燈火焰旁完成，每次使用器械后，都需操作要在酒精燈火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼燒滅菌，接種后立即蓋好瓶蓋。要用火焰灼燒滅菌，接種后立即蓋好瓶蓋。3 3、材料的切取和接種、材料的切取和接種 將消過毒的菊花莖段在無(wú)菌培養(yǎng)皿中切成長(zhǎng)約將消過毒的菊花莖段在無(wú)菌培養(yǎng)皿中切成長(zhǎng)約0.51cm

17、的莖段。用鑷子夾取菊花莖段插入培養(yǎng)基中。的莖段。用鑷子夾取菊花莖段插入培養(yǎng)基中。每接種一塊外植體前，每接種一塊外植體前，鑷子需放入體積分?jǐn)?shù)為鑷子需放入體積分?jǐn)?shù)為7575的酒精溶液中消毒一次，的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精燈火焰上燒一然后在酒精燈火焰上燒一遍，冷卻后再接種。遍，冷卻后再接種。外植體在培養(yǎng)基中要分外植體在培養(yǎng)基中要分布均勻，放置外植體數(shù)量布均勻，放置外植體數(shù)量根據(jù)錐形瓶的大小確定，根據(jù)錐形瓶的大小確定，一般胡蘿卜一般胡蘿卜3 34 4塊，菊的莖或葉塊，菊的莖或葉6 68 8塊，也不要太少，以塊，也不要太少，以充分利用培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分和光照條件。充分利用培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分和光照條

18、件。插入時(shí)應(yīng)注意方向，不要倒插，莖段、莖尖基部插入插入時(shí)應(yīng)注意方向，不要倒插，莖段、莖尖基部插入培養(yǎng)基，利于吸收水分和養(yǎng)分。培養(yǎng)基，利于吸收水分和養(yǎng)分。你打算做幾組重復(fù)？你打算設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)嗎？你打算做幾組重復(fù)？你打算設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)嗎？ 每種材料或配方至少要做一組以上的每種材料或配方至少要做一組以上的重復(fù)。設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)可以取用一個(gè)經(jīng)過滅重復(fù)。設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)可以取用一個(gè)經(jīng)過滅菌的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，與接種操作后菌的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，與接種操作后的錐形瓶一同培養(yǎng)，用以說明培養(yǎng)基制作的錐形瓶一同培養(yǎng)，用以說明培養(yǎng)基制作合格，沒有被雜菌污染。合格，沒有被雜菌污染。（四）培養(yǎng)（四）培養(yǎng)1 1、愈傷組織的培養(yǎng)

19、、愈傷組織的培養(yǎng) 從接種外植體到出現(xiàn)愈傷組織需經(jīng)過從接種外植體到出現(xiàn)愈傷組織需經(jīng)過2 2周時(shí)周時(shí)間。間。2 2周之內(nèi)可以看到外植體上逐漸長(zhǎng)出周之內(nèi)可以看到外植體上逐漸長(zhǎng)出乳白乳白色或黃白色的瘤狀愈傷組織色或黃白色的瘤狀愈傷組織。首次培養(yǎng)愈傷組。首次培養(yǎng)愈傷組織時(shí)，恒溫箱的門應(yīng)該關(guān)閉不必見光，因?yàn)樵诳棔r(shí)，恒溫箱的門應(yīng)該關(guān)閉不必見光，因?yàn)樵跓o(wú)光條件下愈傷組織長(zhǎng)的更快。無(wú)光條件下愈傷組織長(zhǎng)的更快。2 2周后，培養(yǎng)周后，培養(yǎng)基成分接近耗盡，必須基成分接近耗盡，必須更換培養(yǎng)基更換培養(yǎng)基，進(jìn)行繼代培養(yǎng)。，進(jìn)行繼代培養(yǎng)。2 2、愈傷組織的繼代培養(yǎng)、愈傷組織的繼代培養(yǎng) 繼代培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)愈傷組織的相同

20、，在嚴(yán)繼代培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)愈傷組織的相同，在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下，將愈傷組織格的無(wú)菌條件下，將愈傷組織連同原來(lái)的外植體連同原來(lái)的外植體一起移到一起移到新培養(yǎng)基上。愈傷組織的繼代培養(yǎng)一代為新培養(yǎng)基上。愈傷組織的繼代培養(yǎng)一代為20d20d。如果延長(zhǎng)。如果延長(zhǎng)時(shí)間，培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)減少，外植體會(huì)分泌有毒物質(zhì)，時(shí)間，培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)減少，外植體會(huì)分泌有毒物質(zhì)，造成自身中毒。如果愈傷組織長(zhǎng)到直徑為造成自身中毒。如果愈傷組織長(zhǎng)到直徑為1 11.5cm1.5cm時(shí)，就時(shí)，就可以進(jìn)行可以進(jìn)行試管苗培養(yǎng)試管苗培養(yǎng)，否則需進(jìn)行第二代繼代培養(yǎng)。，否則需進(jìn)行第二代繼代培養(yǎng)。3 3、試管苗的培養(yǎng)、試管苗的培養(yǎng) （五）

21、移栽（五）移栽 1 1、打開封口膜、打開封口膜2 2、清洗轉(zhuǎn)移、清洗轉(zhuǎn)移 當(dāng)愈傷組織長(zhǎng)到一定大小后，可當(dāng)愈傷組織長(zhǎng)到一定大小后，可以更換培養(yǎng)基，進(jìn)行試管苗的見光以更換培養(yǎng)基，進(jìn)行試管苗的見光培養(yǎng)。培養(yǎng)。3 3、移栽、移栽幼苗長(zhǎng)壯后，移栽到土壤中。幼苗長(zhǎng)壯后，移栽到土壤中。 移栽生根的菊花試管苗之前，移栽生根的菊花試管苗之前，應(yīng)先打開培養(yǎng)瓶的封口膜，讓應(yīng)先打開培養(yǎng)瓶的封口膜，讓試管苗在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾日。試管苗在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾日。 用流水清洗根部的培養(yǎng)基，將用流水清洗根部的培養(yǎng)基，將幼苗移植到消過毒幼苗移植到消過毒的的蛭石或珍珠巖蛭石或珍珠巖等環(huán)境下生活一段時(shí)間。等環(huán)境下生活一段時(shí)間。（六）栽培（六）

22、栽培 幼苗移栽后，每天觀察并記幼苗移栽后，每天觀察并記錄幼苗的生長(zhǎng)情況，適時(shí)澆水、錄幼苗的生長(zhǎng)情況，適時(shí)澆水、施肥，直至開花。施肥，直至開花。 接種接種3 34 d4 d后，在接種操作中被雜菌污染的培養(yǎng)后，在接種操作中被雜菌污染的培養(yǎng)物會(huì)表現(xiàn)出被污染的現(xiàn)象。根據(jù)統(tǒng)計(jì)污染率，分析接物會(huì)表現(xiàn)出被污染的現(xiàn)象。根據(jù)統(tǒng)計(jì)污染率，分析接種操作是否符合無(wú)菌要求。種操作是否符合無(wú)菌要求。（一）接種（一）接種3434天后，觀察外植體的生長(zhǎng)情況，統(tǒng)計(jì)有天后，觀察外植體的生長(zhǎng)情況，統(tǒng)計(jì)有多少外植體被污染，有多少能正常生長(zhǎng)？分析外植體被多少外植體被污染，有多少能正常生長(zhǎng)？分析外植體被污染的原因。污染的原因。（二）生根

23、苗的移栽是否合格（二）生根苗的移栽是否合格 生根苗移栽技術(shù)的關(guān)鍵是既要充分清洗根系表面的培生根苗移栽技術(shù)的關(guān)鍵是既要充分清洗根系表面的培養(yǎng)基，又不能傷及根系。一般使用無(wú)土栽培的辦法。培養(yǎng)基，又不能傷及根系。一般使用無(wú)土栽培的辦法。培養(yǎng)基質(zhì)要提前消毒，可以向培養(yǎng)基質(zhì)噴灑質(zhì)量分?jǐn)?shù)為養(yǎng)基質(zhì)要提前消毒，可以向培養(yǎng)基質(zhì)噴灑質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的高錳酸鉀，并用塑料薄膜覆蓋的高錳酸鉀，并用塑料薄膜覆蓋12 h。掀開塑料薄膜后。掀開塑料薄膜后24 h才能移栽。新移栽的組培苗要在溫室過渡幾天，等才能移栽。新移栽的組培苗要在溫室過渡幾天，等壯苗后再定植大田或進(jìn)行盆栽。統(tǒng)計(jì)自己移栽的成活率，壯苗后再定植大田或進(jìn)行盆栽。統(tǒng)

24、計(jì)自己移栽的成活率，看看移栽是否合格?？纯匆圃允欠窈细?。 一般來(lái)說，容易進(jìn)行無(wú)性繁殖的植物，也容易進(jìn)行一般來(lái)說，容易進(jìn)行無(wú)性繁殖的植物，也容易進(jìn)行組織培養(yǎng)組織培養(yǎng). .如：如：蘆薈、豆瓣綠、秋海棠、月季。蘆薈、豆瓣綠、秋海棠、月季。1 1、無(wú)菌技術(shù)是植物組織培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵，以下說法正確的是、無(wú)菌技術(shù)是植物組織培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵，以下說法正確的是 由于植物組織培養(yǎng)所利用的組織材料體積小、抗性差，對(duì)無(wú)菌由于植物組織培養(yǎng)所利用的組織材料體積小、抗性差，對(duì)無(wú)菌 操作的要求非常嚴(yán)格操作的要求非常嚴(yán)格 對(duì)培養(yǎng)基及器械用高壓蒸汽滅菌對(duì)培養(yǎng)基及器械用高壓蒸汽滅菌 對(duì)培養(yǎng)材料進(jìn)行表面滅菌時(shí)，一方面要考慮藥劑

25、的消毒效果，對(duì)培養(yǎng)材料進(jìn)行表面滅菌時(shí)，一方面要考慮藥劑的消毒效果， 另一方面還要考慮植物材料的耐受能力另一方面還要考慮植物材料的耐受能力 不同藥劑、不同植物不同藥劑、不同植物 材料甚至不同器官要區(qū)別對(duì)待材料甚至不同器官要區(qū)別對(duì)待 對(duì)培養(yǎng)材料可用高壓蒸汽滅菌對(duì)培養(yǎng)材料可用高壓蒸汽滅菌 如果不小心導(dǎo)致污染，將可能造成培養(yǎng)工作的前功盡棄如果不小心導(dǎo)致污染，將可能造成培養(yǎng)工作的前功盡棄 A. B. C. D. C C2 2、植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是、植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是 A.給予適宜的營(yíng)養(yǎng)和外界條件給予適宜的營(yíng)養(yǎng)和外界條件 B.導(dǎo)入其他植物細(xì)胞的基因?qū)肫渌参锛?xì)胞的基因 C.脫離

26、母體后，脫離母體后，給予適宜的營(yíng)養(yǎng)和外界條件給予適宜的營(yíng)養(yǎng)和外界條件 D.將成熟的篩管的細(xì)胞核移植到去核卵細(xì)胞中將成熟的篩管的細(xì)胞核移植到去核卵細(xì)胞中C C3 3、草莓生產(chǎn)上傳統(tǒng)的繁殖方式易將所感染的病毒傳播給后代，、草莓生產(chǎn)上傳統(tǒng)的繁殖方式易將所感染的病毒傳播給后代，導(dǎo)致產(chǎn)量降低，品質(zhì)變差。運(yùn)用微型繁殖技術(shù)可以培育出無(wú)病毒導(dǎo)致產(chǎn)量降低，品質(zhì)變差。運(yùn)用微型繁殖技術(shù)可以培育出無(wú)病毒幼苗。草莓微型繁殖的幼苗。草莓微型繁殖的基本過程如右：基本過程如右：請(qǐng)回答：請(qǐng)回答：(1)(1)微型繁殖培育無(wú)病毒草莓苗時(shí)，一般選取微型繁殖培育無(wú)病毒草莓苗時(shí)，一般選取_ _ _作為外作為外植體，其依據(jù)是植體，其依據(jù)是

27、_ _ 。(2)(2)在過程在過程中，常用的中，常用的MSMS培養(yǎng)基主要成分包括大量元素、微量元培養(yǎng)基主要成分包括大量元素、微量元素和素和_ _ _，在配制好的培養(yǎng)基中，常常需要，在配制好的培養(yǎng)基中，常常需要_ _ _，有，有利于外植體啟動(dòng)細(xì)胞分裂形成愈傷組織。接種后利于外植體啟動(dòng)細(xì)胞分裂形成愈傷組織。接種后2 25 d5 d，若發(fā)，若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染，原因可能是現(xiàn)外植體邊緣局部污染，原因可能是_ _ _。(3)(3)在過程在過程中，愈傷組織在誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中未形成根，但分中，愈傷組織在誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是化出了芽，其原因可能是_ _ _ _ _ _

28、_ _ _ _ _ _。莖尖莖尖( (或根尖或根尖) )莖尖莖尖( (或根尖或根尖) )病毒極少，甚至無(wú)病毒病毒極少，甚至無(wú)病毒有機(jī)物有機(jī)物植物激素植物激素外植體消毒不徹底外植體消毒不徹底 培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素類物質(zhì)用量與細(xì)胞分培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素類物質(zhì)用量與細(xì)胞分裂素類物質(zhì)用量的比值偏低裂素類物質(zhì)用量的比值偏低蛭石礦物的名稱來(lái)自拉丁文，帶有蛭石礦物的名稱來(lái)自拉丁文，帶有“蠕蟲狀蠕蟲狀”、“蟲跡形蟲跡形”的意思。為層狀結(jié)構(gòu)的的意思。為層狀結(jié)構(gòu)的硅酸鹽硅酸鹽。 農(nóng)業(yè)方面，蛭石可用作土壤改良劑，由于其具有良好的陽(yáng)離農(nóng)業(yè)方面，蛭石可用作土壤改良劑，由于其具有良好的陽(yáng)離子交換性和吸附性，可改善土壤的結(jié)構(gòu)，儲(chǔ)水保墑，提高土壤的子交換性和吸附性，可改善土壤的結(jié)構(gòu)，儲(chǔ)水保墑，提高土壤的透氣性和含水性，使酸性土壤變?yōu)橹?/p>