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文檔簡(jiǎn)介
1、轉(zhuǎn)入熒光素酶蛋白轉(zhuǎn)入熒光素酶蛋白基因的發(fā)熒光煙草基因的發(fā)熒光煙草轉(zhuǎn)基因超級(jí)小鼠轉(zhuǎn)基因超級(jí)小鼠水母基因工程又叫做基因拼接技術(shù)或基因工程又叫做基因拼接技術(shù)或DNA重組技重組技術(shù)。通俗的說(shuō),就是按照人們的志愿,把術(shù)。通俗的說(shuō),就是按照人們的志愿,把一種生物的某種基因提取出來(lái),加以修飾一種生物的某種基因提取出來(lái),加以修飾改造,然后放到另一種生物的細(xì)胞里,定改造,然后放到另一種生物的細(xì)胞里,定向地改造生物的性狀。向地改造生物的性狀。原理:基因重組原理:基因重組操作程度:操作程度:DNA分子程度分子程度操作環(huán)境:生物體外操作環(huán)境:生物體外結(jié)果:定向改造生物的性狀,獲得人結(jié)果:定向改造生物的性狀,獲得人類所
2、需求的種類。類所需求的種類。目的基因目的基因供體細(xì)胞供體細(xì)胞受體細(xì)胞受體細(xì)胞DNA重組技術(shù)的根本工具 限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶“分子手術(shù)刀分子手術(shù)刀 DNA銜接酶銜接酶“分子縫合針?lè)肿涌p合針 基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體“分子運(yùn)分子運(yùn)輸車輸車 限制性核酸內(nèi)切酶“分子手術(shù)刀分布:主要在原核生物中分布:主要在原核生物中作用特點(diǎn):特異性,即識(shí)別作用特點(diǎn):特異性,即識(shí)別特定核苷酸序列,切特定核苷酸序列,切割特定切點(diǎn)割特定切點(diǎn)切點(diǎn):磷酸二酯鍵切點(diǎn):磷酸二酯鍵舉例:舉例:EcoRI限制酶能識(shí)別限制酶能識(shí)別GAATTC序列,并序列,并在在G和和A之間切開之間切開重播重播、基因的針線、
3、基因的針線DNADNA銜接酶銜接酶銜接酶的作用是:將互補(bǔ)配對(duì)的兩個(gè)黏性銜接酶的作用是:將互補(bǔ)配對(duì)的兩個(gè)黏性末端銜接起來(lái),使之成為一個(gè)完好的末端銜接起來(lái),使之成為一個(gè)完好的DNADNA分子。分子。重重播播、基因的針線、基因的針線DNADNA銜接酶銜接酶銜接酶的作用是:將互補(bǔ)配對(duì)的兩個(gè)黏性銜接酶的作用是:將互補(bǔ)配對(duì)的兩個(gè)黏性末端銜接起來(lái),使之成為一個(gè)完好的末端銜接起來(lái),使之成為一個(gè)完好的DNADNA分子。分子?;虻尼樉€:基因的針線:DNA銜接酶銜接酶G A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GG C T T A A A A T T C GG C T T
4、 A A A A T T C GG C T T A A A A T T C G用同種限制酶切割用同種限制酶切割3 3基因的運(yùn)輸工具基因的運(yùn)輸工具運(yùn)載體圖示運(yùn)載體圖示作用:作用: 具備的條件:具備的條件: 種類:種類: 將外源基因送入受體細(xì)胞。將外源基因送入受體細(xì)胞。 能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定地保管。能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定地保管。具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)。具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)。具有某些標(biāo)志基因。具有某些標(biāo)志基因。 質(zhì)粒、噬菌體和動(dòng)植物病毒。質(zhì)粒、噬菌體和動(dòng)植物病毒。 基因操作的根本步驟從供體細(xì)胞的從供體細(xì)胞的DNA中中直接分別基因直接分別基因方法:鳥槍法方法:鳥槍法1鳥槍法的過(guò)程:鳥槍法的過(guò)程:一提取目的基因的途徑一提取目的基因的途徑反轉(zhuǎn)錄法反轉(zhuǎn)錄法2反轉(zhuǎn)錄法的過(guò)程:反轉(zhuǎn)錄法的過(guò)程:根據(jù)知氨基酸序列根據(jù)知氨基酸序列合成合成DNA人工合成基因真核細(xì)胞人工合成基因真核細(xì)胞運(yùn)載體運(yùn)載體供體細(xì)胞中供體細(xì)胞中DNA許多許多DNA片段片段限制酶限制酶載入載入導(dǎo)入導(dǎo)入受體細(xì)胞受體細(xì)胞產(chǎn)生特定性狀產(chǎn)生特定性狀目的基因目的基因分別分別外源外源DNA 擴(kuò)增擴(kuò)增目的基因的目的基因的mRNA單鏈單鏈DNA反轉(zhuǎn)錄反轉(zhuǎn)錄雙鏈雙鏈DNA即目的基因即目的基因合成合成3根據(jù)知氨基酸序列合成根據(jù)知氨基酸序列合成DNA的過(guò)程的過(guò)程蛋白質(zhì)的氨基酸序列蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列的核苷酸序列構(gòu)造基因的核苷酸序列
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