蛙心灌流試驗(yàn)報(bào)告

1、實(shí)驗(yàn)二離體蛀心灌流實(shí)驗(yàn)專業(yè)：學(xué)號(hào)：姓名:一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康? .學(xué)習(xí)離體器官（蛙心）灌流的方法。2 .觀察理化因素對(duì)蛙心活動(dòng)的影響。二、實(shí)驗(yàn)原理蛙心的灌流：蛙心無營養(yǎng)性血管，離體之后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陳代謝，心臟仍能有節(jié)律的自動(dòng)收縮、舒張，并維持較長(zhǎng)時(shí)間，心肌的營養(yǎng)是通過心臟內(nèi)膜液體的直接滲透而得。心?。菏荏w受體激動(dòng)劑效應(yīng)儲(chǔ)腎上腺素去甲腎上腺素心率增快、房室傳導(dǎo)加速、心肌收縮力加強(qiáng)。M乙酰膽堿心率減慢、房室傳導(dǎo)減慢、心肌收縮力減弱。1.任氏液：正常對(duì)照含有NaCl、Ca%KCl、NaHPO、NazHPO和蒸儲(chǔ)水，其電解質(zhì)、晶體滲透壓、pH值與蛙的組織液相近。灌流：%CaQ灌流:%KC灌

2、流:10000E灌流:10000Ach灌流7 .心得安儲(chǔ)受體阻斷劑，抑制腎上腺素與儲(chǔ)受體結(jié)合，使E不能發(fā)揮作用。8 .阿托品M受體阻斷劑，抑制Ach減慢心率，加速房室傳導(dǎo)，增加心房收縮力。三、實(shí)驗(yàn)器材離體蛙心任氏液、l%KCl溶液、2%CaC3溶液、NaC溶7取、1:10000腎上腺素、1:10000乙酰膽堿、心得安、阿托品四、實(shí)驗(yàn)步驟1 .離子試劑任氏劑一任氏液清洗任氏液清洗2%CaGl1%KClk任氏液2 .藥物試劑任氏液清洗任氏液清洗任氏液清洗E1b心得安+EAch阿托品+Ach任氏液%NaCl五、結(jié)果與分析心率：34次/min最大收縮力：最小收縮力：圖1正常脈搏曲線心率：35次/min

3、最大收縮力：最小收縮力：圖2%NaCl灌流脈搏曲線分析：細(xì)胞外液中Cf濃度降低，2期Cf內(nèi)流減少，胞漿中Cf減少，心肌收縮力降低。心率：38次/min最大收縮力：最小收縮力：圖32%CaCl2灌流脈搏曲線分析：心肌的舒縮活動(dòng)與心肌肌漿中的鈣離子濃度的高低有關(guān)。心肌肌漿網(wǎng)不發(fā)達(dá)，儲(chǔ)鈣能力差，易受細(xì)胞外鈣離子濃度高低影響。細(xì)胞外液中Naca"有競(jìng)爭(zhēng)性抑制，細(xì)胞外液CsT濃度升高，細(xì)胞興奮時(shí)內(nèi)流CeT增加，心肌收縮力增強(qiáng)。慢反應(yīng)細(xì)胞4期去極速度加快，心率增快。心率：21次/min最大收縮力：最小收縮力：圖41%KCl灌流脈搏曲線分析：K+與CsT在細(xì)胞膜上有競(jìng)爭(zhēng)性才制，細(xì)胞外液中K+濃度升

4、高，K+抑制細(xì)胞膜對(duì)Cf轉(zhuǎn)運(yùn)，因此進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)CeT降低，心肌的興奮一收縮耦聯(lián)作用減小，心肌收縮力減弱。心率：35次/min最大收縮力：最小收縮力：圖5腎上腺素灌流脈搏曲線分析：腎上腺素與心肌細(xì)胞膜上的Bi受體結(jié)合，心肌細(xì)胞和肌漿網(wǎng)膜Cf通透性增強(qiáng)，肌漿中Cf濃度升高，心肌收縮力增強(qiáng)。而且腎上腺素使肌鈣蛋白與鈣離子親和力下降，肌鈣蛋白對(duì)鈣離子的釋放增強(qiáng)，肌漿網(wǎng)膜攝取鈣離子的速度加快，鈉-鈣離子的交換增加，復(fù)極期向細(xì)胞外排出鈣離子增多，心肌舒張速度增快，整個(gè)舒張過程明顯加強(qiáng)。心率：34次/min最大收縮力：最小收縮力：圖6心得安+E灌流脈搏曲線分析：心得安是B1受體阻斷劑，能夠抑制腎上腺素與B1受

5、體結(jié)合，使E不能發(fā)揮作用，因此心率及心肌收縮力保持不變。心率：33次/min最大收縮力：最小收縮力：圖7乙酰膽堿灌流脈搏曲線分析：乙酰膽堿與心肌細(xì)胞膜上的M受體結(jié)合，心肌細(xì)胞膜K1道的通透性增強(qiáng),促進(jìn)K+外流，動(dòng)作電位期間Ca2+內(nèi)流減少，心肌收縮力降低。同時(shí)乙酰膽堿可直接抑制COT通道，導(dǎo)致Ca2+內(nèi)流減少，心肌收縮力降低。心率：34次/min最大收縮力：最小收縮力：圖8阿托品+Ach灌流脈搏曲線分析：阿托品是M受體阻斷劑，能夠抑制Ach減慢心率，加速房室傳導(dǎo)，增加心房收縮力，因此心率及心肌收縮力保持不變。六、討論1 .為何常用離體蛙心，而不常用離體哺乳類動(dòng)物心臟做心臟灌流實(shí)驗(yàn)？蛙類的某些基

6、本生命活動(dòng)和生理功能與哺乳類動(dòng)物有相似之處，它的離體組織、器官的生活條件比較簡(jiǎn)單，易于控制和掌握，來源豐富且價(jià)格低廉。離體蛙心不需要恒溫和特殊的供氧設(shè)備，因此常被選作心臟灌流實(shí)驗(yàn)。而哺乳類心臟生活條件要求高，離體心臟灌流需要恒溫環(huán)境，恒壓或恒流灌流、供氧。實(shí)驗(yàn)影響因素多、設(shè)備多，心臟離體后存活時(shí)間較短。因此一般學(xué)生實(shí)驗(yàn)較少用哺乳類動(dòng)物心臟做離體心臟灌流實(shí)驗(yàn)。2 .離體蛙心為什么會(huì)節(jié)律性跳動(dòng)？把離體和脫離神經(jīng)支配、體液因素影響的動(dòng)物心臟保持在適宜的環(huán)境中，在一定時(shí)間內(nèi)仍能產(chǎn)生節(jié)律性興奮和收縮活動(dòng)，這是由于心臟的靜脈竇能自動(dòng)按一定的興奮節(jié)律產(chǎn)生興奮，并傳導(dǎo)到心房和心室，引起整個(gè)心臟又節(jié)律的興奮和收

7、縮。靜脈竇能產(chǎn)生節(jié)律性興奮是由于其自律細(xì)胞在復(fù)極完畢后，立即開始自動(dòng)的緩慢的去極化，使膜電位逐漸減小，當(dāng)達(dá)到閾電位水平時(shí)，便爆發(fā)動(dòng)作電位。3 .蛙心插管插入心室時(shí)，是在心臟舒張期插入還是在心臟收縮期插入？為什么？蛙心插管插入心室時(shí)，應(yīng)在心縮期插入。這是因?yàn)橹鲃?dòng)脈開口處有半月瓣，當(dāng)心室收縮時(shí)，半月瓣正好打開，此時(shí)主動(dòng)脈與心室腔相通，插管容易順勢(shì)插入心室。而在心室舒張期，半月瓣處于關(guān)閉狀態(tài)，對(duì)插管產(chǎn)生阻力，不利于插入，強(qiáng)行插入易損傷心肌組織。4 .實(shí)驗(yàn)過程中，為什么必須保持蛙心插管內(nèi)液面高度的恒定？液面過高過低會(huì)產(chǎn)生什么影響？在實(shí)驗(yàn)中，蛙心插管內(nèi)液面的高度發(fā)生變化，心臟收縮曲線會(huì)發(fā)生相應(yīng)的變化。心

8、肌縮短幅度和速度即受前負(fù)荷的影響，也受后負(fù)荷的制約。插管內(nèi)液面高度所產(chǎn)生的壓力，在心室舒張末期是作用于心肌的前負(fù)荷，這個(gè)前負(fù)荷決定了心肌在收縮之前的初長(zhǎng)度。因此根據(jù)心肌Starling心肌定律，液面高度的變化將導(dǎo)致心肌收縮強(qiáng)度的改變。心室開始收縮時(shí)，插管內(nèi)液體產(chǎn)生的壓力又成為心肌收縮時(shí)承受的后負(fù)荷，后負(fù)荷改變會(huì)使心肌收縮的幅度和速度發(fā)生變化。液面過高，心縮曲線幅度降低。過高的液面使心室前負(fù)荷超過最適前負(fù)荷，心肌收縮強(qiáng)度不在增加或下降。而過高的后負(fù)荷卻使心肌縮短幅度和速度大大下降。液面過低，心室收縮曲線幅度也會(huì)降低，前負(fù)荷過小，導(dǎo)致心肌收縮強(qiáng)減小的效應(yīng)比后負(fù)荷減小的效應(yīng)要強(qiáng)。因此試驗(yàn)中選取一最適液面高度，并保持這一液面高度，以便取得較好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。5 .任氏液為何能維持離體蛙心較長(zhǎng)時(shí)間的跳動(dòng)？怎樣才能使離體蛙心存活時(shí)間長(zhǎng)？因?yàn)槿问弦菏浅Ｒ?guī)的生理代用液。它的組成與體液相近，具有能維持生物體的正常生命活動(dòng)的功能。它與體液等滲具有相同的PH值，并含有能量、營養(yǎng)物,而且含有生物體心肌波動(dòng)所需要的離子，如：K+、Na+Ca2將，并且等濃度，故能維持蛙心較長(zhǎng)時(shí)間的跳動(dòng)?？梢酝ㄟ^用與蛙體液相近的生理代用液來使蛙心長(zhǎng)時(shí)間存活。6 .蛙心灌流時(shí)，蛙心心肌以何種方式獲得營養(yǎng)？蛙心心肌可以通過擴(kuò)散的方式從任氏液中獲得葡萄糖，