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文檔簡介
1、?醫(yī)學形態(tài)學實驗?課程教學大綱山東大學醫(yī)學院?醫(yī)學形態(tài)學實驗?課程教學大綱課程名稱:醫(yī)學形態(tài)學實驗英文名稱:MedicalmorphologicalExperiment課程編實驗課性質(zhì):融合創(chuàng)新性實驗課程負責人:開放實驗工程數(shù):8大綱主撰人:武玉玲、張慶慧、郝晶等人大綱審核人:一、學時、學分課程總學時:32實驗學時:32課程總學分:實驗學分:二、適用專業(yè)及年級供根底、臨床醫(yī)學、預防、口腔醫(yī)學、護理學5、6、7年制專業(yè)用三、實驗教學目的與根本要求通過醫(yī)學形態(tài)學融合性實驗教學,將人體解剖學、組織胚胎學和病理解剖學三個相關學科的交叉內(nèi)容進行有機整合,形成系統(tǒng)化的知識.通過創(chuàng)新實驗的學習,使學生學會使
2、用醫(yī)學形態(tài)學實驗常用的儀器,熟悉科研常用的技術方法,培養(yǎng)學生動手水平、提升學生利用所學知識解決實際問題的能力,啟迪學生的科研思維和創(chuàng)新精神,以適應研究型大學培養(yǎng)人才的要求.四、主要儀器設備1.動物:Wistar大鼠,昆明小鼠2.儀器設備:顯微圖像觀察系統(tǒng)、恒溫培養(yǎng)箱,手術器械、微量注射器、常用染料.五、實驗課程內(nèi)容和學時分配序號實驗工程名稱實驗內(nèi)容學時分配實驗要求指導教師已開/未開1淋巴系統(tǒng)的組成1.第1、2趾蹊間隙之下注射0.2mlPatentblue,10分鐘后在月國窩及腹股溝處切開皮膚,尋找藍染的淋巴管及淋巴結(jié)可追蹤至腹膜后隙.觀察淋巴管及淋巴結(jié)的形態(tài)和分布.2 .將一段小腸系膜平鋪于透
3、明的載物臺上,用顯微圖像觀察系統(tǒng)觀察小腸系膜內(nèi)淋巴管的運動.注意尋找淋巴管的瓣膜.3 .小腸漿所注射適量Patentblue.觀察淋巴管的吸收功能及引流.4 .追蹤腹膜后隙染色的淋巴結(jié).5 .在腹股溝處結(jié)扎、切斷腹股溝淋巴結(jié)和淋巴管,造成淋巴引流障礙,觀察淋巴淤滯和淋巴水腫的形成.6 .觀察淋巴引流注射標本,淋巴結(jié)和淋巴管組織切片.總結(jié)淋巴系統(tǒng)的組成和功能.4分小組進行丁兆習未開2脊髓半切損傷的手術試驗觀察1、將Wista大鼠麻醉固定于手術臺.2、切開背部皮膚,暴露脊柱,翻開椎管,剪斷T脊髓.3、縫合背部肌及皮膚.4、待大鼠清醒后,觀察大鼠損傷后的臨床表現(xiàn).5、討論并寫出試驗4分小組進行邢子英
4、未開3肥大細胞的制作與觀察1 .肥大細胞的制作與觀察:取健康大鼠一只,脫臼處死.隨后剪取皮下組織,平鋪置于載玻片上.用95%乙醇溶液固定、甲苯胺藍染色,最后樹膠封片.鐐下觀察肥大細胞形態(tài)、顆粒染色特點及肥大細胞走形分布特點.2 .大鼠I型超敏反響動物模型的建立取馬血清用生理鹽水按一定的比例稀釋,然后給大鼠腹腔注射進行被動致敏.致敏后14日再用馬血清進行腹腔注射進行大鼠致敏實驗.隨后剪取皮下組織,觀察肥大細胞脫顆粒情況.4分小組進行張艷敏未開小鼠活精子標本的制作與精子低滲月中脹試驗1 .活精于標本的制備與觀察取育齡期雄鼠附睪,將其剪成小塊,制作小鼠活精子懸液.將懸液滴于載玻片上,低倍鏡觀察精子的
5、活動情況.另取精子懸液涂片,用0.3%甲苯胺藍液染色,光鏡觀察精子的形態(tài)結(jié)構(gòu).2 .體外抑精子實驗實驗分組:1實驗組:在37恒溫條件下,取50M精子懸液與等量一定濃度的抑精子藥液充分混合,分別于混合后30sec、5min、10min和30min時,取一滴混合液清于載玻片上,顯微值T計數(shù)10個視野,記錄活動精子百分率或用伊紅染料染色,計算精子存活率.2對照組:取50d精子懸液與等量生理鹽水混合,其余操作方法同上.比擬在處理后不同時間內(nèi)兩組活動精子的百分率.同時,分別取處理10min分鐘后的實驗組及對照組的精子懸液,以10001500r/min離心5min,棄上精液,取沉淀菅底的精子涂片,用0.3
6、%甲苯胺藍液染色,光鏡觀察兩組精4分小組進行武玉玲未開45小鼠體外受精實驗1 .精子獲能實驗取12-16周齡ICR雄鼠的附睪尾放在石蠟油中,用眼科剪在其頂端剪一小口,然后用眼科鐐子擠壓附睪尾部精子,將其挑到200ul平衡過夜的HTF受精獲能液滴中,置于37C、5%CO2飽和濕度條件下培養(yǎng)ih使精亍獲能,顯微鐐r觀察精亍的形態(tài)和運動.2 .超排卵及收集卵細胞:取6-8周齡ICR雌鼠,腹腔注射7.5IU/只PMSG,間隔48h后再注射7.5IU/只HCG進行超排處理實驗老師課前準備.注射HCG14h后,頸椎脫臼處死雌鼠,取出輸卵管在濾紙上除去血跡,放入培養(yǎng)皿中,用解剖針刺破輸卵管的膨大部,將流出的
7、卵子團引入到HTF培養(yǎng)液滴中,顯微鏡卜觀察卵丘復合體的形態(tài).3 .觀察受精過程:在卵子HTF培養(yǎng)液滴中,參加51Oul獲能精子200個精子/u1,顯微鏡卜觀察精子向卵細胞周圍集聚.放入CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng).4 .觀察精、卵原核:精卵共同孵育12-16h后,將受精卵移至玻片上多聚賴氨酸預處理,空氣枯燥5min,向玻片上滴加數(shù)滴甲醇-冰醋酸溶液3:1室溫25C卜固定5min,滴加1%美藍染色液室溫5min,水洗,90%、95%和純酒精脫水各2分鐘,二甲苯透明,樹膠封片,高倍顯微鐐下觀察受精卵的卵原核和精原核.4分小組進行郝晶未開6結(jié)締組織增生與肝硬化1 .肉眼及鐐下觀察正常肝臟的大體形態(tài)特點及正常組織
8、結(jié)構(gòu).2 .鐐下觀察固有結(jié)締組織的形態(tài)特點.3 .肉眼及鏡卜觀察肝硬化的標本及病理切片,對照肝臟正常結(jié)構(gòu)找出肝硬化的病理組織學特點.4 .互動式討論:肝臟結(jié)構(gòu)與功能的關系,固有結(jié)締組織的功能以及在創(chuàng)傷愈合中的作用,結(jié)締組織增生與肝硬化的關系,肝硬化時肝臟多種功能降低的結(jié)構(gòu)根底以及如何預防肝硬化的發(fā)生.4分小組進行張慶慧,甄軍暉未開7巨噬細胞與矽肺、塵肺的發(fā)生1 .肉眼觀察矽肺、塵肺的病理標本;2 .顯微鏡觀察活體染色的疏松結(jié)締組織鋪片,重點觀察吞噬了染料顆粒的巨噬細胞,成纖維細胞和膠原纖維;3 .顯微鏡觀察正常肺切片,熟悉肺組織的正常結(jié)構(gòu),觀察肺問質(zhì)中的塵細胞;4 .顯微鏡觀察矽肺、塵肺的病理
9、切片,匕止常肺切片對照比較,以理解巨噬細胞與矽肺、塵肺發(fā)病的關系;5 .學生自己動手,給小鼠腹腔注射或W注射臺盼藍,2小時后取腹腔液制作涂片,或取皮卜組織制作鋪片,伊紅染色,顯微鏡觀察吞噬了染料顆粒的巨噬細胞;6 .教師和學生互動式討論巨噬細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理功能,矽肺、塵肺的病理過程,巨噬細胞與矽肺、塵肺病理過程的相關關系,吸煙的危害;7 .教師和學生互動式討論巨噬細胞在特異性免疫和非特異性免疫中的作用,討論巨噬細胞在矽肺、塵肺、結(jié)核病、動脈粥樣硬化等疾病發(fā)生、開展和歸宿中的意義;4分小組進行甄軍暉未開8肺組織結(jié)構(gòu)特點與急性肺淤血、肺水月中的觀察1. 取大鼠稱重.一組腹腔注射腎上腺素22.5mg/kg體重,另一組腹腔注射相同量的生理鹽水做對照,注射后觀察記錄兩只大鼠的一般情況和呼吸等臨床表現(xiàn).15min20min后處死動物注意結(jié)扎氣管以免液體外溢,取出肺和心臟.2. 用濾紙吸去肺外表的液體,用天平稱兩肺的重量,計算肺重系數(shù)肺重量g/體重kg*100%,假設肺重系數(shù)1%,比擬兩組大鼠的肺重余數(shù).假設肺重系數(shù)1%,說明肺水月中已形成.3. 比照觀察2組大鼠肺的外觀,記錄包括人小、顏色、質(zhì)地、及切向外觀,將2組大鼠的肺臟用10%的甲醛固定.4. 鏡卜觀察
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