儀器分析試驗(yàn)部分教學(xué)大綱

1、儀器分析（實(shí)驗(yàn)部分）教學(xué)大綱學(xué)時(shí)：40 適用對(duì)象：農(nóng)學(xué)、環(huán)境科學(xué)、生物技術(shù)和食品科學(xué)與工程專業(yè)先修課程：普通化學(xué)、物理化學(xué)、分析化學(xué)、有機(jī)化學(xué)、物理學(xué)考核要求：學(xué)會(huì)儀器的使用，獨(dú)立進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作使用教材及主要參考書(shū)：林新花主編， 儀器分析， 華南理工大學(xué)出版社，2005年朱明華主編， 儀器分析( 第三版)， 北京：高等教育出版社，2000年 武漢大學(xué)化學(xué)系編，儀器分析， 高等教育出版社 2001年一、課程的性質(zhì)與任務(wù)儀器分析是根據(jù)物質(zhì)的物理和化學(xué)性質(zhì)來(lái)獲取其化學(xué)組成、含量、結(jié)構(gòu)及相關(guān)信息的科學(xué)，是在普通化學(xué)、物理化學(xué)、分析化學(xué)、有機(jī)化學(xué)及物理學(xué)基礎(chǔ)上開(kāi)設(shè)的一門實(shí)踐性很強(qiáng)的課程，是農(nóng)學(xué)、環(huán)境科學(xué)、

2、生物技術(shù)和食品科學(xué)與工程專業(yè)本科生的專業(yè)必修課。通過(guò)本課程的學(xué)習(xí)，學(xué)生了解常用儀器分析方法的特點(diǎn)、應(yīng)用范圍及局限性，掌握其原理和儀器結(jié)構(gòu)，為學(xué)生今后從事自然學(xué)科研究打下一個(gè)良好的基礎(chǔ)。二、教學(xué)目的與基本要求儀器分析是分析化學(xué)最為重要的組成部分，是化學(xué)和相關(guān)專業(yè)的必修課程，也是分析化學(xué)的發(fā)展方向。本課程涉及的分析方法是根據(jù)物質(zhì)的物理和物理化學(xué)特性對(duì)物質(zhì)的組成、結(jié)構(gòu)、信息進(jìn)行表征和測(cè)量，是學(xué)生學(xué)習(xí)化學(xué)分析之后，學(xué)生必須掌握的現(xiàn)代分析技術(shù)。它對(duì)于學(xué)生的知識(shí)、能力和綜合素質(zhì)的培養(yǎng)與提高起著非常重要的作用，在整個(gè)教學(xué)過(guò)程中占有非常重要的地位，是農(nóng)學(xué)、環(huán)境科學(xué)、化學(xué)、應(yīng)用化學(xué)和食品工程等專業(yè)的一門重要的必

3、修基礎(chǔ)課程。本課程的教學(xué)目的是使學(xué)生通過(guò)本課程的學(xué)習(xí)，熟練掌握各類儀器分析方法的基本原理以及儀器的各重要組成部分，對(duì)各儀器分析方法的應(yīng)用對(duì)象及分析過(guò)程要有基本的了解。此外，通過(guò)本課程的教學(xué)，讓學(xué)生對(duì)當(dāng)今各類分析儀器及分析方法及發(fā)展方向有一些初步的了解，從而為其以后的工作、科研及進(jìn)一步地學(xué)習(xí)作必要的鋪墊。三、學(xué)時(shí)分配序號(hào)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱實(shí)驗(yàn)類型實(shí)驗(yàn)要求適用專業(yè)學(xué)時(shí)1樣品前處理綜合必做農(nóng)學(xué)、食品32復(fù)混肥中錳元素的測(cè)定驗(yàn)證必做農(nóng)學(xué)、食品33水中鈣、鎂離子的測(cè)定綜合必做農(nóng)學(xué)、食品34植物材料乙烯釋放量的氣相色譜分離和測(cè)定綜合必做農(nóng)學(xué)、食品35酒品中甲醇的測(cè)定綜合必做農(nóng)學(xué)、食品36高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定小

4、兒速效感冒沖劑中對(duì)乙酰氨基酚和咖啡因的含量綜合必做農(nóng)學(xué)、食品37高效液相色譜法測(cè)定飲料、咖啡中咖啡因綜合必做農(nóng)學(xué)、食品38紫外分光光度法測(cè)定水中總酚濃度綜合必做農(nóng)學(xué)、食品39傅立葉紅外光譜儀測(cè)定高聚物設(shè)計(jì)必做農(nóng)學(xué)、食品410奶粉中氨基酸含量的測(cè)定綜合必做農(nóng)學(xué)、食品411紫蘇揮發(fā)油的GC-MS分析綜合必做農(nóng)學(xué)、食品412奶粉中性激素含量的測(cè)定綜合必做農(nóng)學(xué)、食品4四、教學(xué)中應(yīng)注意的問(wèn)題授課內(nèi)容以“精而新”為原則，讓學(xué)生對(duì)現(xiàn)代儀器有一個(gè)比較全面的認(rèn)識(shí)和了解；課堂上注意培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力,使其為今后的工作和學(xué)習(xí)打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。五、教學(xué)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)部分（一）實(shí)驗(yàn)考核方式及辦法考核方式：考查

5、；實(shí)驗(yàn)成績(jī)?cè)u(píng)分辦法：平時(shí)成績(jī)占30%，實(shí)驗(yàn)操作占40%，實(shí)驗(yàn)報(bào)告占30%。 （二）實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目一覽表儀器分析實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目一覽表（三）實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的具體內(nèi)容實(shí)驗(yàn)一、樣品前處理樣品前處理指樣品的制備和對(duì)樣品采用合適分解和溶解及對(duì)待測(cè)組分進(jìn)行提取、凈化、濃縮的過(guò)程，使被測(cè)組分轉(zhuǎn)變成可測(cè)定的形式以進(jìn)行定量、定性分析檢測(cè)。若選擇的前處理手段不當(dāng)，常常使某些組分損失、干擾組分的影響不能完全除去或引入雜質(zhì)。樣品前處理的目的是消除基體干擾，提高方法的準(zhǔn)確度、精密度、選擇性和靈敏度。因此，樣品前處理是分析檢測(cè)過(guò)程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，只要檢測(cè)儀器穩(wěn)定可靠，檢測(cè)結(jié)果的重復(fù)性和準(zhǔn)確性就主要取決于樣品前處理；方法的靈敏度也與樣品前處理過(guò)程

6、有著重要的關(guān)系，一種新的檢測(cè)方法，其分析速度往往取決于樣品前處理的復(fù)雜程度。測(cè)定各類樣品中的金屑元素，一般均需首先破壞樣品中的有機(jī)物質(zhì)。選用何種方法，在某種程度上取決于分析元素和被測(cè)樣品的基體性質(zhì)。本章主要介紹以下幾種常用的前處理方法。1、干灰化法 （1）高溫干灰化法 一般將灰化溫度高于100'C的方法稱為高溫干灰化法。高溫干灰化法對(duì)于破壞生化、環(huán)境和食品等樣品中的有機(jī)基體是行之有效的。樣品一般先經(jīng)100105干燥，除去水分及揮發(fā)物質(zhì)?；一瘻囟燃皶r(shí)間是需要選擇的，一般灰化溫度約450600。通常將盛有樣品的坩堝(一般可采用鉑金坩堝、陶瓷坩堝等)放人馬弗爐內(nèi)進(jìn)行灰化灼燒，冒煙直到所有有機(jī)

7、物燃燒完全，只留下不揮發(fā)的無(wú)機(jī)殘留物。這種殘留物主要是金屬氧化物以及非揮發(fā)性硫酸鹽、磷酸鹽和硅酸鹽等。這種技術(shù)最主要的缺點(diǎn)是使可以轉(zhuǎn)變成揮發(fā)性形式的成分會(huì)很快地部分或全部損失。灰化溫度不宜過(guò)低，溫度低則灰化不完全，殘存的小碳粒易吸附金屬元素，很難用稀酸溶解，造成結(jié)果偏低；灰化溫度過(guò)高，則損失嚴(yán)重。干灰化法一般適用于金屬氧化物，因?yàn)榇蠖鄶?shù)非金屬甚至某些金屬常會(huì)氧化成揮發(fā)性產(chǎn)物，如As、Sb、Ge、Ti和Hg等易造成損失。 食品樣品分析中多采用高溫干灰化法，一般都控制在450550進(jìn)行干灰化，灰化溫度若高于550會(huì)引起樣品的損失。食品樣品中鉛和鉻的分析，灰化溫度一般都在450550范圍內(nèi)。但對(duì)于含

8、氯的樣品，由于可能形成揮發(fā)性氯化鉛，需采取措施防止鉛的損失。對(duì)于雞蛋、罐頭肉、牛奶、牛肉等多種食品中鉛的分析，這種高溫干灰化破壞有機(jī)物的方法是可行的。 高溫干灰化法的優(yōu)點(diǎn)是能灰化大量樣品，方法簡(jiǎn)單，無(wú)試劑玷污，空白低。但對(duì)于低沸點(diǎn)的元素常有損失，其損失程度取決于灰化溫度和時(shí)間，還取決于元素在樣品中的存在形式。 （2）低溫干灰化法 為了克服高溫干灰化法因揮發(fā)、滯留和吸附而損失痕量金屑等問(wèn)題，常采用低溫干灰化法。用電激發(fā)的氧分解生物樣品的低溫灰化器，灰化溫度低于l00，每小時(shí)可破壞有機(jī)物質(zhì)。這種低溫干灰化法已用于原子吸收測(cè)定動(dòng)物組織中的鈹、鎘和碲等易揮發(fā)元素。低溫等離子體灰化方法可避免污染和揮發(fā)損

9、失以及濕法灰化中的某些不安全性。將盛有試樣的石英皿放入等離子體灰化器的氧化室中，用等離子體破壞樣品的有機(jī)部分，而使無(wú)機(jī)成分不揮發(fā)。低溫灰化的速度與等離子體的流速、時(shí)間，功率和樣品體積有關(guān)。目前，氧等離子體灰化器已用于糖和面粉等樣品的前處理。2、濕式消解法 濕式消解法屬于氧化分解法。用液體或液體與固體混合物作氧化劑，在一定溫度下分解樣品中的有機(jī)質(zhì)，此過(guò)程稱為濕式消解法。濕式消解法與干灰化法不同。干灰化法是靠升高溫度或增強(qiáng)氧的氧化能力來(lái)分解樣品有機(jī)質(zhì)。而濕式消解法則是依靠氧化劑的氧化能力來(lái)分解樣品，溫度并不是主要因素。，濕式消解法常用的氧化劑有HNOa、H2SO4、HClO4、H2O2和KMnO4

10、等。濕式消解法又分為以下幾種方法。 （1）稀酸消解法 對(duì)于不溶于水的無(wú)機(jī)試樣，可用稀的無(wú)機(jī)酸溶液處理。幾乎所有具有負(fù)標(biāo)準(zhǔn)電極電位的金屬均可溶于非氧化性酸，但也有一些金屬例外，如Cd、Co、Pb和Ni與鹽酸的反應(yīng)，反應(yīng)速度過(guò)慢甚至鈍化。許多金屬氧化物、碳酸鹽、硫化物等也可溶于稀酸介質(zhì)中。為加速溶解，必要時(shí)可加熱。 （2）濃酸消解法 為了溶解具有正標(biāo)準(zhǔn)電極電位的金屬，可以采用熱的濃酸，如HNO3、H2SO4和H3PO4等。樣品與酸可以在燒杯中加熱沸騰，或加熱回流，或共沸至干。為了增強(qiáng)處理效果，還可采用鋼彈技術(shù)，即將樣品與酸一起加入至內(nèi)襯鉑或聚四氟乙烯層的小鋼彈中，然后密封，加熱至酸的沸點(diǎn)以上。這種

11、技術(shù)既可保持高溫，又可維持一定壓力，揮發(fā)性組分又不會(huì)損失。熱濃酸溶解技術(shù)還適用于合金、某些金屬氧化物、硫化物、磷酸鹽以及硅酸鹽等。若酸的氧化能力足夠強(qiáng)，且加熱時(shí)間足夠長(zhǎng)，有機(jī)和生物樣品就完全被氧化，各種元素以簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)離子形式存在于酸溶液中。 （3）混合酸消解法 混合酸消解法是破壞生物、食品和飲料中有機(jī)體的有效方法之一。通常使用的是氧化性酸的混合液?；旌纤嵬嬗卸喾N特性，如氧化性、還原性和絡(luò)合性，其溶解能力更強(qiáng)。 常用的混合酸是HNO3HClO4，一般是將樣品與HClO4共熱至發(fā)煙，然后加入HNO3使樣品完全氧化?？捎糜谌轭愂称?其中的Pb)、油(其中的Cd，Cr)、魚(yú)(其中的Cu)和各種谷

12、物食品(其中的Cd、Pb、Mn、Zn)等樣品的灰化，對(duì)于發(fā)樣的消解也有良好的結(jié)果。 HNO3H2SO4的混合酸消解樣品時(shí)，先用HNO3氧化樣品至只留下少許難以氧化的物質(zhì)，待冷卻后，再加入H2SO4，共熱至發(fā)煙，樣品完全氧化。實(shí)驗(yàn)二、復(fù)混肥中錳元素的測(cè)定1. 本次實(shí)驗(yàn)的目的和要求進(jìn)一步了解原子吸收分光光度計(jì)的基本構(gòu)造和原理，了解原子吸收分光光度計(jì)的使用方法。2. 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容或原理試樣溶液中的錳，在空氣乙炔火焰中原子化，所產(chǎn)生的原子蒸汽吸收從空心陰極燈射出的特征波長(zhǎng)279.5nm的光，吸光度的大小與火焰中錳基態(tài)原子濃度成正比。3. 需用的儀器和試劑（1）錳標(biāo)準(zhǔn)溶液（2）原子吸收分光光度計(jì)：空氣乙炔燃

13、燒器，錳空心陰極燈（3）振蕩器4. 實(shí)驗(yàn)步驟（1）試驗(yàn)溶液的制備：水溶性錳試驗(yàn)溶液的制備。（2）錳工作曲線的繪制（3）錳樣品的測(cè)定（4）調(diào)節(jié)儀器主要參數(shù)，在最佳工作條件下測(cè)定試樣和標(biāo)準(zhǔn)系列的吸光度，以標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度為縱坐標(biāo)，以試樣吸光度為縱坐標(biāo)作圖。5. 教學(xué)方式以指導(dǎo)為主，充分調(diào)動(dòng)學(xué)生積極性。培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立設(shè)計(jì)、完成、分析實(shí)驗(yàn)的綜合能力。6. 考核要求以實(shí)驗(yàn)考核為主7. 實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求（1） 實(shí)驗(yàn)報(bào)告的格式應(yīng)采用統(tǒng)一封面，統(tǒng)一的實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙。封面應(yīng)包括：課程名稱、實(shí)驗(yàn)序號(hào)、名稱、專業(yè)、班級(jí)、姓名、同組實(shí)驗(yàn)者、實(shí)驗(yàn)時(shí)間。 （2）編寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告要規(guī)范，應(yīng)包括：實(shí)驗(yàn)名稱、目的、原理、儀器（名稱、規(guī)格、型

14、號(hào)及生產(chǎn)廠家）及試劑、實(shí)驗(yàn)步驟、數(shù)據(jù)記錄與處理、結(jié)果與討論、實(shí)驗(yàn)小結(jié)等。 （3）實(shí)驗(yàn)報(bào)告應(yīng)附有實(shí)驗(yàn)原始記錄。 （4）實(shí)驗(yàn)報(bào)告要條理清楚、文字簡(jiǎn)練、結(jié)論明確、書(shū)寫(xiě)整潔。 （5）任課教師對(duì)實(shí)驗(yàn)報(bào)告要認(rèn)真批閱，有錯(cuò)誤或不妥處要指明，最后要評(píng)定成績(jī)，并簽名、簽日期。實(shí)驗(yàn)三、水中鈣、鎂離子的測(cè)定1. 本次實(shí)驗(yàn)的目的和要求掌握原子吸收分光光度計(jì)的基本構(gòu)造和原理，掌握原子吸收分光光度計(jì)的使用方法。2. 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容或原理將試液噴入火焰中，使鈣、鎂原子化，在火焰中形成的基態(tài)原子對(duì)特征譜線產(chǎn)生選擇性吸收，由測(cè)得樣品和校準(zhǔn)溶液的吸光度進(jìn)行比較，確定樣品中被測(cè)元素的濃度。3. 需用的儀器和試劑（1）WFX-1F2B2型

15、原子吸收分光光度計(jì)、鈣、鎂空心陰極燈；（2）分析時(shí)使用的均為符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的試劑及去離子水或同等純度的水；（3）按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)配制鈣、鎂標(biāo)準(zhǔn)溶液。4. 實(shí)驗(yàn)步驟（1）試樣溶液的制備（2）空白溶液：空白試驗(yàn)用水取代試樣，所用試劑及其用量、步驟與試樣完全相同。（3）工作曲線的繪制（4）調(diào)節(jié)儀器主要參數(shù)，在最佳工作條件下測(cè)定試樣和標(biāo)準(zhǔn)系列的吸光度，以標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度為縱坐標(biāo)，以試樣吸光度為縱坐標(biāo)作圖。5. 教學(xué)方式以指導(dǎo)為主，充分調(diào)動(dòng)學(xué)生積極性。培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立設(shè)計(jì)、完成、分析實(shí)驗(yàn)的綜合能力。6. 考核要求以實(shí)驗(yàn)考核為主7. 實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求同上實(shí)驗(yàn)四、 植物材料乙烯釋放量的氣相色譜分離和測(cè)定1. 本次實(shí)驗(yàn)的目

16、的和要求進(jìn)一步了解氣相色譜的基本構(gòu)造和原理，了解氣相色譜的使用方法。2. 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容或原理：乙烯是植物體內(nèi)普遍存在的一種植物激素，可以利用高靈敏度的氣相色譜法進(jìn)行定量測(cè)定。在操作條件固定的情況下，用欲測(cè)組分的純?cè)噭┡渲貌煌瑵舛鹊囊幌盗袠?biāo)準(zhǔn)試樣，嚴(yán)格定量進(jìn)樣測(cè)出各標(biāo)準(zhǔn)樣的峰面積，以峰面積為縱坐標(biāo)，以標(biāo)樣的濃度為橫坐標(biāo)制作工作曲線，然后在相同條件下，保持進(jìn)樣量相同，測(cè)得未知組分的峰面積，有工作曲線可查出該組分的濃度。3. 需用的儀器和試劑： 儀器：（1）島津GC17A型氣相色譜儀（2）氫火焰離子化檢測(cè)器（3）GS-2010色譜數(shù)據(jù)工作站 試劑：乙烯標(biāo)準(zhǔn)品、植物樣品4. 實(shí)驗(yàn)步驟：（1）乙烯標(biāo)準(zhǔn)品的制

17、作從鋼瓶中取一球膽純乙烯，利用排水集氣法轉(zhuǎn)移到血漿瓶中，逐級(jí)稀釋，直至配成1ppm的標(biāo)準(zhǔn)乙烯氣（也可直接購(gòu)買準(zhǔn)確濃度的標(biāo)準(zhǔn)乙烯氣），從中取出1mL氣體進(jìn)行色譜分析，測(cè)定其標(biāo)樣峰面積。（2）植物樣品的準(zhǔn)備取1kg左右的果實(shí)放入呼吸室，密封8個(gè)小時(shí)。（3）調(diào)節(jié)色譜條件（4）測(cè)定取1mL氣體注入氣相色譜儀進(jìn)行分析。測(cè)定其峰面積，以保留時(shí)間定性。5. 教學(xué)方式以指導(dǎo)為主，充分調(diào)動(dòng)學(xué)生積極性。培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立設(shè)計(jì)、完成、分析實(shí)驗(yàn)的綜合能力。6. 考核要求課前做好預(yù)習(xí)，弄清本實(shí)驗(yàn)的目的與要求，在弄清實(shí)驗(yàn)原理的情況下認(rèn)真學(xué)習(xí)氣相色譜的使用，處理樣品，正確進(jìn)樣，記錄、整理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)；寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告。7. 實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求同

18、上實(shí)驗(yàn)五、酒品中甲醇的測(cè)定1. 本次實(shí)驗(yàn)的目的要求通過(guò)本實(shí)驗(yàn)掌握氣相色譜儀的使用方法；熟悉測(cè)定過(guò)程的基本操作技術(shù)；掌握標(biāo)準(zhǔn)曲線法實(shí)驗(yàn)技術(shù)。2. 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容或原理白酒含有一定量的甲醇，甲醇對(duì)人體的毒性很大，甲醇是一種低沸點(diǎn)化合物，很容易氣化，因此可用氣相色譜儀直接進(jìn)行分析和測(cè)定。在操作條件固定的情況下，用欲測(cè)組分的純?cè)噭┡渲貌煌瑵舛鹊囊幌盗袠?biāo)準(zhǔn)試樣，嚴(yán)格定量進(jìn)樣測(cè)出各標(biāo)準(zhǔn)樣的峰面積，以峰面積為縱坐標(biāo)，以標(biāo)樣的濃度為橫坐標(biāo)制作工作曲線，然后在相同條件下，保持進(jìn)樣量相同，測(cè)得未知組分的峰面積，由工作曲線可查出該組分的濃度。3. 需用的儀器和試劑：儀器：（1）島津GC17A型氣相色譜儀（2）氫火焰離子化

19、檢測(cè)器（3）GS-2010色譜數(shù)據(jù)工作站試劑：色譜純甲醇、乙醇、酒品4. 實(shí)驗(yàn)步驟：（1）標(biāo)液配制（2）樣品前處理：取1mL樣品稱重m直接吸0.2uL測(cè)定（3）調(diào)節(jié)色譜分析條件（4）根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣品中甲醇的實(shí)際含量。5. 教學(xué)方式以指導(dǎo)為主，充分調(diào)動(dòng)學(xué)生積極性。培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立設(shè)計(jì)、完成、分析實(shí)驗(yàn)的綜合能力。6. 考核要求課前做好預(yù)習(xí)，弄清本實(shí)驗(yàn)的目的與要求，在弄清實(shí)驗(yàn)原理的情況下認(rèn)真學(xué)習(xí)氣相色譜的使用，處理樣品，正確進(jìn)樣，記錄、整理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)；寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告。7. 實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求同上實(shí)驗(yàn)六、高效液相色譜法測(cè)定飲料、咖啡中的咖啡因1.本次實(shí)驗(yàn)的目的和要求通過(guò)本實(shí)驗(yàn)掌握高效液相色譜儀的使用方法；熟悉樣

20、品處理及測(cè)定過(guò)程的基本操作技術(shù)；掌握標(biāo)準(zhǔn)曲線法實(shí)驗(yàn)技術(shù)。2. 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容或原理咖啡因，化學(xué)名為1，3，7三甲基黃嘌呤。它是一種中樞神經(jīng)興奮劑，能興奮大腦皮層，使人精神興奮，目前可由茶葉及咖啡中提取，可口可樂(lè)中等飲料存在，咖啡因的三氯甲烷溶液在270nm波長(zhǎng)下有最大吸收，其吸收值的大小與咖啡因濃度成正比，從而進(jìn)行定量。3. 需用的儀器和試劑儀器：液相色譜LC10AVP，紫外檢測(cè)器，超聲波發(fā)生器試劑：氯仿（GR）、 甲醇（GR）、 乙睛（GR）、 咖啡因標(biāo)準(zhǔn)品4. 實(shí)驗(yàn)步驟（1） 可樂(lè)型飲料：脫氣、過(guò)濾即可進(jìn)樣（2） 咖啡、茶葉及其制成品 a. 稱樣置于燒杯中，加三氯甲烷超聲萃取2次。 b 合并二次

21、萃取液，加入少許無(wú)水硫酸鈉、飽和氯化鈉，過(guò)濾，濾入50mL比色管中，用三氯甲烷定容，經(jīng)混纖微孔濾膜過(guò)濾。 C 進(jìn)樣，記錄數(shù)值計(jì)算。（3）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制5. 教學(xué)方式分析操作、儀器操作為主。6. 考核要求課前做好預(yù)習(xí)，弄清本實(shí)驗(yàn)的目的與要求，在弄清實(shí)驗(yàn)原理的情況下認(rèn)真學(xué)習(xí)液相色譜的使用，過(guò)濾樣品，正確進(jìn)樣，記錄、整理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)；寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告。7. 實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求同上實(shí)驗(yàn)七、高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定小兒速效感冒沖劑中對(duì)乙酰氨基酚和咖啡因的含量1.本次實(shí)驗(yàn)的目的和要求通過(guò)本實(shí)驗(yàn)熟練掌握高效液相色譜儀的使用方法；熟悉樣品處理及測(cè)定過(guò)程的基本操作技術(shù)；掌握一點(diǎn)定標(biāo)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。2. 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容或原理對(duì)乙酰氨基酚和咖啡

22、因的弱堿溶液在280nm波長(zhǎng)下有最大吸收，其吸收值的大小與標(biāo)液濃度成正比，從而進(jìn)行定量。3. 需用的儀器和試劑儀器：液相色譜LC10AVP，紫外檢測(cè)器，超聲波發(fā)生器試劑：甲醇（色譜純）； 超純水、對(duì)乙酰氨基酚、咖啡因標(biāo)準(zhǔn)品4. 實(shí)驗(yàn)步驟(1)樣品制備：稱取小兒速效感冒沖劑適量于25 mL比色管中，用0.04%NaOH溶解定容過(guò)濾，取續(xù)濾液2.0mL于25mL比色管中，用0.04%NaOH溶液定容，即得。(2)標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣：標(biāo)準(zhǔn)品用微孔濾膜過(guò)濾。先分別進(jìn)樣對(duì)乙酰氨基酚和咖啡因的標(biāo)樣，得到各自峰型圖譜后，再進(jìn)混合樣。(3)進(jìn)樣品20L，根據(jù)樣品的峰高或峰面積來(lái)計(jì)算樣品中對(duì)乙酰氨基酚和咖啡因的的實(shí)際含

23、量。5. 教學(xué)方式分析操作、儀器操作為主。6. 考核要求課前做好預(yù)習(xí)，弄清本實(shí)驗(yàn)的目的與要求，在弄清實(shí)驗(yàn)原理的情況下認(rèn)真學(xué)習(xí)液相色譜的使用，過(guò)濾樣品，正確進(jìn)樣，記錄、整理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)；寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告。7. 實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求同上實(shí)驗(yàn)八、紫外分光光度法測(cè)定水中總酚濃度1.本次實(shí)驗(yàn)的目的和要求通過(guò)本實(shí)驗(yàn)初步了解紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的使用方法；熟悉樣品處理及測(cè)定過(guò)程的基本操作技術(shù)；掌握一點(diǎn)定標(biāo)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。2. 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容或原理酚類化合物在210300nm處有較強(qiáng)的紫外吸收，加入NaOH溶液后產(chǎn)生紅移現(xiàn)象，吸光度增加。在238nm和292.6nm附近有兩個(gè)吸收出現(xiàn)。而238.0nm處的吸收值比292.6nm處的吸收值大3

24、倍左右。用酸化水作參比溶液，以抵消水樣中其他物質(zhì)的作用，其線性范圍在020mg/L。3. 需用的儀器和試劑UV-1100型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、石英比色皿（1cm）一套、吸量管、容量瓶、燒杯、洗瓶；1000 mg/L的苯酚溶液，NaOH溶液，HCL溶液。4. 實(shí)驗(yàn)步驟(1) 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制(2) 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制及未知試樣的測(cè)定(3) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果處理5. 教學(xué)方式分析操作、儀器操作為主。6. 考核要求課前做好預(yù)習(xí)，弄清本實(shí)驗(yàn)的目的與要求，在弄清實(shí)驗(yàn)原理的情況下認(rèn)真學(xué)習(xí)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的使用，過(guò)濾樣品，正確進(jìn)樣，記錄、整理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)；寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告。7. 實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求同上實(shí)驗(yàn)九 傅立葉紅外光譜儀測(cè)定高聚物

25、1. 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?熟練掌握傅立葉紅外光譜儀的測(cè)定原理，辨別高聚物的類別。2. 實(shí)驗(yàn)原理紅外光譜是根據(jù)物質(zhì)吸收輻射能量后引起的能級(jí)躍遷，記錄躍遷過(guò)程獲得的紅外吸收光譜。分子振動(dòng)時(shí)，分子的偶極距發(fā)生變化，該分子能夠產(chǎn)生紅外吸收。在中紅外分子集團(tuán)振動(dòng)分為伸縮振動(dòng)和彎曲振動(dòng)。中紅外頻率范圍：4000-400cm-1，其中4000-1330 cm-1為基團(tuán)頻率區(qū) 1330-400 cm-1為指紋頻率區(qū)。3. 實(shí)驗(yàn)儀器 傅立葉紅外光譜儀、FT-IR200 壓片機(jī) 4. 實(shí)驗(yàn)步驟 開(kāi)機(jī)預(yù)熱30分鐘后打開(kāi)omnic軟件后，首先采集背景，放入已經(jīng)壓好的待測(cè)樣品片，然后采集樣品，進(jìn)行譜圖處理。5. 樣品分析取標(biāo)準(zhǔn)的

26、聚二乙烯樣品放入樣品架 進(jìn)行樣品采集6. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析標(biāo)準(zhǔn)：（1）首先依據(jù)譜圖推出化合物碳架類型：根據(jù)分子式計(jì)算不飽和度，公式：不飽和度F+1+(T-O)/2 其中： F：化合價(jià)為4價(jià)的原子個(gè)數(shù)（主要是C原子）， T：化合價(jià)為3價(jià)的原子個(gè)數(shù)（主要是N原子）， O：化合價(jià)為1價(jià)的原子個(gè)數(shù)（主要是H原子），例如：比如苯：C6H6，不飽和度6+1+（0-6）/24，3個(gè)雙鍵加一個(gè)環(huán)，正好為4個(gè)不飽和度；  （2）分析33002800 cm-1區(qū)域C-H伸縮振動(dòng)吸收；以3000 cm-1為界：高于3000 cm-1為不飽和碳C-H伸縮振動(dòng)吸收，有可能為烯，炔，芳香化合物，而低于30

27、00 cm-1一般為飽和C-H伸縮振動(dòng)吸收；（3）若在稍高于3000 cm-1有吸收,則應(yīng)在 22501450 cm-1頻區(qū)，分析不飽和碳碳鍵的伸縮振動(dòng)吸收特征峰，其中： 炔 22002100 cm-1 ；烯 16801640 cm-1 芳環(huán) 1600,1580,1500,1450 cm-1 若已確定為烯或芳香化合物，則應(yīng)進(jìn)一步解析指紋區(qū)，即1000650 cm-1的頻區(qū)，以確定取代基個(gè)數(shù)和位置（順?lè)?，鄰、間、對(duì)）（4）碳骨架類型確定后,再依據(jù)其他官能團(tuán)，如 C=O, O-H, C-N 等特征吸收來(lái)判定化合物的官能團(tuán)； （5）解析時(shí)應(yīng)注意把描述各官能團(tuán)的相關(guān)峰聯(lián)系起來(lái)，以準(zhǔn)確判定官能團(tuán)的存在,

28、如2820，2720和17501700 cm-1的三個(gè)峰，說(shuō)明醛基的存在。 至此，分析基本搞定，剩下的就是背一些常見(jiàn)常用的健值了！1.烷烴：C-H伸縮振動(dòng)（3000-2850 cm-1）C-H彎曲振動(dòng)（1465-1340 cm-1） 一般飽和烴C-H伸縮均在3000 cm-1以下，接近3000 cm-1的頻率吸收。 2.烯烴：烯烴C-H伸縮（31003010 cm-1） C=C伸縮(16751640 cm-1)  烯烴C-H面外彎曲振動(dòng)（1000675 cm-1）。3.炔烴：伸縮振動(dòng)（22502100 cm-1）  炔烴C-H伸縮振動(dòng)（3300 cm-1

29、附近）。4.芳烴：31003000 cm-1 芳環(huán)上C-H伸縮振動(dòng)16001450 cm-1 C=C 骨架振動(dòng) 880680 cm-1 C-H面外彎曲振動(dòng)   芳香化合物重要特征：一般在1600，1580，1500和1450 cm-1可能出現(xiàn)強(qiáng)度不等的4個(gè)峰。  880680 cm-1，C-H面外彎曲振動(dòng)吸收，依苯環(huán)上取代基個(gè)數(shù)和位置不同而發(fā)生變化，在芳香化合物紅外譜圖分析中，常常用此頻區(qū)的吸收判別異構(gòu)體。 5.醇和酚：主要特征吸收是O-H和C-O的伸縮振動(dòng)吸收，  O-H 自由羥基O-H的伸縮振動(dòng)：36503600 cm-1,為尖銳

30、的吸收峰，分子間氫鍵O-H伸縮振動(dòng)：35003200 cm-1，為寬的吸收峰； C-O 伸縮振動(dòng)：13001000 cm-1 O-H 面外彎曲：769-659 cm-1 6. 醚特征吸收：13001000 cm-1 的伸縮振動(dòng)  脂肪醚：11501060 cm-1 一個(gè)強(qiáng)的吸收峰 芳香醚：兩個(gè)C-O伸縮振動(dòng)吸收：12701230 cm-1（為Ar-O伸縮）10501000 cm-1（為R-O伸縮） 7.醛和酮：醛的主要特征吸收：17501700 cm-1（C=O伸縮）2820，2720 cm-1（醛基C-H伸縮） 脂肪酮：1715 cm-1，強(qiáng)的C=O伸縮振動(dòng)吸收，如果羰基

31、與烯鍵或芳環(huán)共軛會(huì)使吸收頻率降低 8.羧酸：羧酸二聚體：33002500 cm-1 寬，強(qiáng)的O-H伸縮吸收 17201706 cm-1 C=O 吸收 13201210 cm-1 C-O伸縮 920cm-1 成鍵的O-H鍵的面外彎曲振動(dòng) 9.酯：飽和脂肪族酯(除甲酸酯外)的C=O 吸收譜帶：17501735 cm-1區(qū)域 飽和酯C-C(=O)-O譜帶：12101163 cm-1 區(qū)域?yàn)閺?qiáng)吸收 10.胺：35003100 cm-1，N-H 伸縮振動(dòng)吸收 13501000 cm-1，C-N 伸縮振動(dòng)吸收 N-H變形振動(dòng)相當(dāng)于CH2的剪式振動(dòng)方式，其吸收帶在：16401560 cm-1，面外彎曲振動(dòng)在

32、900650 cm-1.11.腈：腈類的光譜特征：三鍵伸縮振動(dòng)區(qū)域，有弱到中等的吸收脂肪族腈 2260-2240 cm-1  芳香族腈 2240-2222 cm-1 12.酰胺：3500-3100 cm-1 N-H伸縮振動(dòng) 1680-1630 cm-1 C=O 伸縮振動(dòng) 1655-1590 cm-1 N-H彎曲振動(dòng)1420-1400 cm-1 C-N伸縮 13.有機(jī)鹵化物：C-X 伸縮 脂肪族  C-F 1400-730 cm-1 C-Cl 850-550 cm-1C-Br 690-515 cm-1 C-I 600-500 cm-1結(jié)果：高聚物測(cè)定后，檢

33、測(cè)物質(zhì)為聚二乙烯的可能性為0.95實(shí)驗(yàn)十 奶粉中氨基酸含量的測(cè)定1、本次實(shí)驗(yàn)的目的和要求通過(guò)本實(shí)驗(yàn)，使學(xué)生掌握奶粉中氨基酸含量的測(cè)定方法。2、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容或原理使用烘箱、氮吹儀、氨基酸分析儀等測(cè)定不同品牌奶粉中氨基酸含量。奶粉中的蛋白質(zhì)經(jīng)鹽酸水解成為游離氨基酸，經(jīng)氨基酸分析儀的離子交換柱分離后，與茚三酮溶液產(chǎn)生顏色反應(yīng)，再通過(guò)分光光度計(jì)比色測(cè)定氨基酸含量。3、需用的儀器和試劑儀器和設(shè)備：真空泵、恒溫干燥箱、水解管：耐壓螺蓋玻璃管或硬質(zhì)玻璃管，體積2030mL，用去離子水沖洗干凈并烘干、氮吹儀或真空干燥器（溫度可調(diào)節(jié)）、氨基酸自動(dòng)分析儀、電子天平（感量0.1mg）試劑：濃鹽酸：優(yōu)級(jí)純、無(wú)水乙醇：優(yōu)級(jí)

34、純、混合氨基酸標(biāo)準(zhǔn)液（儀器制造公司出售）、緩沖液（儀器制造公司出售）、茚三酮溶液（儀器制造公司出售）、高純氮?dú)猓杭兌?9.99%、冷凍劑：市售食鹽與冰按1+3混合。4 分析步驟4.1 稱樣準(zhǔn)確稱取一定量均勻性好的奶粉，精確到0.0001g，（使試樣蛋白質(zhì)含量在10mg20mg范圍內(nèi)），將稱好的試樣放于水解管中。4.2 水解在水解管內(nèi)加6mol/L鹽酸1015mL（視試樣蛋白質(zhì)含量而定）。將水解管放入冷凍劑中，冷凍3min5min，再接到真空泵的抽氣管上，抽真空（接近0 Pa），然后充入高純氮?dú)猓辉俪檎婵盏獨(dú)?，重?fù)三次后，在充氮?dú)鉅顟B(tài)下封口或擰緊螺絲蓋將已封口的水解管放在110±1的恒

35、溫干燥箱內(nèi)，水解22h后，取出冷卻。打開(kāi)水解管，將水解液過(guò)濾后，用去離子水多次沖洗水解管，將水解液全部轉(zhuǎn)移到50mL容量瓶?jī)?nèi)，用去離子水定容，吸取濾液1mL于5mL容量瓶?jī)?nèi)，用氮吹儀在4050干燥，殘留物用1mL2mL水溶解，再干燥，反復(fù)進(jìn)行兩次，最后蒸干，用1mLpH2.2的緩沖液溶解。4.上機(jī)測(cè)定十六種氨基酸分子量：天冬氨酸：133.1；蘇氨酸：119.1；絲氨酸：105.1；谷氨酸：147.1；脯氨酸：115.1；甘氨酸：75.1；丙氨酸：89.1；纈氨酸：117.2；蛋氨酸：149.2；異亮氨酸：131.2；亮氨酸：131.2；酪氨酸：181.2；苯丙氨酸：165.2；組氨酸：155.

36、2；賴氨酸：146.2；精氨酸：174.2。5、教學(xué)方式以學(xué)生實(shí)驗(yàn)為主，課堂講授為輔。6、考核要求課前做好預(yù)習(xí)，弄清本實(shí)驗(yàn)的目的與要求，寫(xiě)預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)報(bào)告；在弄清實(shí)驗(yàn)原理的情況下認(rèn)真進(jìn)行每一個(gè)實(shí)驗(yàn)操作，記錄、整理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)；寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告。氨基酸分析的原理及儀器的正確使用。7、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求應(yīng)使用專用實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙，內(nèi)容包括下列各項(xiàng)：（1）報(bào)告的題目（注明樣本名稱）；（2）實(shí)驗(yàn)原理；（3）儀器設(shè)備（4）試劑（5）實(shí)驗(yàn)步驟；（6）結(jié)果計(jì)算（包括原始數(shù)據(jù)記錄表格和整理后的數(shù)據(jù)記錄表格）；（7）問(wèn)題分析與討論（要對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果作出估計(jì)，分析誤差大小及原因，對(duì)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題應(yīng)進(jìn)行討論，對(duì)實(shí)驗(yàn)方法、實(shí)驗(yàn)設(shè)備有何改進(jìn)建議也可寫(xiě)入此欄）。實(shí)驗(yàn)十一、紫蘇揮發(fā)油的 GC-MS 分析 1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵笸ㄟ^(guò)本實(shí)驗(yàn)，使學(xué)生掌握用GC-MS定性分析紫蘇梗中的揮發(fā)油。2、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容或原理使用氣質(zhì)聯(lián)用儀HP7890/5975C分離鑒定紫蘇中揮發(fā)油的含量。3、需用的儀器和試劑儀器和設(shè)備：氣相色譜儀7890、質(zhì)譜聯(lián)用儀HP5975C、粉碎機(jī)、電子天平（感量0.1mg） 試