遺傳學實驗課件2(1)

1、請問請問解離解離與與軟軟化化的目的是什的目的是什么？么？為保證染色的為保證染色的充分充分要注意哪要注意哪些問題？些問題？壓片時應注意的壓片時應注意的問題有哪些？問題有哪些？請注意比較經(jīng)過預處理和未經(jīng)預處理的材料有何不同？1.了解果蠅生活史各階段的形態(tài)特征，觀察果蠅的幾了解果蠅生活史各階段的形態(tài)特征，觀察果蠅的幾種常見的突變類型。種常見的突變類型。2.掌握辨別雌雄果蠅的方法。掌握辨別雌雄果蠅的方法。3.了解果蠅的飼養(yǎng)方法和處理方法。了解果蠅的飼養(yǎng)方法和處理方法。 1.材料：野生型和常見的突變型果蠅。材料：野生型和常見的突變型果蠅。2.用具：體視顯微鏡、放大鏡、小鑷子、培養(yǎng)瓶、麻醉瓶、用具：體視顯

2、微鏡、放大鏡、小鑷子、培養(yǎng)瓶、麻醉瓶、白瓷板、培養(yǎng)皿、毛筆。白瓷板、培養(yǎng)皿、毛筆。3. 藥品：乙醚、瓊脂、玉米粉、蔗糖、酵母粉、苯甲酸。藥品：乙醚、瓊脂、玉米粉、蔗糖、酵母粉、苯甲酸。果蠅形體小，生長迅果蠅形體小，生長迅速，繁殖率高，飼養(yǎng)速，繁殖率高，飼養(yǎng)簡便，突變性狀多，簡便，突變性狀多，是遺傳學研究的極好是遺傳學研究的極好材料。材料。1. 果蠅培養(yǎng)基的配制果蠅培養(yǎng)基的配制 玉米粉培養(yǎng)基玉米粉培養(yǎng)基2.果蠅的生活史觀察果蠅的生活史觀察 3.果蠅的麻醉果蠅的麻醉 乙醚麻醉乙醚麻醉0.5min后轉入培養(yǎng)皿中，如觀后轉入培養(yǎng)皿中，如觀察中蘇醒，可在培養(yǎng)皿內放一個滴有乙醚的濾紙條補救。察中蘇醒，可在

3、培養(yǎng)皿內放一個滴有乙醚的濾紙條補救。 4.果蠅的性狀觀察果蠅的性狀觀察1.描述果蠅的生活史。描述果蠅的生活史。2.如何區(qū)別雌雄果蠅？如何區(qū)別雌雄果蠅？1. 取材取材 取果蠅三齡幼蟲置于載玻片上，滴加取果蠅三齡幼蟲置于載玻片上，滴加0.7生生理鹽水理鹽水2.剖取果蠅唾腺剖取果蠅唾腺 3.染色壓片染色壓片4.鏡檢鏡檢1. 繪出所觀察到的果蠅唾腺染色體的圖像，標明染色中心和繪出所觀察到的果蠅唾腺染色體的圖像，標明染色中心和5條臂。條臂。2. 果蠅唾腺染色體與其他染色體在形態(tài)結構上有什么區(qū)別？果蠅唾腺染色體與其他染色體在形態(tài)結構上有什么區(qū)別？通過自行設計實驗方案，研究果通過自行設計實驗方案，研究果蠅兩

4、對相對性狀的雜交試驗結果蠅兩對相對性狀的雜交試驗結果分析，驗證獨立分配規(guī)律。分析，驗證獨立分配規(guī)律。1.材料：長翅、黑檀體與殘翅、灰體的果蠅。材料：長翅、黑檀體與殘翅、灰體的果蠅。2.用具：體視顯微鏡、飼養(yǎng)瓶、麻醉瓶、海棉板、白瓷板、用具：體視顯微鏡、飼養(yǎng)瓶、麻醉瓶、海棉板、白瓷板、解剖針、鑷子、毛筆等。解剖針、鑷子、毛筆等。3. 藥品：乙醚、酒精等。藥品：乙醚、酒精等。長翅黑檀體的雌蠅與長翅黑檀體的雌蠅與殘翅、灰體的雄蠅交殘翅、灰體的雄蠅交配配(或反交或反交)，F(xiàn)1代自代自交而得的交而得的F2產(chǎn)生性狀產(chǎn)生性狀分離和重組，出現(xiàn)四分離和重組，出現(xiàn)四種表現(xiàn)型，比例為種表現(xiàn)型，比例為9:3:3:1。

5、1. 麻醉麻醉2.選取長翅、黑檀體處女蠅和殘翅、灰體雄蠅選取長翅、黑檀體處女蠅和殘翅、灰體雄蠅56對對(或反交或反交)，一起放入事先裝有培養(yǎng)基的飼養(yǎng)瓶內。，一起放入事先裝有培養(yǎng)基的飼養(yǎng)瓶內。3.一周后倒出親本果蠅，等一周后倒出親本果蠅，等F1羽化后進行觀察、記錄。羽化后進行觀察、記錄。 4.任意選取正交或反交組合的任意選取正交或反交組合的F1雌雄果蠅雌雄果蠅(雌蠅必須處雌蠅必須處女蠅女蠅)78對，放入一個培養(yǎng)瓶中。對，放入一個培養(yǎng)瓶中。5.一周后倒去一周后倒去F1果蠅，待果蠅，待F2羽化后羽化后10天進行觀察統(tǒng)計。天進行觀察統(tǒng)計。1.對觀察資料進行對觀察資料進行2測驗，討論實驗結果是否符合獨立

6、測驗，討論實驗結果是否符合獨立分配規(guī)律。分配規(guī)律。2.果蠅雜交時應注意哪些事項？果蠅雜交時應注意哪些事項？1. 掌握人工誘發(fā)多倍體植物的原理、方法及其在植物掌握人工誘發(fā)多倍體植物的原理、方法及其在植物育種上的意義。育種上的意義。2. 觀察多倍體植物，鑒別植物染色體數(shù)目的變化。觀察多倍體植物，鑒別植物染色體數(shù)目的變化。1.材料：玉米、水稻或其他植物種子。材料：玉米、水稻或其他植物種子。 2.用具：顯微鏡、生化培養(yǎng)箱、冰箱、天平、鑷子、解剖用具：顯微鏡、生化培養(yǎng)箱、冰箱、天平、鑷子、解剖針、刀片、載玻片、蓋玻片、燒杯、量筒、吸水紙。針、刀片、載玻片、蓋玻片、燒杯、量筒、吸水紙。3. 藥品：秋水仙素

7、、藥品：秋水仙素、95%酒精、冰醋酸、鹽酸、碘化鉀等。酒精、冰醋酸、鹽酸、碘化鉀等。1. 秋水仙素溶液配制秋水仙素溶液配制2. 材料處理、固定、保存材料處理、固定、保存3. 壓片壓片4. 鏡檢鏡檢繪出玉米根尖多倍性細胞的中期染色體圖像。繪出玉米根尖多倍性細胞的中期染色體圖像。1. 了解微核測試原理和毒理遺傳學意義了解微核測試原理和毒理遺傳學意義 。2. 學習蠶豆根尖的微核測試技術學習蠶豆根尖的微核測試技術 。1.材料：蠶豆種子。材料：蠶豆種子。 2.用具：顯微鏡、鑷子、載玻片、蓋玻片、燒杯等。用具：顯微鏡、鑷子、載玻片、蓋玻片、燒杯等。3. 藥品：卡諾固定液、鹽酸酒精解離液、改良苯酚品紅染藥品

8、：卡諾固定液、鹽酸酒精解離液、改良苯酚品紅染液、液、NaN3等。等。微核是真核生物細微核是真核生物細胞經(jīng)各種理化因子胞經(jīng)各種理化因子作用后引起染色體作用后引起染色體畸變，在間期細胞畸變，在間期細胞中的一種表現(xiàn)形式。中的一種表現(xiàn)形式。1.浸種催芽浸種催芽2.用被檢測液處理根尖用被檢測液處理根尖3.根尖細胞恢復根尖細胞恢復4.根尖細胞固定、酸解、染色根尖細胞固定、酸解、染色 5.顯微鏡下觀察顯微鏡下觀察1. 在蠶豆根尖細胞的微核測試中，為什么要進行恢在蠶豆根尖細胞的微核測試中，為什么要進行恢復培養(yǎng)？復培養(yǎng)？2. 產(chǎn)生微核的根尖細胞在產(chǎn)生前的分裂中期可能出產(chǎn)生微核的根尖細胞在產(chǎn)生前的分裂中期可能出現(xiàn)

9、什么樣的中期分裂圖像？現(xiàn)什么樣的中期分裂圖像？掌握從高等真核生物細胞中制備基因組掌握從高等真核生物細胞中制備基因組DNA的基本原的基本原理，熟悉從高等植物中提取基因組理，熟悉從高等植物中提取基因組DNA的技術流程。的技術流程。1.材料：幼嫩的水稻幼苗。材料：幼嫩的水稻幼苗。 2.用具：水浴鍋、液氮罐、離心機、移液槍、電泳設備、用具：水浴鍋、液氮罐、離心機、移液槍、電泳設備、凝膠成像分析系統(tǒng)、研缽等。凝膠成像分析系統(tǒng)、研缽等。3. 藥品：藥品：2CTAB抽提緩沖液、氯仿抽提緩沖液、氯仿 異戊醇（異戊醇（24 1）、）、異丙醇、無水乙醇、異丙醇、無水乙醇、70%乙醇、乙醇、TE等。等。采用采用CTAB法提取植物法提取植物DNA1.樣品加液氮研磨成粉末，加樣品加液氮研磨成粉末，加2CTAB抽提緩沖液抽提緩沖液65水浴保溫水浴保溫30 min以上；以上；2.加入等體積的氯仿加入等體積的氯仿 異戊醇（異戊醇（24 1）；）；3. 12000 rpm，室溫，離心，室溫，離心1020 min； 4.將上清液加入將上清液加入2/3體積的經(jīng)體積的經(jīng)-20預冷的異丙醇；預冷的異丙醇；5.將將DNA沉淀用沉淀用70%乙醇洗滌；乙醇洗滌；6.干燥后的干燥后的DNA沉淀溶于適量沉淀溶于適量TE（pH8.0）緩沖液中；）緩沖液中； 7.取少量取少量DNA溶液在溶液在0.8%的瓊