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1、實(shí)驗(yàn)7 胃腸運(yùn)動(dòng)的直接觀察胃腸運(yùn)動(dòng)的直接觀察 離體腸段平滑肌的描記離體腸段平滑肌的描記 目的:1.動(dòng)物在體胃腸運(yùn)動(dòng)及調(diào)節(jié)2.了解腸段平滑肌的生理特性3.學(xué)習(xí)離體腸段平滑肌的實(shí)驗(yàn)方法原 理1.胃腸道平滑肌經(jīng)常維持一定的緊張性收縮,在體內(nèi)受到神經(jīng)和體液的調(diào)節(jié)。在神經(jīng)及某些藥物的作用下,這種緊張性及運(yùn)動(dòng)節(jié)律可發(fā)生改變。神經(jīng)調(diào)節(jié)中,副交感神經(jīng)通過釋放乙酰膽堿使其運(yùn)動(dòng)加強(qiáng),交感神經(jīng)通過釋放去甲腎上腺素使其運(yùn)動(dòng)減弱。原 理2. 胃腸道平滑肌以膽堿能神經(jīng)占優(yōu)勢(shì),小劑量或低濃度的乙酰膽堿能激動(dòng)M受體,產(chǎn)生與興奮膽堿能神經(jīng)節(jié)后纖維相似的作用,興奮胃腸道。阿托品與膽堿受體結(jié)合阻斷膽堿能遞質(zhì)從而產(chǎn)生抗膽堿作用。新斯
2、的明作為膽堿酯酶的抑制劑,抑制乙酰膽堿的分解,使乙酰膽堿的作用持續(xù)加強(qiáng)。原 理3. 消化道平滑肌的特點(diǎn)是興奮性較低,收縮緩慢,富有伸展性,具有緊張性,自動(dòng)節(jié)律性,對(duì)化學(xué)物質(zhì),溫度和機(jī)械牽張刺激較敏感等特點(diǎn),給予離體腸肌一接近于在體情況的適宜環(huán)境,消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。本實(shí)驗(yàn)觀察當(dāng)模擬內(nèi)環(huán)境發(fā)生變化時(shí),離體小腸平滑肌運(yùn)動(dòng)的變化。原 理4.該實(shí)驗(yàn)方法不僅在理論上證明平滑肌的生理特性,而且還可用來測(cè)量化學(xué)物質(zhì)或藥物的生理學(xué)特性,被稱為生物學(xué)鑒定法。儀器設(shè)備n家兔,手術(shù)臺(tái),手術(shù)器械,恒溫水浴槽,恒溫水浴,RM6240,張力換能器,氧氣袋,鐵架臺(tái),燒杯,滴管,注射器,臺(tái)氏液,阿托品(0.5
3、mg/ml),新思的明(1mg/ml) 0.01%腎上腺素,0.01%乙酰膽堿,1mol/LNaOH,1mol/LHCl,2%戊巴比妥鈉。方法與步驟一.胃腸運(yùn)動(dòng)觀察:1.手術(shù)操作:(1)家兔稱重,用戊巴比妥鈉麻醉(20毫克/公斤體重)。(2)將兔子仰臥位固定于手術(shù)臺(tái)上。 (3)剪腹部毛,沿腹中線切口,剖開腹腔,露出胃和腸。 方法與步驟2.實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目:(1)觀察正常情況下胃和小腸的運(yùn)動(dòng)。注意其緊張度(可用手觸摸胃測(cè)其緊張度)。(2)由耳緣靜脈靜脈注射新思的明0.2-0.3ml,或滴幾滴于胃腸漿膜上,觀察胃和小腸運(yùn)動(dòng)的變化。(3)在新思的明作用的基礎(chǔ)上,注射阿托品0.5ml,觀察胃和小腸運(yùn)動(dòng)的變化。
4、 方法與步驟二.離體小腸平滑肌的生理特性:1.實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:裝備麥?zhǔn)显〔?,將其放置?7恒溫水浴。麥?zhǔn)显〔蹆?nèi)盛滿37臺(tái)氏液,將充滿氧氣的球膽經(jīng)橡皮管連接至麥?zhǔn)显〔垡倚屯夤苌?,不斷注入氧氣,調(diào)節(jié)氣流速度,使氣泡一個(gè)接一個(gè)注入。方法與步驟2. 在幽門下端分離十二指腸3-4cm,雙結(jié)扎此腸段,于雙結(jié)扎中間將腸段剪斷,用臺(tái)氏液反復(fù)沖洗腸內(nèi)容物,在其兩端穿線,將一端固定于麥?zhǔn)显〔垡倚屯夤軖煦^上,另一端與張力換能器相連。方法與步驟3.待此裝置穩(wěn)定10-20分鐘后,使用RM6240記錄小腸段平滑肌運(yùn)動(dòng)曲線。 4.實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目:(1)觀察記錄37 臺(tái)氏液中的腸段節(jié)律性收縮曲線。(2)觀察記錄25 臺(tái)氏液中的腸段節(jié)
5、律性收縮曲線。(3)待臺(tái)氏液溫度穩(wěn)定在37 后,用滴管向浴槽中加入0.01%乙酰膽堿3-4滴,觀察并記錄小腸平滑肌活動(dòng)的變化。然后用臺(tái)氏液反復(fù)沖洗并更換新的臺(tái)氏液。(4)待平滑肌穩(wěn)定后,加入0.01%腎上腺素3-4滴,觀察并記錄小腸平滑肌活動(dòng)的變化。然后用臺(tái)氏液反復(fù)沖洗并更換新的臺(tái)氏液。方法與步驟(5)滴加1mol/L HCl溶液3-4滴,觀察并記錄小腸平滑肌活動(dòng)的變化。然后用臺(tái)氏液反復(fù)沖洗并更換新的臺(tái)氏液。(6)滴加1mol/L NaOH溶液3-4滴,觀察并記錄小腸平滑肌活動(dòng)的變化。然后用臺(tái)氏液反復(fù)沖洗并更換新的臺(tái)氏液。注意事項(xiàng)1. 實(shí)驗(yàn)操作過程中,注意動(dòng)物保溫。經(jīng)常 用溫?zé)岬纳睇}水濕潤胃
6、腸。2. 取小腸標(biāo)本時(shí)勿牽拉。3. 保證氧氣的補(bǔ)充 。 實(shí)驗(yàn)要求n描述各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目所得實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象并分析。n描記小腸平滑肌運(yùn)動(dòng)曲線,并分析各種因素對(duì)其影響的機(jī)制。表1 不同處理因素對(duì)小腸平滑肌活動(dòng)的影響(次/min,g)組別 頻率(次/min) 振幅(g)正常(37C)25C乙酰膽堿腎上腺素鹽酸氫氧化鈉n乙酰膽堿作用于腸道平滑肌M3受體n腎上腺素主要作用于腸道平滑肌2受體,此受體為抑制性受體,抑制胃腸道運(yùn)動(dòng)。nPH過高、過低,收縮幅度及張力都會(huì)降低,最適PH時(shí)收縮效果最好。n腸管平滑肌對(duì)溫度改變極為敏感,當(dāng)溫度降到30以下時(shí),由于代謝水平的降低,興奮性減弱,可出現(xiàn)收縮曲線基線下移,頻率變慢,收縮幅度變小。有時(shí)可能會(huì)見到基線先上移后下降的現(xiàn)象。這是因?yàn)榻禍乇旧韺?duì)腸管是一種刺激
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