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1、實驗五實驗五 巨噬細胞的吞噬現(xiàn)象觀察巨噬細胞的吞噬現(xiàn)象觀察一一.實驗目的實驗目的1 觀察小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞的現(xiàn)象觀察小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞的現(xiàn)象和過程,理解巨噬細胞的作用及其對生物和過程,理解巨噬細胞的作用及其對生物體的意義。體的意義。2 掌握小白鼠的固定和腹腔注射技術,以掌握小白鼠的固定和腹腔注射技術,以及小白鼠脫臼處死的方法。及小白鼠脫臼處死的方法。二、原理二、原理 吞噬作用是機體內(nèi)普遍存在的一種非特異吞噬作用是機體內(nèi)普遍存在的一種非特異性免疫機制。高等動物具有大小兩類吞噬性免疫機制。高等動物具有大小兩類吞噬細胞細胞(即巨噬細胞和嗜中性粒細胞即巨噬細胞和嗜中性粒細胞),專司吞,專司
2、吞噬作用,為非持異免疫功能的重要組成部噬作用,為非持異免疫功能的重要組成部分。分。 外源蛋白或異物可激發(fā)機體巨噬細胞的趨外源蛋白或異物可激發(fā)機體巨噬細胞的趨化作用,繼而產(chǎn)生變形運動,吞噬異物,化作用,繼而產(chǎn)生變形運動,吞噬異物,在溶酶體的作用下破壞分解異源蛋白。在溶酶體的作用下破壞分解異源蛋白。三、材料和試劑三、材料和試劑1.器材:顯微鏡、解剖盤、剪刀、鑷子、器材:顯微鏡、解剖盤、剪刀、鑷子、注射器、載玻片、蓋玻片、吸管等注射器、載玻片、蓋玻片、吸管等2.試劑:試劑:0.85%生理鹽水;生理鹽水; Alsever溶液;溶液;6%淀粉肉湯(含臺盼藍)。淀粉肉湯(含臺盼藍)。3材料:材料:(1)
3、小白鼠小白鼠(2) 1%雞紅細胞懸液雞紅細胞懸液雞血雞血1ml4mlAlsever 溶液溶液4保存,保存,用前加用前加510倍體積倍體積0.85生理鹽水混勻離心生理鹽水混勻離心(1500rpm,10min)洗滌)洗滌2次,用次,用0.85生生理鹽水配成理鹽水配成1懸液。懸液。四實驗方法、步驟四實驗方法、步驟1提前一天(提前一天(12-24h)給小白鼠腹腔注射)給小白鼠腹腔注射1ml含臺含臺盼藍的盼藍的6淀粉肉湯。注意注射時勿傷及小鼠肝、淀粉肉湯。注意注射時勿傷及小鼠肝、脾、血管,勿注入腸內(nèi)。脾、血管,勿注入腸內(nèi)。2實驗時,將注射了淀粉肉湯的小鼠固定,并給實驗時,將注射了淀粉肉湯的小鼠固定,并給
4、其腹腔注射其腹腔注射1雞紅細胞液雞紅細胞液1ml(注射時進針要果(注射時進針要果斷,進針位置不能太深,拔針要輕緩),稍過片斷,進針位置不能太深,拔針要輕緩),稍過片刻,輕按揉小鼠腹部,使紅細胞分散于腹腔???,輕按揉小鼠腹部,使紅細胞分散于腹腔。320min后,拉斷頸椎處死小白鼠;剖開腹腔,用后,拉斷頸椎處死小白鼠;剖開腹腔,用不裝針頭的注射器(或吸管)吸取腹腔液(大約不裝針頭的注射器(或吸管)吸取腹腔液(大約0.31ml),滴一滴在載片上,蓋片觀察。),滴一滴在載片上,蓋片觀察。五結果與討論五結果與討論1結果:結果:觀察巨噬細胞吞噬雞紅細胞的過程和現(xiàn)象,觀察巨噬細胞吞噬雞紅細胞的過程和現(xiàn)象,并將各個階段的吞噬細胞繪圖。并將各個階段的吞噬細胞繪圖。2討論:討
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