基因工程高考題2

1、1、(2012全國卷新課標(biāo)版)40.現(xiàn)代生物科技專題(15分)根據(jù)基因工程的有關(guān)知識，回答下列問題：(1)限制性內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段，其末端類型有和。(2)質(zhì)粒運載體用EcoRI切割后產(chǎn)生的片段如下：AATTCOGCTTAA為使運載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRI切割外，還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割，該酶必須具有的特點是。(3)按其來源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即DNA連接酶和DNA連接酶。(4)反轉(zhuǎn)錄作用的模板是,產(chǎn)物是。若要在體外獲得大量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，常采用(5)基因工程中除質(zhì)粒外，和也可作為運載體。(6)若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況

2、下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，原因是。3、(2012福建卷)32.現(xiàn)代生物科技專題肺細(xì)胞中的let-7基因表達減弱，癌基因RAS表達增強，會引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術(shù)將let-7基因?qū)敕伟┘?xì)胞實驗表達，發(fā)現(xiàn)肺癌細(xì)胞的增殖受到抑制。該基因工程技術(shù)基本流程如圖1。請回答:”4基四*7步因陽2(1)進行過程時，需用酶切開載體以插入let-7基因。載體應(yīng)用RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，以驅(qū)動let-7基因轉(zhuǎn)錄，該部位稱為。(2)進行過程時，需用酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細(xì)胞，以利于傳代培養(yǎng)。(3)研究發(fā)現(xiàn)，let-7基因能影響RAS的表達，其影響機理如圖2。據(jù)圖分析，可從細(xì)胞提取

3、進行分子雜交，以直接檢測let-7基因是否轉(zhuǎn)錄。肺癌細(xì)胞增殖受到抑制,可能是由于細(xì)胞中(RASmRNA/RAS蛋白)含量減少引起的。4、(2012天津卷，)(13分)生物分子間的特異性結(jié)合的性質(zhì)廣泛用于生命科學(xué)研究。以下實例為體外處理“蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合體”獲得DNA片段信息的過程圖。據(jù)圖回答：(1)過程酶作用的部位是鍵，此過程只發(fā)生在非結(jié)合區(qū)DNA,過程酶作用的部位是鍵。(2)、兩過程利用了酶的特性。(3)若將得到的DNA片段用于構(gòu)建重組質(zhì)粒，需要過程的測序結(jié)果與酶的識別序列進行對比，已確定選用何種酶。(4)如果復(fù)合體中的蛋白質(zhì)為RNA酶聚合，則其識別、結(jié)合DNA序列位基因的5、(2012江

4、蘇卷)32.圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度(bp即堿基對)和部分堿基序列，圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列?，F(xiàn)有MspI、BamHI、MboI、SmaI4種限制性核酸內(nèi)切酶切割的堿基序列和酶切位點分別為CJCGG、GJGATCC、JGATC、CCCJGGG。請回答下列問題：rIl'i!iIl卬CGGGCCCGGGCCTAGOG!GGCCCGGGCCCIILill疝IL.i534bpJ4-7966弱bpGGATCCCCTAGG(1)圖1的一條脫氧核甘酸鏈中相鄰兩個堿基之間依次由連接。(2)若用限制酶SmaI完全切割圖1中DNA片段，產(chǎn)生的末端是末端，其產(chǎn)物長度為(3)若圖1中

5、虛線方框內(nèi)的堿基對被T-A堿基對替換，那么基因D就突變?yōu)榛騞o從雜合子分離出圖1及其對應(yīng)的DNA片段，用限制酶SmaI完全切割，產(chǎn)物中共有種不同DNA片段。(4)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進行，形成重組質(zhì)粒，那么應(yīng)選用的限制酶是。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后，為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。經(jīng)檢測，部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達，其最可能的原因是。6、(2013新課標(biāo)卷I)40.【生物一一選彳3現(xiàn)代生物科技專題】(15分)閱讀如下材料：材料甲：科學(xué)家將牛生長激素基因?qū)胄∈笫芫言冢玫搅梭w型巨大的超級小鼠”科學(xué)家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化

6、法培育出轉(zhuǎn)基因煙草。材料乙：T4溶菌酶在溫度較高時易失去活性，科學(xué)家又編碼T4溶菌酶的基因進行改造，使其表達的T4溶菌酶的第3位的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼?，在該半胱氨酸與第97為的半胱氨酸之間形成了一個二硫鍵，提高了T4溶菌酶的耐熱性。材料丙：兔甲和兔乙是同一物種的兩個雌性個體，科學(xué)家將兔甲受精卵發(fā)育成的胚胎移植到兔乙的體內(nèi)，成功產(chǎn)出兔甲的后代，證實了同一物種的胚胎可在不同個體的體內(nèi)發(fā)育?；卮鹣铝袉栴}：（1）材料甲屬于基因工程的范疇。將基因表達載體導(dǎo)入小鼠的受精卵中常用法。構(gòu)建基因表達載體常用的工具酶有和。在培育轉(zhuǎn)基因植物是，常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化發(fā)，農(nóng)桿菌的作用是。（2）材料乙屬于工程范疇。該工程是指以

7、分子生物學(xué)相關(guān)理論為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對進行改造，或制造制造一種的技術(shù)。在該實例中，引起T4溶菌酶空間結(jié)構(gòu)改變的原因是組成該酶肽鏈的序列發(fā)生了改變。（3）材料丙屬于胚胎工程的范疇。胚胎移植是指將獲得的早期胚胎移植到種的、生理狀況相同的另一個雌性動物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育成新個體的技術(shù)。在資料丙的實例中，兔甲稱為體，兔乙稱為體。7、（2013北京卷）30.（18分）斑馬魚的酶D由17號染色體上的D基因編碼。具有純合突變基因（dd）的斑馬魚胚胎會發(fā)出紅色熒光。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將綠色熒光蛋白（G）基因整合到斑馬魚17號染色體上，帶有G基因的胚胎能夠發(fā)出綠色熒光。未整合G基因的染色體的對應(yīng)位點表

8、示為go用個體M和N進行如下雜交實驗。親代M（肺胞明無焚光J（肝胎用然色覺沁個體號染色體.上相關(guān)基崗州成代胚后士嫁色熒光紅色熒光無熒光紅，綠變光（1）在上述轉(zhuǎn)基因?qū)嶒炛?，將G基因與質(zhì)粒重組，需要的兩類酶是和。將重組質(zhì)粒顯微注射到斑馬魚中，整合到染色體上的G基因后，使胚胎發(fā)出綠色熒光。（2）根據(jù)上述雜交實驗推測：親代M的基因型是（選填選項前的符號）。a.DDggb.Ddgg子代中只發(fā)出綠色熒光的胚胎基因型包括（選填選項前的符號）。a.DDGGb.DDGgc.DdGGd.DdGg（3）雜交后，出現(xiàn)紅綠熒光（既有紅色又有綠色熒光）胚胎的原因是親代（填"M或"N）的初級精（卵）母細(xì)

9、胞在減數(shù)分裂過程中，同源染色體的發(fā)生了交換，導(dǎo)致染色體上的基因重組。通過記錄子代中紅綠熒光胚胎數(shù)量與胚胎總數(shù)，可計算得到該親本產(chǎn)生的重組配子占其全部配子的比例，算式為。8、（2013廣東卷）28.（16分）地中海貧血癥屬于常染色體遺傳病。一對夫婦生有一位重型3地中海貧血癥患兒，分析發(fā)現(xiàn)，患兒血紅蛋白3鏈第39位氨基酸的編碼序列發(fā)生了突變（C-T）。用PCR擴增包含如圖11（a）。目前患兒母親再次懷孕,該位點白一段DNA片段l,突變序列的擴增片段可用一種限制酶酶切為大小不同的兩個片段m和s；但正常序列的擴增片段不能被該酶酶切，并接受了產(chǎn)前基因診斷。家庭成員及胎兒的PCR擴增產(chǎn)物酶切電泳帶型示意圖

10、見圖11(b)。XXAlTG8CCGC-3A(TGTJ"cFGr4-LR11ati(終止密碼子為UAA、UAG、UGA。)jE.V嗝«*r小，I邦票挾瓶梃一、I*-P，T-TN=-/+4序同轉(zhuǎn)錄假板鞋口一產(chǎn)示PCH5E*圉IIS11(b)'|(1)在獲得單鏈模板的方式上，PCR擴增與體內(nèi)DNA復(fù)制不同，前者通過解開雙鏈，后者通過解開雙鏈。(2)據(jù)圖分析，胎兒的基因型是(基因用A、a表示)?；純夯疾】赡艿脑蚴堑脑忌臣?xì)胞通過過程產(chǎn)生配子時，發(fā)生了基因突變；從基因表達水平分析，其患病是由于。(3)研究者在另一種貧血癥的一位患者3鏈基因中檢測到一個新的突變位點，該突變

11、導(dǎo)致3鏈第102位的天冬酰胺替換為蘇氨酸。如果，但,則為證明該突變位點就是這種貧血癥的致病位點提供了一個有力證據(jù)。9、2014(課標(biāo)H卷)40.生物選修3:現(xiàn)代生物科技專題(15分)植物甲具有極強的耐旱性，其耐旱性與某個基因有關(guān)。若從該植物中獲得該耐旱基因，并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。回答下列問題：(1)理論上，基因組文庫含有生物的基因；而cDNA文庫中含有生物的基因。(2)若要從植物甲中獲得耐旱基因，可首先建立該植物的基因組文庫，再從中出所需的耐旱基因。(3)將耐旱基因?qū)朕r(nóng)桿菌，并通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將其導(dǎo)入植物的體細(xì)胞中，經(jīng)過一系列的過程得到再生植株。要確認(rèn)該耐旱

12、基因是否在再生植株中正確表達，應(yīng)檢測此再生植株中該基因的,如果檢測結(jié)果呈陽性，再在田間試驗中檢測植株的是否得到提高。(4)假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比為3：1時，則可推測該耐旱基因整合到了(填“同源染色體的一條上”或“同源染色體的兩條上”)注：國中限制的的識別序列及切制形成的黏性末端均不相向10、2014(天津卷)8.(12分)嗜熱土壤芽胞桿菌產(chǎn)生的葡萄糖昔酶(Bg舊)是一種耐熱纖維素酶，為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應(yīng)用，開展了以下試驗：4I.利用大腸桿國表達BglB酶(1)PCR擴增bglB基因時，選用基因組DNA作模板。(2)右圖為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜。b

13、glB基因不含圖中限制酶識別序列。為使PCR擴增的bglB基因重組進該質(zhì)粒，擴增的bglB基因兩端需分別引入和不同限制酶的識別序列。(3)大腸桿菌不能降解纖維素，但轉(zhuǎn)入上述建構(gòu)好的表達載體后則獲得了降解纖維素的能力，這是因為。n.溫度對BglB酶活性的影響(4)據(jù)圖1、2可知，80c保溫30分鐘后，BglB酶會;為高效利用BglB酶降解纖維素，反應(yīng)溫度最好控制在(單選)。A.50CB.60CC.70CD.80C溫國CI時坤分梆圖I濕度耐agia院活性的影晦&2b呂陽院的捻隹定性注；曲的熱旗定性是布在一定溫度卜；保溫一段時其活性的度的出.利用分子育種技術(shù)提高BglB酶的熱穩(wěn)定性在PCR擴

14、增bglB基因的過程中，加入誘變劑可提高bglB基因的突變率。經(jīng)過篩選，可獲得能表達出熱穩(wěn)定性高的BglB酶的基因。(5)與用誘變劑直接處理嗜熱土壤芽胞桿菌相比，上述育種技術(shù)獲得熱穩(wěn)定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR過程中(多選)。A.僅針對bglB基因進行誘變B.bglB基因產(chǎn)生了定向突變C.bglB基因可快速累積突變D.bglB基因突變不會導(dǎo)致酶的氨基酸數(shù)目改變11、(2014山東卷)36.(12分)【現(xiàn)代生物科技專題】人組織纖溶酶原激活物(htPA)是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：(1)htPA基因與載體用切割后，通過DNA1接酶連接，

15、以構(gòu)建重組表達載體。檢測目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA可采用技術(shù)。(2)為獲取更多的卵(母)細(xì)胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其采集的精子需要經(jīng)過,才具備受精能力。(3)將重組表達載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是。為了獲得母羊，移植前需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進行。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個轉(zhuǎn)基因個體，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的。(4)若在轉(zhuǎn)ht-PA基因母羊的羊乳中檢測到,說明目的基因成功表達。12、2014(海南卷)31生物一選彳3:現(xiàn)代生物科技專題(15分)下面是將某細(xì)菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)，制備工程菌”的示意圖。請據(jù)圖回答:獲得A有兩條途徑：一是以A的mRNA為模板，在酶的催化

16、下，合成互補的單鏈DNA,然后在作用下合成雙鏈DNA,從而獲得所需基因；二是根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測出相應(yīng)的mRNA序列，然后按照堿基互補配對原則，推測其DNA的序列，再通過化學(xué)方法合成所需基因。利用PCR技術(shù)擴增DNA時，需要在反應(yīng)體系中添加的有機物質(zhì)有、4種脫氧核甘酸三磷酸和耐熱性的DNA聚合酶，擴增過程可以在PCR擴增儀中完成。由A和載體B拼接形成的C通常稱為。在基因工程中，常用Ca2+處理D,其目的是。13、201640.生物一一選修3:現(xiàn)代生物科技專題（15分）圖（a）中的三個DNA片段上以此表示出了EcoRI、BamHI和Sau3AI三種限制性內(nèi)切酶的識別序列與切割位點，圖

17、（b）為某種表達載體示意圖（載體上的EcoRI、Sau3AI的切點是唯一的）。根據(jù)基因工程的有關(guān)知識，回答下列問題：（1）經(jīng)BamHI酶切割得到的目的基因可以與上述表達載體被酶切后的產(chǎn)物連接，理由是。（2）若某人利用圖（b）所示的表達載體獲得了甲、乙、丙三種含有目的基因的重組子，如圖（c）所示。這三種重組子中，不能在宿主細(xì)胞中表達目的基因產(chǎn)物的額,不能表達的原因是。（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。14、201640.【生物生一選修*II塊3:現(xiàn)代生物科技專題】（15分）某一質(zhì)粒載體如圖所示，外源DNA分子插入到Ampr或Tet

18、r中會導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活（Ampr表示氨茉青霉素抗性基因，Tetr表示四環(huán)素抗性基因）。有人將此質(zhì)粒載體用BamHI酶切后，與用BamHI酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進行連接反應(yīng)，用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌。結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化，有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種，分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌。回答下列問題：(1)質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的基本條件有(答出兩點即可)而作為基因表達載體，除滿足上述基本條件外，還需具有啟動子和終止子。(2)如果用含有氨茉青霉素的培養(yǎng)基進行篩選，在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中，未被轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基因的細(xì)胞不能區(qū)分的，其原因是;并且和的細(xì)胞也是不能區(qū)分的，其原因是。在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌單菌落，還需使用含有的固體培養(yǎng)基。(3)基因工程中，某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體，其DNA復(fù)制所需的原料來自15、(2016江蘇卷)33.(9分)下表是幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點，其中切割位點相同的酶不重復(fù)標(biāo)注。請回答下列問題:限制崎咕H1Hfi1Hiifriill浜別序刻及切割f