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文檔簡介
1、第一章原核生物形態(tài)、構(gòu)造與功能一 填空1 荷蘭,列文虎克,單式顯微鏡,細(xì)菌2 法國,巴斯德。德國,科赫3 史前期,初創(chuàng)期,奠基期,發(fā)展期,成熟期4 體積小,面積大;吸收多,轉(zhuǎn)化快;生長旺,繁殖快;適應(yīng)強(qiáng),易變異;分布廣,種類多;5 列文虎克6 營養(yǎng)7 C,H ,O N 8 比面值9蛋白質(zhì)(至少99)。10 裂殖11原核類,真核類,非細(xì)胞類。12 球菌,桿菌,螺旋菌13 2.0×0.5微米14 單球菌,雙球菌,四聯(lián)球菌,八疊球菌,葡萄球菌,鏈球菌。螺菌,螺旋體,弧菌,鏈桿菌,星狀菌,雙桿菌。15 初染,媒染,脫色,復(fù)染。乙醇脫色,紅色,紫色,G-,G+16 肽聚糖,磷壁酸,N-乙酰葡糖
2、胺,N-乙酰胞壁酸,溶菌酶。17 基內(nèi)菌絲,氣生菌絲,孢子絲18 L型細(xì)菌,原生質(zhì)體,球狀體,支原體。19 0.1納米20 油煎蛋21磷壁酸,脂多糖22 100個/ml,3個/L 23 2.0, 0.5 , 2024 陽性,土壤中25 疏水性角蛋白,DPA-Ca26 O-特異側(cè)鏈27 病毒,支原體28 Escherichia, Bacillus subtilis 1.398 29 單菌落,包涵體,噬菌斑30 富爾根,核區(qū)31脫色時間,菌齡,涂片厚度,陽性,紫色32 嗜熱鏈球菌,保加利亞乳桿菌。33 DPA-Ca34 基內(nèi)菌絲,氣生菌絲,孢子絲,分生孢子。35基內(nèi)菌絲,氣生菌絲,孢子絲,分生孢子
3、,孢囊孢子二 選擇: 1B 2A 3A 4B 5A 6A 7C 8A 9A 10B 11C 12C 13C 14B 15D 16B 17B 18C 19B 20A21D 22C23A24A 25B 26A27C28A29C 30D 31B 32C 33B 34B 35D 36C37C 38B 39B 40B41D 42C 43B 44C三、判斷題:1×2×3×4×5×67×8×9×10× 11121314×15× 16× 17× 18× 19×四
4、、名詞解釋(略)五、寫學(xué)名1 Escherichia coli 2 Bacillus subtilis 3 Staphylococcus aureus 4 Streptomyces5 聚-羥丁酸 6 脂多糖 7 Bacillus thuringiensis六簡答題1不同點S. aureus (G+)E. coli (G-)細(xì)胞壁構(gòu)造肽聚糖,無芳香族的和含硫的AA類脂質(zhì),有芳香族的和含硫的AA磷壁酸蛋白質(zhì)肽聚糖單體雙糖單位雙糖單位(N乙酰胞壁酸和N-乙酰葡糖胺通過1,4糖甘鍵連接雙糖單位(同G)肽尾短肽尾由四個AA(L-AlaD-GluL-LysD- Ala)按L型和D型交替排列的方式連接而成的
5、肽尾由3個AA(m-DAP)肽橋-(Gly)5-CO. NH-甲肽尾上的連接點第四AA第四AA乙肽尾上的連接點第三AA第三AA2 細(xì)菌芽孢的特點:有極強(qiáng)的抗熱、抗輻射、抗化學(xué)藥物和抗靜水壓等能力,是細(xì)菌的休眠體。示例:芽孢的有無在細(xì)菌鑒定中是一項重要的形態(tài)學(xué)指標(biāo)。3見P12 表114.革蘭氏染色法是由丹麥的醫(yī)生革蘭(Gram)1884年首創(chuàng)的。步驟:先用草酸銨結(jié)晶紫液染色加碘液細(xì)菌著色乙醇脫色蕃紅(沙黃)復(fù)染。乙醇脫色后,仍保持其初染的紫色 G 乙醇處理后迅速脫去原來的顏色,而染上蕃紅的顏色G原理:與細(xì)菌細(xì)胞壁的化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)、細(xì)胞壁的滲透性等有關(guān),主要是物理作用。染色時,染料一碘復(fù)合物在細(xì)菌
6、細(xì)胞內(nèi)形成。當(dāng)用95乙醇作脫色處理時,一方面能把細(xì)胞壁中的脂類抽提出來,另一方面又使細(xì)胞壁引起脫水作用,使肽聚糖的孔徑變小。由于G的細(xì)胞壁含脂類較多,被乙醇抽提出去后,細(xì)胞壁各層結(jié)構(gòu)變得松弛,又因其肽聚糖含量較少,雖小孔也因脫水作用而縮小,但仍有足夠大小的通道和較大的通透性,這樣就可使染料一碘復(fù)合物能被抽提出來,形成革蘭氏陰性反應(yīng)。反之,G 的細(xì)胞壁含脂類較少,肽聚糖含量高,結(jié)構(gòu)緊密。經(jīng)乙醇脫水后,細(xì)胞壁孔徑大為縮小,通透性明顯地降低,染料一碘復(fù)合物不易被抽提出來,形成革蘭氏陽性反應(yīng)。第二章 真核微生物的形態(tài)構(gòu)造一填空1 酵母纖維素(甘露聚糖+蛋白質(zhì)+葡聚糖)2 菌絲體,子實體3假菌絲4 具核
7、膜,有細(xì)胞器,能進(jìn)行有絲分裂,顯微藻類,原生動物,菌物界5 假根,吸器,菌核,匍匐菌絲,附著胞,子實體6 子囊孢子,分生孢子,節(jié)孢子,厚垣孢子,游動孢子,卵孢子,接合孢子 ,擔(dān)孢子7 線粒體,細(xì)胞膜8 子囊和子囊孢子9 黑曲霉10 蝸牛消化 溶菌酶11 幾丁質(zhì) 葡聚糖 甘露聚糖 肽聚糖12 芽殖13 營養(yǎng)菌絲 氣生菌絲/繁殖菌絲14 毛霉 根霉 曲霉 青霉二、選擇題1 B 2 B 3 B 4 B 5 C6 B 7 C8 C 9 B 10 D11 B 12 C 13 B 14 B 15 A/B16 B 17 C 18 B 19 B 20 C21 C22 C23 C24 C 25 B 26 B 2
8、7 A 28 B 29 D 三、判斷1 2× 3× 4× 5 6×四、名詞解釋1 指那些菌絲體較發(fā)達(dá)又不產(chǎn)生大型肉質(zhì)子實體結(jié)構(gòu)的真菌2 那些能形成大型肉質(zhì)子實體的真菌3 低等真菌匍匐菌絲與固體基質(zhì)接觸處分化出來的根狀結(jié)構(gòu)具有固著和汲取養(yǎng)料的功能4 在其里面或上面可產(chǎn)生無性或有性孢子,有一定形狀和構(gòu)造的任何菌絲體組織5 密布在固體營養(yǎng)基質(zhì)內(nèi)部主要執(zhí)行吸取營養(yǎng)物功能的菌絲體6 伸展到空間的菌絲體7 形成喙?fàn)钔黄鸲?lián)合后兩個細(xì)胞的方式,不斷使雙核細(xì)胞分裂,從而使菌絲尖端不斷向前延伸。8 孢子絲:放線菌的氣生菌絲進(jìn)一步成熟,分化成的結(jié)構(gòu)。9 膨大細(xì)胞的原生質(zhì)分化
9、成許多小塊,每小塊周圍出現(xiàn)一個壁,將細(xì)胞質(zhì)包起來10 某些酵母在繁殖過程中芽體不脫落并相連成藕節(jié)狀的細(xì)胞串11 由于酵母菌的生長與無性繁殖,營養(yǎng)物質(zhì)的大量消耗和代謝產(chǎn)物的積累,酵母菌停止芽殖,此時通過細(xì)胞核的減數(shù)分裂的過程在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生兩種性質(zhì)不同的四個單倍體細(xì)胞13霉菌菌絲不存在隔膜的菌絲14霉菌菌絲存在隔膜的菌絲五1 Saccharomyces cerevisiae2 Schizosaccharomyces octosporus3Candida utilis4 Penicilliun chrysogenum5Aspergillusniger6Aspergillus flavus7 Rhizo
10、pus nigricans8 Neurospora crassa六1 1)根霉:無隔菌絲、它的孢子是孢囊孢子;是接合菌亞門根霉屬。青霉:有隔菌絲、它的孢子是分生孢子;半知菌亞門青霉屬2)根霉:有假根和匍匐菌絲,根霉孢子囊基部有囊托而無囊領(lǐng)。孢子囊是根霉的無性繁殖體,內(nèi)含無數(shù)球形、卵形或不規(guī)則型的孢囊孢子。有性繁殖形成結(jié)合孢子。青霉:菌落有絨狀,絮狀,繩狀和束狀等不同形態(tài)。青霉的菌絲體產(chǎn)生長而直的分生孢子梗。上半部分產(chǎn)生對稱或不對稱的掃帚狀分支,著生幾輪小梗,小梗頂端著生成串的球形至卵形的綠色分生孢子。2 霉菌是絲狀真菌,是菌絲體比較發(fā)達(dá)而又不產(chǎn)生大型子實體的真菌,長出肉眼可見的絲狀、絨狀或蛛網(wǎng)
11、狀的菌絲體。功能:1)工業(yè)應(yīng)用:發(fā)酵生產(chǎn) 2)在食品制造方面:醬油和釀造 3)科學(xué)研究 4)引起工農(nóng)業(yè)產(chǎn)品霉變3 酵母菌的繁殖方式:無性繁殖:芽殖、裂殖、產(chǎn)無性孢子(節(jié)孢子、擲孢子、厚垣孢子)有性繁殖:以形成子囊和子囊孢子的方式進(jìn)行有性繁殖霉菌的繁殖方式:通過特化的氣生菌絲進(jìn)行繁殖。結(jié)構(gòu)簡單的子實體:無性繁殖(分生孢子頭、孢子囊)有性繁殖(擔(dān)子)復(fù)雜的子實體:無性繁殖(分生孢子器、分生孢子座)有性繁殖(閉囊殼、子囊殼、子囊盤)七綜述題菌落特征細(xì)菌酵母菌放線菌霉菌細(xì)胞的結(jié)構(gòu)類別單細(xì)胞微生物單細(xì)胞微生物菌絲狀微生物菌絲狀微生物細(xì)胞壁肽聚糖葡聚糖和甘露聚糖肽聚糖幾丁質(zhì)細(xì)胞膜無甾醇有甾醇無甾醇有甾醇形
12、態(tài)特征小而均勻,個別有芽孢大而分化細(xì)而均勻粗而分化群 體 特 征外觀特點小而突起或大而平坦大而突起小而緊密大而疏松或大而致密菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明不透明菌落顏色多樣單調(diào),一般呈乳汁或礦燭色十分多樣十分多樣菌落正反面顏色差異相同相同一般不同一般不同菌落邊緣一般看不到細(xì)胞可見球狀,卵圓狀或假絲狀細(xì)胞有時可見細(xì)絲狀細(xì)胞可見粗絲狀細(xì)胞繁殖方式二均分裂無性繁殖(芽殖)有性繁殖(子囊孢子)裂殖通過特化的氣生菌絲進(jìn)行繁殖(子實體)第三章 病毒一填空1 溫和噬菌體2烈性噬菌體3 核酸4 類病毒,擬病毒,朊病毒5 核酸,蛋白質(zhì)外殼,不敏感,敏感6 潛伏期,裂解期,平穩(wěn)期7 寄生,宿主細(xì)胞,吸附,侵入
13、,增殖,裝配,釋放8 游離態(tài),整合態(tài),營養(yǎng)態(tài)9 注射 內(nèi)吞作用 與蛋白膜融合 移位10 雙層平板法 電鏡直接計數(shù)法 光電比濁計數(shù)法免疫沉淀法等 11 朊病毒12 dsDNA13 類 擬病毒 朊14 5×109 (題中106應(yīng)為106)15 吸附 侵入 增殖 裝配 釋放二選擇題1 C2A3 C 4 B 5C6C7C 8B 9 B 10D三、判斷題1× 2 3 4四、名詞解釋(略)五:簡答題1 病毒的特征: (1)形體及其微小,一般都能通過細(xì)菌濾器;沒有細(xì)胞構(gòu)造,其主要成分僅為核酸和蛋白質(zhì);每一種病毒只含一種核酸,不是DNA 就是RNA,既無產(chǎn)能酶系也無蛋白質(zhì)和核酸合成酶系;以
14、核酸和蛋白質(zhì)等元件的裝配實現(xiàn)其大量的繁殖;在離體條件下,能以無生命的生物大分子存在,并可長期保存其侵染活力;對一般抗生素不敏感,但對于干擾素敏感;有些病毒的核酸不能整合到宿主的基因組中,并誘發(fā)潛伏性感染。2 噬菌體效價:每毫升試樣所含的具侵染性的噬菌體的粒子數(shù)。 方法: 1 雙層平板法:預(yù)先分別配制含2和1的瓊脂的底層培養(yǎng)基和上層培養(yǎng)基。先用底層培養(yǎng)基在培養(yǎng)皿上澆一層平板,待冷凝后再把預(yù)先融化并冷卻到45以下,加有較濃的敏感宿主和一定代測噬菌體樣品的上層培養(yǎng)基,再試管中搖抣后,立即倒在底層培養(yǎng)基上鋪平待凝,然后,在37下保溫,一般在10多個小時后對噬菌體進(jìn)行計數(shù)。 2 電鏡直接計數(shù)法。 3 分
15、光光度法3 答 : 當(dāng)噬菌體與其相適應(yīng)的特異宿主在水環(huán)境中發(fā)生偶然的碰撞后,如果尾絲間斷于宿主細(xì)胞表面的特異性受體,見教材P69六、綜述題1見教材P79 2、細(xì)菌酵母菌病毒形態(tài)球形桿形螺旋形,弧菌通常有球狀卵圓狀橢圓狀柱狀和香腸狀群體形態(tài):包涵體,噬菌斑螺旋對稱二十面體對稱復(fù)合對稱結(jié)構(gòu)細(xì)胞壁以單細(xì)胞狀態(tài)存在細(xì)胞壁:甘露聚糖葡聚糖細(xì)胞膜:甾醇病毒?;境煞质呛怂岷偷鞍踪|(zhì)大小0.55微米2.510×4.521微米很小,20200納米繁殖方式裂殖,芽殖多數(shù)營出芽繁殖有性繁殖:子囊孢子,囊孢子吸附 ,侵入 ,增殖 ,成熟,釋放生活條件水生性較強(qiáng)pH為7.08.0常生活在含糖較高酸度較大的水生
16、環(huán)境pH 為3.86.0在宿主體內(nèi),一般對抗生素不敏感對干擾素敏感3、 微生物的繁殖方式 無性繁殖:裂殖(細(xì)菌),芽殖(酵母),借孢子、借菌絲繁殖(放線菌),產(chǎn)無性孢子(節(jié)孢子、擲孢子、厚垣孢子)繁殖(酵母) 有性繁殖:產(chǎn)子囊孢子繁殖(酵母菌), 菌絲體特化形式(營養(yǎng)菌絲和氣生菌絲)繁殖(霉菌) 噬菌體的繁殖:吸附 侵入 增殖 成熟 裂解 第四章 微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基一填空1碳源氮源能源生長因子無機(jī)鹽水2提供能量提供碳源糖復(fù)雜蛋白質(zhì)脂類二氧化碳 NaHCO3 3 蛋白質(zhì) 尿素 核酸 銨鹽 硝酸鹽,C.H.O.N AA異養(yǎng)微生物 N.H或N.O AA自養(yǎng)微生物4 選擇性培養(yǎng)基 鑒別性培養(yǎng)基 基礎(chǔ)
17、培養(yǎng)基 加富培養(yǎng)基5 光能自養(yǎng)型 光能異養(yǎng)型 化能自養(yǎng)型 化能異養(yǎng)型6 維生素 堿基 卟啉 調(diào)節(jié)代謝產(chǎn)物 參與酶和核酸的合成 維持正常代謝7 目的明確 營養(yǎng)協(xié)調(diào) 理化適宜 經(jīng)濟(jì)節(jié)約8 調(diào)節(jié)pH值,使pH值穩(wěn)定9 單純擴(kuò)散 促進(jìn)擴(kuò)散 主動運輸 基團(tuán)轉(zhuǎn)位10 牛肉膏 蛋白質(zhì) 硝酸鹽 銨鹽 尿素 11 鞭毛12 培養(yǎng)基 13 加壓蒸氣滅菌14 麥芽汁培養(yǎng)基15 澆注平板 涂布平板16 藍(lán)黑色金屬光澤17 生長因子自養(yǎng)型微生物 生長因子異養(yǎng)型微生物 生長因子過量合成微生物二選擇題1 A2A 3D 4D 5D 6D 7B 8C9A 10D11A12C13A14C 15B 16C 17D 18C 19B
18、20A 21D 22B 23C 24D三、判斷題1× 2× 3× 4 5 6四、名詞解釋(略)五、簡答題1、培養(yǎng)基:是指由人工配制德,適合微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物作用的混合型養(yǎng)料。(1) 按對培養(yǎng)基成分的了解做分類:天然培養(yǎng)基:指一類利用動植物或微生物包括其提取物制成的培養(yǎng)基,這是一類營養(yǎng)成分既復(fù)雜又豐富,又難以說出其確切化學(xué)成分的培養(yǎng)基。組合培養(yǎng)基:是一類按微生物的營養(yǎng)要求精確設(shè)計后用多種高純化學(xué)試劑配制成的培養(yǎng)基。半組合培養(yǎng)基:指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。(2) 按培養(yǎng)基外觀的物理狀態(tài)做分類液體培養(yǎng)基:一類呈液體的培養(yǎng)基
19、,在實驗室和生產(chǎn)實踐中應(yīng)用廣泛,尤其適用于大規(guī)模的培養(yǎng)微生物。固體培養(yǎng)基:一類外觀呈固體狀態(tài)的培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基:指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固態(tài)的培養(yǎng)基。脫水培養(yǎng)基:含有除水以外的一切成分的商品培養(yǎng)基,使用時只要加入適量水并加以滅菌即可,是一類既成分精確又使用方便的現(xiàn)代化培養(yǎng)基。(3) 按培養(yǎng)基對微生物的功能做分類:選擇性培養(yǎng)基:根據(jù)某微生物的特殊營養(yǎng)要求或?qū)δ撤N化學(xué)物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基。 加富培養(yǎng)基:在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營養(yǎng)物質(zhì)制成的一類營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基。2、細(xì)胞膜運送營養(yǎng)物質(zhì)的四種方式(1) 單純擴(kuò)散:又稱被動運送,指疏水性雙分子層細(xì)胞膜,在無載體蛋白的參與
20、下,單詞依靠物理擴(kuò)散方式讓許多小分子非電離分子尤其是親水性分子的被動通過的一種物質(zhì)運送方式。(2) 促進(jìn)擴(kuò)散:指運質(zhì)在運送過程中,必須借助存在于細(xì)胞膜上的底物特異載體蛋白底協(xié)助但不耗能底一類物質(zhì)擴(kuò)散運送方式。(3) 基團(tuán)移位:指一類既需特異載體蛋白的參與,又需耗能的一種物質(zhì)運送方式。物質(zhì)在運送前后還會發(fā)生分子結(jié)構(gòu)的變化。3 營養(yǎng)類型能源氫供體基本碳源實例光能無機(jī)營養(yǎng)型(光能自養(yǎng)型)光無機(jī)物二氧化碳藍(lán)細(xì)菌,紫硫細(xì)菌,綠硫細(xì)菌,藻類光能有機(jī)營養(yǎng)型(光能自養(yǎng)型)光有機(jī)物二氧化碳及簡單有機(jī)物紅螺菌科的細(xì)菌光能無機(jī)營養(yǎng)型(化能自養(yǎng)型)無機(jī)物無機(jī)物二氧化碳硝化細(xì)菌,硫化細(xì)菌,鐵細(xì)菌光能無機(jī)營養(yǎng)型(光能異養(yǎng)
21、型)無機(jī)物有機(jī)物有機(jī)物絕大多數(shù)細(xì)菌和全部真核微生物4擴(kuò)散促進(jìn)擴(kuò)散主動運輸代謝能不需要不需要需要逆濃度運輸不能不能能載體蛋白不需要需要需要選擇性無高度的立體專一性高度的立體專一性六綜述題:1 培養(yǎng)基的原則和方法: 四個原則:(1) 目的明確:根據(jù)不同的工作目的,運用自己豐富的生物化學(xué)和微生物學(xué)知識,可為提出最佳實驗方案打下良好的基礎(chǔ)。(2) 營養(yǎng)協(xié)調(diào):對微生物細(xì)胞組成元素的調(diào)查或分析,是設(shè)計培養(yǎng)基時的重要參考依據(jù)。(3) 理化適宜:指培養(yǎng)基的PH值,滲透壓,水活度和氧化還原時等物理化學(xué)條件較為適宜。(4) 經(jīng)濟(jì)節(jié)約:以粗代精,以野代家,以廢代好,以簡到繁,以纖代糖,以烴代糖,以國代進(jìn)4種方法:(
22、1) 生態(tài)模擬:在自然條件下,具有某種微生物的大量繁殖的環(huán)境,必存在著該微生物所必須的,營養(yǎng)等其他條件。(2) 參閱文獻(xiàn):任何科技工作者決不能事事都靠直接經(jīng)驗,多查閱分析和利用文獻(xiàn)資料上一切對自己研究對象直接或間接有關(guān)的信息,對設(shè)計新培養(yǎng)基有著重要的參考價值。(3) 精心設(shè)計:在設(shè)計時,試驗新配方時,常常對多種影子進(jìn)行比較和試驗,工作量較大。(4) 實驗比較:試驗的規(guī)模一般都按照由定性到定量,由小到大。由實驗室到工廠逐步擴(kuò)大的原則。2 pH值對微生物的影響pH能影響細(xì)胞膜上的電荷,從而影響營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。pH值能影響代謝過程中酶的活性,從而影響微生物的生命活動。微生物的生命活動會引起環(huán)境pH
23、改變。它們將糖類發(fā)酵形成有機(jī)酸,將脂肪水解成有機(jī)酸,選擇性吸收無機(jī)鹽的正電部分,則會引起培養(yǎng)基pH下降;而蛋白質(zhì)的脫羧反應(yīng)形成胺類,選擇性吸收無機(jī)鹽的酸根,都會引起pH上升。 治標(biāo)的方法是通過加酸或堿進(jìn)行中和反應(yīng)。治本的方法有,過酸時,加適量的氮源,提高發(fā)酵的通氣量;過堿時,適當(dāng)增加碳源,降低通氣量。第五章 微生物的新陳代謝一、 填空1、青霉素; 2、化能異養(yǎng); 3、化能自養(yǎng); 4、抗生素; 5、有氧呼吸,無氧呼吸,發(fā)酵; 6、題目有錯:2丙酮酸和1ATP、1NADH+H+、1NADPH+H+;7、EMP、乳酸、HMP、乳酸、乙醇、CO2;8、同型乳酸發(fā)酵、異型乳酸發(fā)酵經(jīng)典途徑、異型乳酸發(fā)酵雙
24、歧桿菌途徑;9、單純擴(kuò)散、促進(jìn)擴(kuò)散、主動運輸、基團(tuán)移位;10、生物小分子、能量、還原力;11、運動發(fā)酵單胞菌(或嗜糖假單胞菌);12、電子受體、ATP、ATP二、 選擇題ABDDD BDDC三、 判斷題1、錯;2、錯;3、對;4、錯;5、對;6、對四、名詞解釋1、 發(fā)酵:在無氧等外源氫受體的條件下,底物脫氫后所產(chǎn)生的還原力H未經(jīng)呼吸鏈傳遞而直接交給某一內(nèi)源性中間代謝物接受,以實現(xiàn)底物水平磷酸化產(chǎn)能的一類生物氧化反應(yīng)。2、 Stickland:以一種氨基酸作底物脫氫而以另一種氨基酸作氫受體而實現(xiàn)生物氧化產(chǎn)能的獨特發(fā)酵類型。3、 硝化作用:氨態(tài)氮經(jīng)硝化細(xì)菌的氧化,轉(zhuǎn)變?yōu)橄跛釕B(tài)氮的過程。4、 反硝化
25、作用:又稱脫氮作用,指硝酸鹽轉(zhuǎn)化為氣態(tài)氮化物的作用。5、 光能自養(yǎng)微生物:6、 化能異養(yǎng)微生物:7、 同型乳酸發(fā)酵:通過EMP途徑,葡萄糖經(jīng)發(fā)酵后只產(chǎn)生2分子乳酸的微生物代謝方式。8、 異型乳酸發(fā)酵:葡萄糖經(jīng)發(fā)酵后除產(chǎn)生乳酸外,還產(chǎn)生乙醇、乙酸和CO2等多種產(chǎn)物的微生物代謝方式。9、 厭氧呼吸:一類呼吸鏈末端的氫受體為外源無機(jī)氧化物(少數(shù)為無機(jī)氧化物)的生物氧化方式。10、生物固氮:指大氣中的分子氮通過微生物固氮酶的催化而還原成氨的過程。11、次生代謝產(chǎn)物:某些微生物生長到穩(wěn)定期后,以結(jié)構(gòu)簡單、代謝途徑明確、產(chǎn)量較大的初生代謝物作前體,通過復(fù)雜的次生代謝途徑所合成的各種結(jié)構(gòu)復(fù)雜的化合物。五、寫
26、出微生物的學(xué)名1、 蘇云金桿菌:Bacillus thuringiensis2、 枯草桿菌:Bacillus subtilis3、 灰色鏈霉菌:Streptomyces griseus4、 熱帶假絲酵母:Candida tropicalis5、 粗糙脈孢霉:Neurospora crassa六、簡答題1、 比較微生物營養(yǎng)類型異同:答:人們根據(jù)微生物所能利用的能源和碳源的性質(zhì)可以將微生物分為四大營養(yǎng)類型:1) 光能自養(yǎng)型微生物:它們具有光合色素,既能通過光合磷酸化作用產(chǎn)生ATP,又能以還原性無機(jī)化合物(如H2S,Na2SO3等)為供氫體,還原CO2而合成細(xì)胞物質(zhì)。2) 光能異養(yǎng)型微生物:它們像光
27、能自養(yǎng)型微生物一樣能夠利用光能,但必須以外源有機(jī)化合物作為主要碳源和供氫體。3) 化能自養(yǎng)型微生物:它們能利用無機(jī)化合物(如NH3、NO2-、H2、H2S、S、SO3-、Fe+等)氧化時釋放的能量,把主要碳源CO2中的碳還原成細(xì)胞有機(jī)物碳架中的碳。4) 化能異養(yǎng)型微生物:它們以有機(jī)化合物為碳源,利用有機(jī)化合物氧化過程中氧化磷酸化提供的ATP而生長。這類微生物的特點是其能源與碳源往往分不開,同一種有機(jī)化合物的代謝即可供給能量,也可以供給碳架物質(zhì)。2、 為什么要選用高絲氨酸營養(yǎng)缺陷型作為賴氨酸生產(chǎn)菌株?答:在此代謝途徑中,原料天冬氨酸通過分支代謝途徑合成賴氨酸、蘇氨酸和甲硫氨酸。其中賴氨酸是人類和
28、動物的必需氨基酸,但在正常的代謝過程中,由于賴氨酸對天冬氨酸激酶(AK)有反饋抑制作用,并且有分支代謝途徑的存在,細(xì)胞中的賴氨酸濃度較低。高絲氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株不能合成高絲氨酸脫氫酶,代謝分支途徑中斷。在補給適量高絲氨酸的條件下,細(xì)胞內(nèi)就能積累大量的賴氨酸。3、 什么是微生物的次生代謝產(chǎn)物?寫出其中三種的名稱。某些微生物生長到穩(wěn)定期后,以結(jié)構(gòu)簡單、代謝途徑明確、產(chǎn)量較大的初生代謝物作前體,通過復(fù)雜的次生代謝途徑所合成的各種結(jié)構(gòu)復(fù)雜的化合物。如抗生素、毒素、生物堿、信息素等。七、綜述題1、 舉例說明代謝調(diào)控在發(fā)酵工業(yè)中的應(yīng)用(舉一例即可):答:代謝調(diào)控是指在代謝途徑水平上對酶活性和酶合成的調(diào)節(jié),
29、目的是使微生物積累更多的為人類所需的有益代謝產(chǎn)物。代謝調(diào)控在發(fā)酵工業(yè)上應(yīng)用主要有:1) 應(yīng)用營養(yǎng)缺陷型菌株解除正常的反饋調(diào)節(jié)。比如賴氨酸發(fā)酵:許多微生物可用天冬氨酸作原料,通過分支代謝途徑合成賴氨酸、蘇氨酸和甲硫氨酸。其中賴氨酸是人類和動物的必需氨基酸,但在正常的代謝過程中,由于反饋抑制作用和分支代謝途徑的存在,細(xì)胞中的賴氨酸濃度較低。高絲氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株不能合成高絲氨酸脫氫酶,代謝分支途徑中斷。在補給適量高絲氨酸的條件下,菌體就能合成大量的賴氨酸。2) 應(yīng)用抗反饋調(diào)節(jié)的突變株解除反饋調(diào)節(jié)。如黃色短桿菌的抗-氨基-羥基戊酸(AHV)菌株能積累蘇氨酸,就是抗性突變株的高絲氨酸脫氫酶已不再受蘇氨
30、酸的反饋抑制,從而可使發(fā)酵液中的蘇氨酸大量積累。3) 生物素的多少影響細(xì)胞膜的形成。在谷氨酸發(fā)酵生產(chǎn)中,控制生物素的濃度在亞適量,細(xì)胞膜的透性增加,細(xì)胞就能及時地將谷氨酸分泌出來,降低了谷氨酸的反饋抑制,從而提高了產(chǎn)量。 另外,油酸也是細(xì)胞膜形成的必須脂肪酸,油酸缺陷型的菌株自己不能合成油酸導(dǎo)致細(xì)胞膜發(fā)生滲漏,故在培養(yǎng)基中限量添加油酸,即可提高谷氨酸的產(chǎn)量。第六章 微生物的生長及控制一、 填空1 研究細(xì)菌遺傳、代謝性常采用 指數(shù)生長期 時期的細(xì)胞。2 用物理或化學(xué)方法殺死物品上大部分微生物的過程稱 消毒 3 防腐 是采用一定方法阻止或抑制微生物生長,防止物品腐壞。4 干熱滅菌的溫度 16017
31、0、時間 2h 。5 影響微生物代時的主要因素有菌種、營養(yǎng)成分、營養(yǎng)物濃度和培養(yǎng)溫度。6 影響微生物生長的主要因素有溫度、ph、營養(yǎng)、O2 和水活度等。7 實驗室常見的干熱滅菌手段有 烘箱內(nèi)熱空氣滅菌和 火焰灼燒;而對牛奶其他液態(tài)食品一般采用巴氏滅菌,其溫度為6065,時間為30min。8 通常,放線菌最適ph范圍為7.58.5,酵母菌的最適ph范圍為3.86.0,霉菌的最適ph范圍為4.05.8。9 一條典型的生長曲線至少可分為延滯期、對數(shù)生長期、穩(wěn)定期和衰亡期四個生長時期。10試列出幾種常用的消毒劑如苯酚、新潔爾滅、次氯酸和福而馬林等。11抗生素的作用機(jī)理有抑制DNA復(fù)制、抑制蛋白質(zhì)合成、
32、抑制RNA轉(zhuǎn)錄和抑制細(xì)胞壁的合成。12 獲得純培養(yǎng)的方法有:劃線分離、平板涂布、顯微鏡直接挑取和澆注平板法等方法。13 抗代謝藥物中的磺胺類是由于與對氨基苯甲酸相似,從而競爭性與二氫葉酸合成酶結(jié)合,使不能合成二氫葉酸。14 常用530%的鹽漬腌魚、肉,可久貯不變質(zhì)的原因是高滲使細(xì)胞失水死亡。15 厭氧菌因為缺乏SOD,故易被O2毒害致死。16 實驗室活菌記數(shù)常采用菌落法、特殊染色法,總菌數(shù)記數(shù)常采用顯微鏡直接記數(shù)板法。17 干熱滅菌時必須在160下維持2h時間才能達(dá)到徹底滅菌,一般根據(jù)是否能殺死芽孢制定滅菌條件的。18 一般可通過機(jī)械篩選和環(huán)境條件誘導(dǎo)兩類方法獲得微生物的同步生長。19 A.F
33、leming 等發(fā)現(xiàn)了一種廣泛存在于卵清、人的淚液等的一種酶溶菌酶,它能在水解細(xì)菌的細(xì)胞壁,水解為點是-1.4糖苷鍵。20 根據(jù)微生物生長與氧的關(guān)系,可以分為好氧微生物、厭癢微生物,兼性厭癢微生物三大類型。黃曲霉屬于好氧微生物,啤酒酵母屬于兼性厭氧微生物,肉毒梭狀芽孢桿菌屬于厭氧微生物。21 腌制和糖汁保藏食品的原理是通過高滲透壓以抑制微生物的生長。22 連續(xù)培養(yǎng)的一個重要特征是使微生物的生長速率和生長狀態(tài)處于某種穩(wěn)定狀態(tài)。連續(xù)培養(yǎng)的方法可分為兩類,即恒化率法和恒濁法。23 若以生長因子來劃分微生物的營養(yǎng)類型,可把他們分為生長因子自氧型和生長因子異氧型或生長因子過量合成型。24 活菌記數(shù)可用菌
34、落法和特殊染色法兩種方法來間接記繁殖數(shù)。25 細(xì)菌產(chǎn)生抗藥性的三條途徑上一基因突變、遺傳重組、質(zhì)粒轉(zhuǎn)移。26 在青霉素直用前治療細(xì)菌性傳染病的最有效的化學(xué)治療劑磺胺。27 嗜冷菌適宜的生長溫度是20以下,嗜冷菌適宜的生長溫度是2045,嗜熱菌適宜的生長溫度是45以上。二、 選擇題:1.D 2.B 3.A 4.A 5.B 6C 7.C 8.A 9.A 10.B 11.C 12.B 13.A 14.A 15.D 16.ABC 17.B 18.D 19.D 20.B 21.C 22.A 23.C 24.D 25.B 26.A 27.ABC 28.C 29.BC 30.B 31.B 三、 判斷題1.
35、錯2.錯3.錯4.錯5.對6.錯7.錯8.錯9.錯10.對11. 錯.12錯13.錯14.對15.對16.錯17.錯四、 名詞解釋1 防腐:利用某種理化因素完全抑制霉腐微生物的生長繁殖,即通過制菌作用防止食品,生物制品等發(fā)生霉腐的措施。2 化療:利用具有高度選擇堵力即對病原菌局高度毒力而對宿主基本無毒的化學(xué)物質(zhì)來抑制宿主體內(nèi)病原微生物的生長繁殖,借以達(dá)到治療該宿主傳染病的一種措施。3 碳酸系數(shù):指在一定時間內(nèi),被試藥劑能殺死全部供試菌的最高稀釋度與達(dá)到同效的碳酸的最高稀釋度之比。4 致死溫度:在一定時間內(nèi),殺死某微生物的水懸浮液群體所需的最低溫度。5 滅菌:采用強(qiáng)烈的理化因素使任何物體內(nèi)外部的
36、一切微生物永遠(yuǎn)喪失其生長繁殖能力的措施。6 消毒:一種采用較溫和的理化因素,僅殺死物體或內(nèi)部一部分對人體或動植物有害的病原菌,而對被消毒的對象基本無害的措施。7 抗生素:一類由微生物或其他生命活動過程中合成的次生代謝產(chǎn)物或人工衍生物。8 巴氏消毒法:是一種專用于牛奶.啤酒.果酒或醬油等不宜進(jìn)行高溫滅菌的液態(tài)風(fēng)味食品調(diào)料的低溫消毒方法9 同步生長:通過同步培養(yǎng)的手段而使細(xì)胞群體中各個個體處于分裂步調(diào)一致的生長狀態(tài)五、 簡答1 濕熱滅菌比干熱滅菌效率高的原因答:濕熱蒸汽不但透射力強(qiáng),而且還能破壞維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性的氫氮,從而加速這一重要生命大分子物質(zhì)的變性。2 指出下列物品滅菌或消毒的方法
37、及條件:培養(yǎng)皿:石蕊牛奶培養(yǎng)基 飲用水 種子 皮膚 無菌間答:培養(yǎng)皿:121,30mim,高溫干熱滅菌 石蕊牛奶培養(yǎng)基:135150,515s,高溫間歇滅菌 飲用水:100下煮沸數(shù)分鐘 種子:0.1%KmnO4表面消毒劑 皮膚:70%25%的乙醇無菌間:用物理方法:如紫外線或510ml/m3醋酸(熏蒸)3 寫出兩種活菌體生長量的測定方法名稱及其基本操作過程答:(1)稱干重法:將樣品放在已知重量的平皿或燒杯內(nèi),于105烘干至恒重,取出放入干燥器內(nèi)冷卻,再稱量,求出M干重。 (2)測含N量法:從一定的樣品中分離出細(xì)胞,洗染后,按凱氏定N法,測出總N量,蛋白質(zhì)含量為16%,細(xì)菌蛋白質(zhì)含量占細(xì)菌固形物
38、的50%80%,一般以65%為代表。 蛋白質(zhì)總量 = 含N量 * 62.5 細(xì)胞總量 = 蛋白質(zhì)總量/(50%80%或(65%)=蛋白質(zhì)*1.544. pH對微生物生命活動的影響是通過以下幾方面實現(xiàn)的: 實驗教材P108。5微生物產(chǎn)生耐藥性的途徑有哪些?答:基因突變 遺傳重組 質(zhì)粒轉(zhuǎn)移6看圖分析五類對氧關(guān)系不同的微生物在半固體瓊脂柱的生長狀態(tài)答:(1)好氧菌聚體在半固體瓊脂柱的表面 (2)兼性厭氧菌在半固體瓊脂柱中都有分布,但表面聚體的要比其他部分多一些 (3)微好氧菌聚體在半固體瓊脂柱表面到1/2處的中間部分 (4)耐氧菌在半固體瓊脂柱中均勻分布 (5)厭氧菌聚集在半固體瓊脂柱的底部六綜述題
39、1 試?yán)L圖并說明單細(xì)胞微生物的生長曲線,并指明各期特點,及如何利用微生物的生長規(guī)律來指導(dǎo)工業(yè)生產(chǎn)答:(1)圖略。(2)延滯期:生長速率常數(shù)為零細(xì)胞形態(tài)變大或增長細(xì)胞內(nèi)的RNA尤其是rRNA含量增高,原生質(zhì)呈嗜堿性合成代謝十分活躍,核糖體、酶類和ATP的合成加速,易產(chǎn)生各種誘導(dǎo)酶對外解不良條件如 NaCl溶液濃度、溫度和抗生素等理化因數(shù)及反應(yīng)敏感 指數(shù)期:生長速率常數(shù)R最大,代時最短細(xì)胞進(jìn)行平衡生長酶系活躍,代謝旺盛 細(xì)胞對理化因素較敏感 穩(wěn)定期:生長速率常數(shù)R等于零開始合成次生代謝物菌體產(chǎn)量達(dá)到最高點,菌體產(chǎn)量與營養(yǎng)物質(zhì)的消耗間呈現(xiàn)出有規(guī)律的比例關(guān)系芽孢桿菌開始形成芽孢細(xì)胞內(nèi)開始積累糖原,異染
40、顆粒和脂肪等內(nèi)含物 衰亡期:群體呈現(xiàn)負(fù)生長狀態(tài)細(xì)胞發(fā)生多樣化 芽孢桿菌釋放芽孢有的微生物進(jìn)一步合成或釋放對人類有益的抗生素等次生代謝物有的微生物發(fā)生自溶指導(dǎo)工業(yè)生產(chǎn):發(fā)酵工業(yè)中要盡量縮短延滯期,一般使用對數(shù)期的菌種;要盡量延長對數(shù)期,采用連續(xù)發(fā)酵以保持較高的菌體密度,采取有效措施盡量使有害微生物不能進(jìn)入對數(shù)期;以收獲產(chǎn)物為目的的,要盡量延長穩(wěn)定期,此時是產(chǎn)物的最佳收獲期。要盡量延緩衰亡期的到來,以防止產(chǎn)物消耗。2. 大腸桿菌在37的牛奶中每12.5分繁殖一代,假設(shè)牛奶消毒后,大腸桿菌的含量為1個/100ml,請問按國家標(biāo)準(zhǔn)(30000個/ ml),該消毒牛奶在37下最多可存放多長時間?解: t
41、=3.322*(lg3×104-lg10-2)×12.5/604.5(小時)3. 某純培養(yǎng)細(xì)菌接種時間的含菌量為30000個/ml,2小時后進(jìn)入指數(shù)生長,再過8小時發(fā)酵液含菌量為40000個/ml,求其代時。解:G=8/(lg40000-lg30000)*3.322=0.39h4. 試說明罐藏、鹽漬、干制保藏食品的微生物學(xué)原理答:罐藏是對微生物生長時對氧加以控制,對專性好氧菌、兼性厭氧菌、以及為耗氧菌生長起抑制作用。 鹽漬是指讓微生物處在高滲壓狀態(tài)下,使細(xì)胞脫水,發(fā)生質(zhì)壁分離,從而抑制微生物生長。 干制保藏:讓細(xì)胞失水,讓微生物缺乏生長的水環(huán)境而不能生存。5. 在微生物生長
42、、代謝過程中會產(chǎn)生引起培養(yǎng)PH改變的代謝產(chǎn)物。如糖類發(fā)酵氧化、脂類水解產(chǎn)生有機(jī)酸,硫酸胺的氨離子優(yōu)先吸收生成硫酸等均會使培養(yǎng)基變酸,PH降低,而蛋白質(zhì)脫羧成胺類,硝酸鈉的硝酸根離子選擇吸收產(chǎn)氫氧化鈉等使培養(yǎng)基變堿PH升高。保證PH較穩(wěn)定的方法如下:A 在配置培養(yǎng)基時利用PH的內(nèi)源調(diào)節(jié)如借磷酸緩沖液進(jìn)行調(diào)節(jié),以碳酸鈣作備用堿進(jìn)行調(diào)節(jié);B在發(fā)酵或者培養(yǎng)過程中利用PH的外源調(diào)節(jié),即按需不斷從外界流加酸或堿,以調(diào)整培養(yǎng)液的PH,具體措施見教材P166的表解PH調(diào)節(jié)。6. 用來測定細(xì)菌生長量的直接計數(shù)法和間接計數(shù)法包含哪些具體的方法,并從實際應(yīng)用、使用的局限性三方面加以具體分析答:直接計數(shù)法:特定的細(xì)菌
43、計數(shù)板或細(xì)胞計數(shù)板 優(yōu)點:直觀、便捷、操作簡單 缺點:不能區(qū)分死菌活菌 應(yīng)用:用于酵母、細(xì)菌、霉菌孢子等懸浮液的計數(shù) 間接計數(shù)法:平板菌落計數(shù)法優(yōu)點:可以獲得活菌的信息缺點:操作較繁,結(jié)果需要培養(yǎng)一段時間才能取得,而且測定結(jié)果易受多種因素的影響。 應(yīng)用:被廣泛用于生物制品檢驗,以及食品、飲料和水(包括水源水)等的含菌支書或污染程度的檢測。厭氧菌的菌落計數(shù)法 亨蓋特滾管培養(yǎng)法:設(shè)備較復(fù)雜,技術(shù)難度很高,各環(huán)節(jié)能達(dá)到嚴(yán)格驅(qū)氧。 半固體深層瓊脂:兼有省工、省料、省設(shè)備和菌落易辨認(rèn)等優(yōu)點。簡便快速的測定雙歧桿菌和乳酸菌等厭氧菌活菌數(shù)。 第七章 遺傳變異和育種一、 填空:1、孢子 2、缺陷噬菌體 3、-
44、1964、轉(zhuǎn)座子 5、有性、準(zhǔn)性 6、紫外線 亞硝基胍7、缺失、添加、易位、倒位8、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合、原生質(zhì)體融合、有性雜交、準(zhǔn)性雜交9、遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)、轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)譯10、移碼11、高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)、低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)12、誘變劑處理、淘汰野生型、檢出缺陷型、鑒定缺陷型13、嘧啶二聚體14、經(jīng)典轉(zhuǎn)化實驗、噬菌體感染實驗、植物病毒的重建實驗15、變量試驗、涂布試驗、影印平板培養(yǎng)法二、選擇題 BCDC三、判斷題 對對錯對對對四、名詞解釋1、準(zhǔn)性生殖:在自然條件下,真核微生物體細(xì)胞間的一種自發(fā)性的原生質(zhì)體融合現(xiàn)象。2、流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo):經(jīng)轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體的媒介而獲得了供體菌DNA片段的受體菌,如果這段外源DNA在其內(nèi)既不進(jìn)行交換、整合
45、和復(fù)制,也不迅速消失,而僅表現(xiàn)穩(wěn)定的轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)譯和性狀表達(dá),這一現(xiàn)象就稱流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)。3、野生型與原養(yǎng)型菌株:野生型指從自然界分離到的任何微生物在其發(fā)生人為營養(yǎng)缺陷突變前的原始菌株,在相應(yīng)的基本培養(yǎng)基上能生長。原養(yǎng)型指營養(yǎng)缺陷型突變株經(jīng)回復(fù)突變或重組后產(chǎn)生的菌株,其營養(yǎng)要求在表型上與野生型相同,遺傳型均用A+B+表示。4、感受態(tài):指受體細(xì)胞最容易接受外源DNA片段并能實現(xiàn)轉(zhuǎn)化的一種生理狀態(tài)。5、轉(zhuǎn)化子:受體菌直接吸收供體菌的DNA片段而形成的雜種后代,稱轉(zhuǎn)化子。6、溫度敏感突變株:是一類典型的條件致死突變株。指突變使某些菌株的重要蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變,以致會在某特定溫度下具有功能,而在另一溫度(
46、一般為較高溫度)下則無功能。7、抗性突變株:指野生型菌株因發(fā)生基因突變,而產(chǎn)生的對某化學(xué)藥物或致死物因子的抗性變異型。8、Hfr菌株:即高頻重組菌株,指F質(zhì)粒整合到染色體上的菌株。9、質(zhì)粒:原核生物的質(zhì)粒指游離于原核生物核基因組以外,具有獨立復(fù)制能力的小型共價閉合環(huán)狀dsDNA分子,即cccDNA。10、細(xì)菌的普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo):通過極少數(shù)完全缺陷噬菌體對供體基因組上任何小片段DNA進(jìn)行“誤包”,而將其遺傳性狀傳遞給受體菌的現(xiàn)象,稱為細(xì)菌的普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)。11、點突變:一對堿基被另一對堿基置換的突變。12、條件致死突變:某菌株或病毒經(jīng)基因突變后,在某種條件下可正常地生長、繁殖并呈現(xiàn)其固有的表型,而在另一種
47、條件下卻無法生長、繁殖,這種突變型稱為條件致死突變。13、局限性轉(zhuǎn)導(dǎo):指通過部分缺陷噬菌體把供體菌的少數(shù)特定基因攜帶到受體菌中,并與后者的基因組整合、重組,形成轉(zhuǎn)導(dǎo)子的現(xiàn)象。14、營養(yǎng)缺陷型:野生型菌株經(jīng)誘變劑處理后,由于發(fā)生了喪失某酶合成能力的突變,因而只能在加有該酶合成產(chǎn)物的培養(yǎng)基中才能生長,這類突變菌株稱為營養(yǎng)缺陷型突變株,或稱為營養(yǎng)缺陷型。15、低頻轉(zhuǎn)導(dǎo):指通過一般溶源菌釋放的噬菌體所進(jìn)行的轉(zhuǎn)導(dǎo),因其只能形成極少數(shù)(10-4-10-6)轉(zhuǎn)導(dǎo)子。16、接合:供體菌通過性菌毛與受體菌直接接觸,把F質(zhì)?;蚱鋽y帶的不同長度的核基因組片段傳遞給后者,使后者獲得若干新遺傳性狀的現(xiàn)象。17、飾變:指
48、外表的修飾性改變,即一種不涉及遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)改變而只發(fā)生在轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)譯水平上的表型變化。五簡答題1簡述:原理:鼠傷寒沙門氏菌的組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株在基本培養(yǎng)基的平板上不能生長,如果發(fā)生回復(fù)突變稱原養(yǎng)型后則可生長。方法:在含待測可疑“三致”物的式樣中,加入鼠肝勻漿液,經(jīng)過一段時間保溫后,吸入濾紙片中,然后將濾紙片放于上述平板中央。結(jié)果:(1)平板上無大量菌液,說明試樣中不含誘變劑;(2)紙片周圍有抑菌圈,外圍出現(xiàn)大量菌落,說明試樣中有某種高濃度的誘變劑;(3)紙片周圍出現(xiàn)大量菌落,說明試樣中有濃度適當(dāng)?shù)恼T變劑存在。優(yōu)點:快速(約3天)、準(zhǔn)確(符合率>85%)、費用省。2何謂原生質(zhì)融合技術(shù)?簡述
49、其主要的操作及微生物育種的意義。原生質(zhì)融合是通過人為的方法,使遺傳性狀不同的兩個細(xì)胞的原生質(zhì)體進(jìn)行融合,借以獲得兼有雙親性狀的穩(wěn)定重組子的過程。操作過程:先選擇兩株適當(dāng)?shù)挠刑厥鈨r值,并帶有選擇性遺傳標(biāo)記的細(xì)胞作為親本菌株置于等滲溶液中,用適當(dāng)?shù)拿摫诿溉コ?xì)胞壁,再將形成的原生質(zhì)體進(jìn)行離心聚集。加入促融合劑PEG或者接電脈沖等因素促進(jìn)融合,然后用等滲液稀釋,再涂在能促進(jìn)它再生細(xì)胞壁和進(jìn)行細(xì)胞分裂的基本培養(yǎng)基平板上,待形成菌落后,再通過影印平板法,把它接種到各種選擇性培養(yǎng)基平板上,檢驗它們是否為穩(wěn)定的融合子,最后再測定其有關(guān)生物學(xué)性狀或生產(chǎn)性能。意義:在育種上應(yīng)用原生質(zhì)體融合的研究甚多,成績顯著。
50、在這些例子中其重組頻率已經(jīng)達(dá)到10-1,而誘變育種一般僅為10-6,此外,除同種的不同菌株或種間能進(jìn)行融合外,還發(fā)展到屬間,科間甚至更遠(yuǎn)源的微生物或者高等生物細(xì)胞間的融合,并借此獲得生產(chǎn)性狀更為優(yōu)良的新物種,此外,近年來在原生質(zhì)體融合育種中還出現(xiàn)用加熱或者UV滅活的原生質(zhì)體做一方甚至兩方親本參與融合,此法大大簡化了制備遺傳標(biāo)記親本的繁瑣準(zhǔn)備工作。3微生物基因突變的類型和特點類型:營養(yǎng)缺陷型,抗性突變型,條件致死突變型,形態(tài)突變型,抗原突變型,產(chǎn)量突變型特點:(1)自發(fā)性(2)不對應(yīng)性(3)稀有性(4)獨立性(5)可誘變性(6)穩(wěn)定(7)可逆性4怎樣防止菌種的衰退現(xiàn)象? 1控制傳代次數(shù)2創(chuàng)造良好
51、的培養(yǎng)條件3利用不易衰退的細(xì)胞傳代 4采用有效的菌種保藏方法5比較高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)和低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)的異同低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)媒介物缺陷溫和噬菌體雙重溶源菌形成轉(zhuǎn)導(dǎo)子數(shù)量低(10-410-6)高50%裂解物類型低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)裂解物高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)裂解物6營養(yǎng)缺陷型的定義,篩選的一般步驟?營養(yǎng)缺陷型:野生型菌株經(jīng)誘變劑處理后,由于發(fā)生了喪失某酶合成能力的突變,因而只能在加有該酶合成產(chǎn)物的培養(yǎng)基上才可能生長,這類突變菌株稱為營養(yǎng)缺陷型突變株或簡稱為營養(yǎng)缺陷型。篩選方法:誘變處理淘汰野生型檢出缺陷型鑒定缺陷型7結(jié)合與轉(zhuǎn)化如何區(qū)別?轉(zhuǎn)化:供體DNA段注入受體細(xì)胞接合:通過性菌毛,將遺傳物質(zhì)從供體菌轉(zhuǎn)移給受體菌8何謂菌種復(fù)壯?如何達(dá)到菌
52、種復(fù)壯?復(fù)壯:恢復(fù)原菌株固有形狀或在菌種中選擇到自發(fā)的正變個體措施:積極措施:在菌種的典型特征或生產(chǎn)形狀沒有消退前,就經(jīng)常有意識的采取純種分離合生產(chǎn)形狀的測定工作,以期從中選擇到自發(fā)的正變個體。消極措施:在菌種已經(jīng)發(fā)生衰退的情況下,通過純種分離和測定典型性狀,生產(chǎn)性能等指標(biāo),從已經(jīng)衰退的群體種篩選出少數(shù)的沒有退化的個體,以達(dá)到復(fù)壯。六綜述題1 F+,F(xiàn)-,HFR和F菌株有什么區(qū)別?F+菌株:指細(xì)胞內(nèi)存在一至幾個F質(zhì)粒,并在細(xì)胞表面著生一至幾條性菌毛的菌株。F-菌株:指細(xì)胞中無F質(zhì)粒、細(xì)胞表面也無性菌毛的菌株。Hfr菌株(high freguency recombination strain,
53、高頻重組菌株):由F質(zhì)粒插入到染色體DNA后形成的高頻重組菌株,這類菌株在F質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移過程中可以把部分甚至全部細(xì)菌染色體傳遞給F-細(xì)胞并發(fā)生重組。F菌株:細(xì)胞內(nèi)存在攜帶有宿主染色體基因的F質(zhì)粒的菌株。2、放線菌產(chǎn)量突變株的篩選方法見P218瓊脂塊培養(yǎng)法。3、菌種保藏的基本原理是:根據(jù)微生物的生理、生化特點,選用優(yōu)良菌株,最好是它們的休眠體,人工地創(chuàng)造適合于休眠的環(huán)境條件,即干燥、低溫、缺乏氧氣和養(yǎng)料等,使微生物的代謝活動處于最低的狀態(tài)但又不至于死亡,從而達(dá)到保藏的目的。菌種保藏的常用方法?(1)斜面冰箱保藏法:將菌種接在適當(dāng)?shù)男泵嫔希渖L豐滿后,可放在4冰箱中保藏。此法一般可保藏3個月左右
54、。各類菌種均可用此法進(jìn)行保藏。(2)半固體穿刺保藏法:將菌種接入半固體直立柱中,然后進(jìn)行培養(yǎng)。待長好后,放入4冰箱中保藏。此法可保藏半年左右,它適用于細(xì)菌、酵母的菌種保藏。(3)石蠟油封存法:如果將無菌石蠟油加入到上述保藏的菌種中,使菌種與空氣隔絕,則保藏效果更佳,一般可保藏三年左右。根據(jù)同樣的道理,用滅菌的橡皮塞代替原來的棉花塞,效果也是好的。此法適用于各類菌種的保藏。(4)砂土管保藏法:取過篩(60目)河砂,用10鹽酸浸泡、用水洗凈后,烘干。再取瘦土,以4:1量混合,裝入小試管、滅菌后,滴入幾滴菌種懸液,用接種針攪勻。然后放入干燥器中,抽氣干燥,放入低溫處保藏。此法一般可保藏1至數(shù)年。它適用于產(chǎn)生孢子的微生物的保藏。(5)冷凍干燥保藏法:將用滅菌牛奶做成的高濃度的菌液裝入滅菌的安瓿瓶中,放在低溫條件下抽氣干燥,使其中的水分因升華作用逸出,而形成完全干燥的菌塊,然后將安瓿瓶在真空條件下融封。這種方法因菌體內(nèi)的水分全部被抽掉,無法進(jìn)行
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