細(xì)菌總論3-消毒滅菌與實驗室安全

1、第三章第三章 消毒滅菌與實驗室消毒滅菌與實驗室生物安全生物安全 Disinfection and Biosafety病原生物學(xué)教研室病原生物學(xué)教研室第一節(jié)第一節(jié) 消毒滅菌的常用術(shù)語消毒滅菌的常用術(shù)語滅菌滅菌 (sterilization) 利用理化因素殺死物體上利用理化因素殺死物體上所有微生物所有微生物的的過程，包括芽胞過程，包括芽胞/病毒病毒/真菌真菌/細(xì)菌等。細(xì)菌等。 (disinfection) 殺死物體或環(huán)境中病原微生物的措施，殺死物體或環(huán)境中病原微生物的措施，并并不一定能殺死細(xì)菌芽胞或非病原微生物。不一定能殺死細(xì)菌芽胞或非病原微生物。防腐防腐 (antisepsis)： 體外防止或抑

2、制細(xì)菌生長繁殖的方法。體外防止或抑制細(xì)菌生長繁殖的方法。 (cleaning)： 通過除去塵埃和一切污穢以減少微生物數(shù)通過除去塵埃和一切污穢以減少微生物數(shù) 量的過程。量的過程。 不存在任何活菌不存在任何活菌, 即滅菌結(jié)果即滅菌結(jié)果 防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù) 熱力滅菌法熱力滅菌法 輻射殺菌法 物理學(xué)方法物理學(xué)方法 濾過除菌法 超聲波殺菌法 干燥和低溫抑菌法 化學(xué)方法化學(xué)方法 各種高/中/低效的消毒劑 第二節(jié)第二節(jié) 消毒滅菌的方法消毒滅菌的方法 焚燒：焚燒： 燒灼：燒灼： 干烤：干烤：常規(guī)160180,2h 紅外線：紅外線：（一）（一） 熱力滅菌法熱

3、力滅菌法1、干熱滅菌法、干熱滅菌法 脫水和分子變性。一般繁殖體在干燥狀態(tài)下 80100 1h，芽胞160170 2h 被殺死。電熱恒溫干燥箱電熱恒溫干燥箱2、濕熱滅菌法、濕熱滅菌法 巴氏消毒法巴氏消毒法 (pasteurization) 61.162.8 30min；71.7 1530s，牛奶、酒類消毒。 煮沸法：煮沸法：一般細(xì)菌1005min , 芽胞12h；加入2碳酸鈉可提高沸點，又可防止金屬器皿生銹，用于消毒食具/刀剪/注射器。 流動蒸汽消毒法流動蒸汽消毒法：100蒸汽 1530min殺死細(xì)菌，但芽胞不能全部殺滅。 間歇蒸汽滅菌法間歇蒸汽滅菌法 100 蒸汽1530min殺死繁殖體，孵箱

4、37 過夜；如此重復(fù)三次以上。適于不耐高熱的含糖、牛奶等培養(yǎng)基。 高壓蒸汽滅菌法高壓蒸汽滅菌法 103.4kPa蒸汽壓，121.3 ，1520min.適于培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)敷料培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)敷料等耐高溫、耐濕熱物品的滅菌。不能殺滅朊粒。2、濕熱滅菌法、濕熱滅菌法濕熱與干熱滅菌效果的比較濕熱與干熱滅菌效果的比較相同溫度下，濕熱滅菌效果優(yōu)于干熱滅菌相同溫度下，濕熱滅菌效果優(yōu)于干熱滅菌 濕熱比干熱滅菌好的原因濕熱比干熱滅菌好的原因1 1、細(xì)菌蛋白質(zhì)在濕熱中易于凝固變性。、細(xì)菌蛋白質(zhì)在濕熱中易于凝固變性。2 2、濕熱穿透力較強。、濕熱穿透力較強。3 3、濕熱蒸氣有潛在熱效應(yīng)，可迅速提、濕熱

5、蒸氣有潛在熱效應(yīng)，可迅速提 高被滅菌物體的溫度。高被滅菌物體的溫度。不同規(guī)格高壓蒸汽滅菌鍋不同規(guī)格高壓蒸汽滅菌鍋（二）輻射滅菌法（二）輻射滅菌法n 電離輻射電離輻射n 非電離輻射非電離輻射1、電離輻射：、電離輻射： 包括X、射線 機制機制：干擾DNADNA的合成；破壞細(xì)胞膜； 產(chǎn)生過氧化氫等 特點特點： 穿透力弱， 穿透力強 用途用途： 食品、藥品、一次性塑料等 2、非電離輻射、非電離輻射 （1）紫外線紫外線 改變DNA分子構(gòu)型，干擾DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄u穿透力弱，只能用于手術(shù)室、傳染病房、 細(xì)菌實驗室等的空氣消毒。（2）日光日光 能殺死大部分的微生物（3）微波微波 非金屬器械(玻璃陶瓷塑料等)消

6、毒； 必須有一定量水才有滅菌效果。（三）濾過除菌法（三）濾過除菌法n 主要適合于不耐高溫主要適合于不耐高溫滅菌的血清、毒素、抗生滅菌的血清、毒素、抗生素以及空氣的等的除菌。素以及空氣的等的除菌。n 不能濾過支原體、衣不能濾過支原體、衣原體和病毒。原體和病毒。層層流室流室（四）超聲波消毒法（四）超聲波消毒法 原原 理理：空穴效應(yīng) 用用 途途：裂解細(xì)菌，尤其對G+更敏感。 主要用于粉碎細(xì)胞，提取細(xì)胞 組分或制備抗原等。（五）干燥與低溫抑菌法五）干燥與低溫抑菌法n干燥法常用于保存食物干燥法常用于保存食物n低溫可使細(xì)菌的新陳代謝減慢，故常低溫可使細(xì)菌的新陳代謝減慢，故常用作保存細(xì)菌菌種；冷凍真空干燥法

7、用作保存細(xì)菌菌種；冷凍真空干燥法是目前是目前保存菌種保存菌種的最好方法。的最好方法。 二、化學(xué)消毒滅菌法二、化學(xué)消毒滅菌法化學(xué)消毒劑的殺菌機制：化學(xué)消毒劑的殺菌機制：u 促進(jìn)菌體蛋白質(zhì)變性或凝固促進(jìn)菌體蛋白質(zhì)變性或凝固u 干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝u 損傷菌細(xì)胞膜損傷菌細(xì)胞膜 1 1. .含氯消毒劑含氯消毒劑； 2 2. .過氧化物消毒劑過氧化物消毒劑； 3 3. .醛類消毒劑醛類消毒劑； 4 4. .環(huán)氧乙烷環(huán)氧乙烷(新潔爾滅) 第三節(jié)第三節(jié) 消毒滅菌消毒滅菌的應(yīng)用的應(yīng)用（一）高危器械物品； 所有這些物品都應(yīng)該滅菌。 （二）中危器械物品； 采用消毒即可。（三）低危器械物品；

8、 一般用后清洗、消毒即可。（四）快速周轉(zhuǎn)的醫(yī)療器械； 1 1 排泄物：等量的20%漂白粉、5%石炭酸 或2%來蘇兒,攪拌均勻作用2h。 2 2 皮膚：2.5%碘酒、70%酒精、2%紅汞 3 3 粘膜：1%硝酸銀、3%過氧化氫、0.1% 高錳酸鉀等 4 4 飲水: 氯氣、漂白粉 5 5 廁所：生石灰 6 6 空氣：甲醛熏蒸 7 7 手：2%來蘇兒、2%碘酊、70%酒精 影響消毒滅菌的因素影響消毒滅菌的因素第四節(jié)、實驗室生物安全第四節(jié)、實驗室生物安全（一）病原微生物分類（一）病原微生物分類第一類：第一類：第四類：第四類：第三類：第三類：（二）生物安全實驗室防護(hù)水平分級（二）生物安全實驗室防護(hù)水平分

9、級nBSL-1 指普通建筑結(jié)構(gòu)的實驗室；nBSL-2 應(yīng)配備負(fù)壓生物安全柜和高壓蒸汽滅菌器等設(shè)備；生物安全防護(hù)水平生物安全防護(hù)水平(biosafety level BSL)病原微生物實驗室分級病原微生物實驗室分級BSL(三三)、實驗室感染的實驗室感染的控制控制 以以及監(jiān)督和法律責(zé)任及監(jiān)督和法律責(zé)任 復(fù)習(xí)思考題復(fù)習(xí)思考題n 消毒滅菌的常用術(shù)語和常用方法。消毒滅菌的常用術(shù)語和常用方法。 n簡述濕熱滅菌的原理和用途。簡述濕熱滅菌的原理和用途。n 濕熱滅菌有哪些方法？濕熱滅菌有哪些方法？n 在溫度和時間相同的條件下，為什么濕在溫度和時間相同的條件下，為什么濕 熱滅菌效果較干熱滅菌效果好？熱滅菌效果較干

10、熱滅菌效果好？n 簡述紫外殺菌的作用機制。簡述紫外殺菌的作用機制。n 常用化學(xué)消毒劑有哪些？簡述其用途。常用化學(xué)消毒劑有哪些？簡述其用途。消毒劑的主要種類、濃度及用途1 1 酚類：作用：菌體蛋白凝固；損傷細(xì)胞膜； 滅活酶類濃度：石炭酸為3%- 5%3%- 5%、來蘇兒為2%2% 用途：地面、器具表面和皮膚的消毒2 2 醇類 ：作用機制：使菌體蛋白變性與凝固； 干擾細(xì)菌代謝濃度：乙醇70%-75%70%-75%用途：用于皮膚的消毒和體溫計等的 浸泡 3 重金屬鹽類： 使細(xì)菌發(fā)生變性和沉淀；酶活性喪失 （1 1）2%2%紅汞：皮膚、粘膜和小創(chuàng)傷 （2 2）0.05-0.01%0.05-0.01%升汞：非金屬器皿 4 氧化劑： 氧化作用；使蛋白質(zhì)變性 （1 1）0.1%0.1%高錳酸鉀：皮膚、尿道、水果 （2 2）3%3%過氧化氫：創(chuàng)傷、皮膚粘膜 （3 3）2%-2.5%2%-2.5%碘酒：皮膚消毒 （4 4）0.20.2ppm-0.5ppmppm-0.5ppm氯：飲水和游泳池 （5 5）10%-20%10%-20%漂白粉：地面、廁所等 5 5 表面活性劑： 損傷細(xì)胞膜；滅活氧化酶等酶的活性；蛋白