電導法測定果蔬細胞膜滲透率1

1、實驗五實驗五電導法測定果蔬細胞膜滲透率電導法測定果蔬細胞膜滲透率o 一、實驗目的一、實驗目的 果蔬在冷藏及冷藏運輸中，經(jīng)常發(fā)生冷害或果蔬在冷藏及冷藏運輸中，經(jīng)常發(fā)生冷害或凍害而影響產(chǎn)品質(zhì)量。如何及時正確地鑒別冷凍害而影響產(chǎn)品質(zhì)量。如何及時正確地鑒別冷害及凍害的發(fā)生，是果蔬貯運中需要解決的問害及凍害的發(fā)生，是果蔬貯運中需要解決的問題。題。 植物體遭受冷害時，細胞膜的透性發(fā)生變化，植物體遭受冷害時，細胞膜的透性發(fā)生變化，細胞中電解質(zhì)（主要是鉀離子）向外滲透速度加細胞中電解質(zhì)（主要是鉀離子）向外滲透速度加快，細胞膜滲透速度稱為滲透率。它可以通過測快，細胞膜滲透速度稱為滲透率。它可以通過測定果蔬組織提

2、取液電導率的方法來確定。定果蔬組織提取液電導率的方法來確定。二、實驗原理二、實驗原理o 果蔬組織提取液的電導率可用下式表示：果蔬組織提取液的電導率可用下式表示： LKC （1）C電導度，表示提取液的導電能力，可用電導儀電導度，表示提取液的導電能力，可用電導儀直接測得。另外，電導度（直接測得。另外，電導度（C）是電阻）是電阻R的倒數(shù)，的倒數(shù)，即：即：C1/R K電極常數(shù)，它是測定電導時兩極片間的距離電極常數(shù)，它是測定電導時兩極片間的距離（單位為）與極片的截面（單位為）與極片的截面A（單位為（單位為2）之比，）之比，其單位為其單位為()-1，因此，電導率，因此，電導率L的單位則為的單位則為-1-1

3、，m-1-1和和-1-1，測定植物細胞膜的電導率多，測定植物細胞膜的電導率多以以-1-1為單位。（歐姆）為單位。（歐姆）o 電極常數(shù)（電極常數(shù)（K），因電極而異。每個電極的電極常），因電極而異。每個電極的電極常數(shù)均應個別測定，測定電極常數(shù)（數(shù)均應個別測定，測定電極常數(shù)（K）值的方法是）值的方法是利用已知電導率利用已知電導率L的標準的標準KCl溶液。用需測定的電溶液。用需測定的電極測定此標準溶液的電導度（極測定此標準溶液的電導度（C），從），從式中可求式中可求出它的出它的K值。值。 o 果蔬細胞膜滲透率（果蔬細胞膜滲透率（Le），是測試材料活組織），是測試材料活組織提取液的電導率（提取液的電導率

4、（L1）與測試材料被殺死后提）與測試材料被殺死后提取液的電導率（取液的電導率（L0）之百分比。）之百分比。o Le（%）L1/L0100%（2） o Le實際表示在一定時間內(nèi)，細胞電解質(zhì)滲出量占總實際表示在一定時間內(nèi)，細胞電解質(zhì)滲出量占總電解質(zhì)量的百分比。電解質(zhì)量的百分比。o 因為：因為：L1KC1 L0KC0o 所以：所以：o LeKC1/(KC0)100%C1/C0100% 由由式可見，不必計算電導率，而用電導儀直接測定電式可見，不必計算電導率，而用電導儀直接測定電導度（導度（C），即可計算出細胞膜的滲透率（），即可計算出細胞膜的滲透率（Le）。）。o 黃瓜、青椒（部分進行低溫處理）黃瓜、

5、青椒（部分進行低溫處理）o DJS1C型電導儀、抽氣機、切片器、振蕩器、型電導儀、抽氣機、切片器、振蕩器、打孔器、濾紙、大試管、燒杯、電爐。打孔器、濾紙、大試管、燒杯、電爐。三、材料及用具三、材料及用具 材料處理：選取果品一份放入室溫下貯藏，為正常材料處理：選取果品一份放入室溫下貯藏，為正常組；另一份放入過低溫度下使其受冷害，為處理組。組；另一份放入過低溫度下使其受冷害，為處理組。用打孔器及切片器將樣品制成厚薄均勻，大小一致的用打孔器及切片器將樣品制成厚薄均勻，大小一致的組織圓片，稱取組織圓片，稱取2克（或十個圓片），放入盛有克（或十個圓片），放入盛有20mL去離子水的試管中，在真空干燥器中抽

6、氣浸泡去離子水的試管中，在真空干燥器中抽氣浸泡10min后，后，緩慢放入空氣，水即滲入細胞間隙，組織圓片變成透緩慢放入空氣，水即滲入細胞間隙，組織圓片變成透明，細胞內(nèi)溶質(zhì)易于滲出，重復明，細胞內(nèi)溶質(zhì)易于滲出，重復3-5次，取出試管振蕩次，取出試管振蕩半小時。半小時。四、操作方法四、操作方法測定：o 用用DJS1C型電導儀插入試管，測定外滲液型電導儀插入試管，測定外滲液的電導度。測定后再將試管放入水浴鍋沸水的電導度。測定后再將試管放入水浴鍋沸水中中5min，加熱殺死組織，待冷卻室溫后再測，加熱殺死組織，待冷卻室溫后再測定提取液的電導度，按定提取液的電導度，按式即可計算出細胞式即可計算出細胞膜的滲

7、透率。膜的滲透率。 電導儀的使用電導儀的使用o 將電極引線接到儀器相應接線柱上。將電極引線接到儀器相應接線柱上。o 接通電源，打開電源開關(guān)。接通電源，打開電源開關(guān)。o 將量程開關(guān)撥向?qū)⒘砍涕_關(guān)撥向“檢查檢查”位置，常數(shù)旋鈕位置，常數(shù)旋鈕指向指向“1”1”刻度，溫度鈕指向刻度，溫度鈕指向“25”25”，調(diào)節(jié)，調(diào)節(jié)校準鈕，使儀器顯示校準鈕，使儀器顯示100uS/cm, 100uS/cm, 完成校準。完成校準。o 將開關(guān)撥向?qū)㈤_關(guān)撥向“測定位置測定位置”，指針應回到零，指針應回到零點。點。o 撥動選擇測量范圍的旋鈕，使其處于測定范圍之內(nèi)，撥動選擇測量范圍的旋鈕，使其處于測定范圍之內(nèi)，如不知測量范圍，

8、應先放在最大程位置上，如不知測量范圍，應先放在最大程位置上，由大到小，由大到小，逐級調(diào)整逐級調(diào)整。o 將電極用重蒸餾水沖洗干凈，并用濾紙吸取附著的將電極用重蒸餾水沖洗干凈，并用濾紙吸取附著的水分，放在需測組織提取液中，等指針穩(wěn)定后，讀指水分，放在需測組織提取液中，等指針穩(wěn)定后，讀指針所指的數(shù)值，此數(shù)值即是該提取液的電導度。針所指的數(shù)值，此數(shù)值即是該提取液的電導度。o 按上述方法，測定組織圓片殺死后提取液的電按上述方法，測定組織圓片殺死后提取液的電導度。導度。o 將電極用蒸餾水洗干凈，放在水中，如長期不將電極用蒸餾水洗干凈，放在水中，如長期不用，則應將電極冼凈晾干，包裝放置。用，則應將電極冼凈晾干，包裝放置。 五、記錄與計算五、記錄與計算處理處理電導度（電導度（C）滲透率（滲透率（Le）正常正常組組正常正常煮死煮死處理處理組組凍害凍害煮死煮死六六 注意事項注意事項o 整個電導測定需要在恒溫條件下進行，因為溫度整個電導測定需要在恒溫條件下進行，因為溫度不僅影響細胞內(nèi)離子內(nèi)外滲透速度，而且影響提不僅影響細胞內(nèi)離子內(nèi)外滲透速度，而