實(shí)驗(yàn)三線粒體和液泡系的ppt課件

1、實(shí)驗(yàn)三 線粒體和液泡系的 超活染色與觀察一 實(shí)驗(yàn)?zāi)康? 觀察動(dòng)、植物活細(xì)胞內(nèi)線粒體、液泡的 外形、數(shù)量和分布2 了解細(xì)胞和細(xì)胞器的超活染色技術(shù)。二 實(shí)驗(yàn)原理n活體染色是指對(duì)生活有機(jī)體的細(xì)胞或組織能著色但又無毒的一種染色方法。n活體染色可用來研究生活狀態(tài)下的細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理、病理狀態(tài)。n根據(jù)染色劑性質(zhì)和染色方法不同，分為體內(nèi)活染和體外活染。n活體染色之所以能固定、堆積在細(xì)胞內(nèi)某些特殊的部分，主要是染料的“電化學(xué)特性起重要作用。堿性燃料的膠粒表面帶陽離子，酸性染料的膠粒表面帶有陰離子，而被染的部分本身也是具有陰離子或陽離子，這樣，他們彼此就發(fā)生了吸引作用。但不是任何染料都可以作為活體染色劑之用，

2、應(yīng)選擇那些對(duì)細(xì)胞無毒性或毒性極小的染料，而且總要配成稀淡的溶液來使用。一般是以堿性染料最為適用，可能因?yàn)樗哂腥芙庠陬愔|(zhì)的特性，易于被細(xì)胞吸收，Janus green B和中性紅兩種堿性染料是活體染色劑中最重要的染料，對(duì)于線粒體和液泡系的染色各有專一性。n詹納斯綠可專一性地對(duì)對(duì)線粒體進(jìn)行活染,這是由于線粒體內(nèi)的細(xì)胞色素氧化酶系的作用，使染料始終保持氧化狀態(tài)(即有色狀態(tài)),呈藍(lán)綠色。n中性紅對(duì)液泡系的染色具有專一性，將活細(xì)胞中的液泡系染成紅色。三 實(shí)驗(yàn)用品n1 器材：n顯微鏡、恒溫水浴鍋、剪刀、鑷子、解剖刀、載玻片、蓋玻片、吸管、牙簽、吸水紙n2 試劑：nRinger液、1/5000詹納斯綠、

3、1/3000中性紅n3 資料：n人口腔上皮細(xì)胞n洋蔥鱗莖內(nèi)表皮細(xì)胞n小麥或黃豆幼根根尖四 實(shí)驗(yàn)方法n一 線粒體的超活染色與觀察n 詹納斯綠B能專一對(duì)線粒體進(jìn)行超活染色，呈藍(lán)綠色。1 人口腔粘膜上皮細(xì)胞線粒體 的超活染色觀察n載玻片 37水浴鍋的金屬板滴兩滴詹納斯綠B染液n牙簽從口腔粘膜刮取上皮細(xì)胞放入載玻片染液染色10-15分鐘蓋上蓋玻片察看n低倍鏡平展的口腔上皮細(xì)胞高倍鏡顆?；蚨贪魻罹€粒體洋蔥鱗莖表皮細(xì)胞線粒體的 超活染色n載玻片滴一滴詹納斯綠B染液撕取一小片洋蔥鱗莖內(nèi)表皮染色10-15分鐘n吸去染液加一滴Ringer液蓋上蓋玻片察看二 液泡系的超活染色與觀察 n中性紅對(duì)液泡系的染色具有專一性，將活細(xì)胞中的液泡系染成紅色。小麥液泡系的超活染色與觀察 n小麥根尖細(xì)胞液泡系的中性紅染色觀察n雙面刀片小麥或黃豆幼苗根尖切一縱切面中性紅染色5-10分鐘n吸去染液加一滴Ringer液蓋上蓋玻片