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1、病原生物學(xué)教研室病原生物學(xué)教研室張瑩張瑩一、革蘭氏染色一、革蘭氏染色1 1、原理、原理G:肽聚糖層薄且缺五肽交聯(lián)橋,交聯(lián)度低,外:肽聚糖層薄且缺五肽交聯(lián)橋,交聯(lián)度低,外膜層含較多脂質(zhì),用乙醇等有機(jī)溶劑脫色時(shí),外膜膜層含較多脂質(zhì),用乙醇等有機(jī)溶劑脫色時(shí),外膜中類脂質(zhì)融解,添加了細(xì)胞的通透性,薄而松散的中類脂質(zhì)融解,添加了細(xì)胞的通透性,薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻撓結(jié)晶紫和碘復(fù)合物溶出,菌體呈肽聚糖網(wǎng)不能阻撓結(jié)晶紫和碘復(fù)合物溶出,菌體呈現(xiàn)復(fù)染后的紅色?,F(xiàn)復(fù)染后的紅色。G:細(xì)胞壁厚肽聚糖網(wǎng)層多且交聯(lián)致密,用脫色:細(xì)胞壁厚肽聚糖網(wǎng)層多且交聯(lián)致密,用脫色劑處置時(shí),肽聚糖層孔徑減少,且不含類脂,通透劑處置時(shí),
2、肽聚糖層孔徑減少,且不含類脂,通透性降低,結(jié)晶紫和碘復(fù)合物結(jié)實(shí)結(jié)合在細(xì)胞壁上,性降低,結(jié)晶紫和碘復(fù)合物結(jié)實(shí)結(jié)合在細(xì)胞壁上,菌體呈現(xiàn)初染時(shí)的紫色。菌體呈現(xiàn)初染時(shí)的紫色。初染初染-媒染媒染-脫色脫色-復(fù)復(fù)染染2 2、步驟、步驟 1 1涂片涂片2 2枯燥枯燥3 3固定固定 取菌NS 初染:結(jié)晶紫初染:結(jié)晶紫1 1分鐘,水沖甩干;分鐘,水沖甩干;媒染:盧戈氏碘液媒染:盧戈氏碘液1 1分鐘,水沖甩干;分鐘,水沖甩干;脫色:脫色:95%95%酒精酒精3030秒鐘,水沖甩干;秒鐘,水沖甩干;復(fù)染:稀釋復(fù)紅復(fù)染:稀釋復(fù)紅1 1分鐘,水沖甩干;分鐘,水沖甩干;5 5濾紙吸干,油鏡察看濾紙吸干,油鏡察看4 4染色染色3 3、結(jié)果、結(jié)果檸檬色葡萄球菌:藍(lán)紫色檸檬色葡萄球菌:藍(lán)紫色G+ 變變 形形 桿桿 菌:菌: 紅色紅色G 變形桿菌革蘭染色革蘭染色 X1000 檸檬色葡萄球菌革蘭染色革蘭染色 X1000X10004、意義、意義鑒別細(xì)菌鑒別細(xì)菌指點(diǎn)臨床用藥指點(diǎn)臨床用藥研討細(xì)菌的致病性研討細(xì)菌的致病性G+G-G+:青霉素、頭孢類青霉素、頭孢類等等G-:鏈霉素、卡那霉素等G+:外毒素G-:內(nèi)毒素 變形桿菌鞭毛變形桿菌鞭毛 鞭毛染色鞭毛染色 X1000 炭疽桿菌芽胞 革蘭染色革蘭染色 X1000 炭疽桿菌莢膜 革蘭染色革蘭染色 X1000繪繪 圖圖
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