生物化學(xué)培訓(xùn)

1、自動(dòng)生物化學(xué)分析儀（automatic biochemical analyzer):是將生物化學(xué)分析過程中的取樣、加試劑、去干擾物、混合、保溫反應(yīng)、自動(dòng)監(jiān)測(cè)、數(shù)據(jù)處理、打印報(bào)告以及試驗(yàn)后的清洗等步驟進(jìn)行自動(dòng)化操作的儀器。1957年世界上第一臺(tái)用于臨床檢驗(yàn)的自動(dòng)分析儀，是一臺(tái)單通道、連續(xù)流動(dòng)式自動(dòng)分析儀，報(bào)告的結(jié)果是光密度（OD）值。60年代，出現(xiàn)可同時(shí)測(cè)定多項(xiàng)目的連續(xù)流動(dòng)式自動(dòng)分析儀。70年代中期，電子計(jì)算機(jī)的應(yīng)用使自動(dòng)生物化學(xué)分析儀的發(fā)展進(jìn)入一個(gè)嶄新的時(shí)期。80、90年代以來各種自動(dòng)生化分析儀競相發(fā)展，功能及性能指標(biāo)日趨完善。高性能儀器具有的功能：1、用條形碼標(biāo)記樣品，由讀碼器識(shí)別， 大大提

2、高了工作準(zhǔn)確率；2、比色器的自動(dòng)清洗功能以及惰性液應(yīng)用能有效的防止交叉污染；3、各種自檢、自動(dòng)重檢、警告功能；4、急查樣本插入功能；5、管理功能，包括試驗(yàn)程序管理、數(shù)據(jù)管理、質(zhì)控管理；6、卓越的電腦軟件功能，使儀器更加完善。1、按反應(yīng)裝置的結(jié)構(gòu)：離心式、干式、連續(xù)流動(dòng)式、分立式分立式2、按自動(dòng)化程度：全自動(dòng)、半自動(dòng)3、按同時(shí)可測(cè)定項(xiàng)目：單通道、多通道4、按儀器的復(fù)雜程度及功能：小型、中型、大型目前按反應(yīng)裝置的結(jié)構(gòu)分類是最常用的分類方法干化學(xué)式自動(dòng)生化分析儀（KODAK），將發(fā)生在液相反應(yīng)物中的反應(yīng)，轉(zhuǎn)移到一個(gè)固相載體上，利用分光檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行監(jiān)測(cè)（多進(jìn)行反射光檢測(cè)） 。多用于急診檢測(cè)。分立式：樣

3、品和試劑在各自的試管起反應(yīng)?？朔瞬僮鞣爆崱⒔徊嫖廴镜膯栴}。試試管管樣樣本本試試管管試試劑劑1試試管管攪攪拌拌延遲延遲試試劑劑2試試管管試試管管攪攪拌拌反應(yīng)反應(yīng)比比色色1.樣品處理系統(tǒng)2.檢測(cè)系統(tǒng)3.恒溫及清洗裝置4.儀器計(jì)算機(jī)系統(tǒng)樣品處理系統(tǒng) 該系統(tǒng)的功能是模仿人工操作，識(shí)別樣品和試劑，并加入到反應(yīng)器中。樣品處理系統(tǒng)樣品架：圓盤狀、傳送條帶狀；有條形碼分析儀可以直接讀入、無條形碼則要手動(dòng)輸入。試劑盤：放置試劑的裝置，一般都有冷藏裝置（4-15度）試劑針：通常有液面感應(yīng)器，有自我保護(hù)功能。樣品處理系統(tǒng)加液器：由定量吸量器和加樣針組成，由機(jī)械臂控質(zhì)加液器移動(dòng)。同樣有液面感應(yīng)，自我保護(hù)功能。 （加

4、試劑時(shí)每次多吸入一些防止試劑被稀釋，如：7060儀器：50-13、100-16、200-23、250-26、300-29）問題：試劑每次多吸入會(huì)造成R2用完，R1 有剩余的情況。 樣品處理系統(tǒng) 攪拌器：電機(jī)攪拌棒組成，電機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)帶動(dòng)攪棒,攪棒表面有一層不粘性材料，并用特殊吸液清洗，減少攜帶率、避免交叉污染。問題：攪拌棒損壞，從理論上將會(huì)引起交叉污染 。檢測(cè)系統(tǒng)： 1.光路系統(tǒng) 2.分光裝置 3.比色杯（反應(yīng)杯） 4.信號(hào)檢測(cè)器檢測(cè)系統(tǒng) 光路系統(tǒng)： 光源:鹵光燈（工作波長325800nm） 氙氙燈（285750nm)（BECKMAN)檢測(cè)系統(tǒng)分光裝置： 包括光柵和濾光片 分光方式： 大多數(shù)儀器使用

5、 后分光后分光方式 。后分光集束式光路系統(tǒng)光源光源比色杯比色杯單色光單色光光光柵柵后分光后分光優(yōu)點(diǎn)：1、可同時(shí)選用雙波長或多波長測(cè)定，降低“噪聲”； 2、光路中無可動(dòng)部分，減少故障率，提高精度。 3、340nm波長的酶類測(cè)定結(jié)果更穩(wěn)定可靠檢測(cè)系統(tǒng)比色杯（反應(yīng)杯）： 光徑（1、0.5、0.6）,光徑小，省試劑，且大多自動(dòng)校正為1cm（除beckman) 比色杯有分立式和流動(dòng)式兩種。大型儀器多為分立式，小型儀器、半自動(dòng)多為流動(dòng)池式。和測(cè)試速度有關(guān)。檢測(cè)系統(tǒng) 信號(hào)檢測(cè)器 ：光學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)化為電信號(hào) 目前高檔自動(dòng)生化儀均采用光導(dǎo)纖維傳送技術(shù)。恒溫及清洗裝置恒溫裝置 保持反應(yīng)在恒溫下進(jìn)行。清洗裝置 防止交叉

6、污染，提高測(cè)定的精密度和準(zhǔn)確度問題：溫度不恒定，會(huì)導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確。清洗不好，可能導(dǎo)致交叉污染。水?。ㄈ纾喝樟⑾盗校?優(yōu)點(diǎn)：溫度均勻、穩(wěn)定。 缺點(diǎn)：升溫慢，開機(jī)預(yù)熱時(shí)間長，水質(zhì)變化影響測(cè)光。空氣干式浴（如：AU400） 優(yōu)點(diǎn)：升溫迅速，無需保養(yǎng)。 缺點(diǎn)：溫度易受環(huán)境影響。恒溫液循環(huán)間接加熱法（如：AU640） 比色杯周圍流動(dòng)一種特殊的恒溫液，與比色杯間隔幾毫米。儀器計(jì)算系統(tǒng) 自動(dòng)生化儀的核心部分，標(biāo)本識(shí)別、混合恒溫、數(shù)據(jù)處理、結(jié)果打印以及校準(zhǔn)方法、測(cè)定方法的選擇、質(zhì)量監(jiān)控等內(nèi)容均由計(jì)算機(jī)控制完成OLYMPUSOLYMPUSBECKMANBECKMANHITACHIHITACHIAU400AU

7、640AU2700全息光柵，波長范圍寬，可以開展各種檢測(cè)項(xiàng)目。測(cè)試容量最低150uL（AU2700低至120uL）。AU400采用干式空氣浴，AU640采用恒溫液循環(huán)加溫方式，升溫均勻。帶冷藏的48位試劑盤，R1/R2試劑位置可隨意設(shè)置，避免R1/R2不同盤造成的試劑位浪費(fèi)。單數(shù)為外圈，放30ml小瓶，雙數(shù)為內(nèi)圈，可放60ml的大瓶。除AU600外，都具有樣本預(yù)稀釋（5-100倍）功能，可以檢測(cè)高濃度標(biāo)本，并且可以通過預(yù)稀釋降低試劑用量。三頭雙清洗攪拌棒，激流式的沖洗系統(tǒng)，減少了試劑和項(xiàng)目之間的交叉污染。軌道式進(jìn)樣方式，可以同時(shí)檢測(cè)更多的標(biāo)本，但由于只有一只標(biāo)準(zhǔn)架，定標(biāo)時(shí)操作時(shí)間較長，適合使用

8、多項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)液。讀點(diǎn)時(shí)間：10分鐘共有28個(gè)測(cè)光點(diǎn)（0-27），每點(diǎn)間隔18秒。 R2試劑固定在10-11點(diǎn)之間加入。方法學(xué)：End，Rate，F(xiàn)ixed，End1，Rate1，F(xiàn)ixed1。定標(biāo)方式：共15種。計(jì)算方法：共10種。截止到2003年底，Olympus在大陸裝機(jī)量為700多臺(tái)。AU 600在國內(nèi)已不再銷售，全國總計(jì)二十幾臺(tái)。最新儀器為5431機(jī)機(jī)型型 試試劑劑位位 R R1 1/ /R R2 2 項(xiàng)項(xiàng)目目 ( (雙雙) ) 速速度度 無無 I IS SE E 樣樣本本 ( (u ul l) ) R R1 1 ( (u ul l) ) R R2 2 ( (u ul l) ) 反反應(yīng)應(yīng)液

9、液 ( (u ul l) ) A AU U4 40 00 0 4 48 8/ /4 48 8 3 38 8 4 40 00 0 2 2- -5 50 0 2 25 5- -3 30 00 0 A AU U6 60 00 0 4 48 8/ /4 48 8 4 48 8 8 80 00 0 2 2- -5 50 0 2 25 5- -3 30 00 0 A AU U6 64 40 0 4 48 8/ /4 48 8 4 48 8 8 80 00 0 2 2- -5 50 0 2 25 5- -3 30 00 0 1 15 50 0- -5 55 50 0 A AU U2 27 70 00 0 4

10、 48 8/ /4 48 8 4 48 8 1 16 60 00 0 1 1. .6 6- - 1 15 5- -2 25 50 0 1 12 20 0- -4 43 30 0 A AU U5 56 60 00 0 2 26 64 40 0 標(biāo)準(zhǔn)不能預(yù)稀釋，必須手工稀釋。最好定購多點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)液，如HbA1C最好用5只定標(biāo)液定標(biāo)，因?yàn)槭止は♂屓菀壮稣`差。AU系列生化儀沒有405NM波長，只有410NM, 有些測(cè)試如：GGT,AKP理論K值在405NM，所以K值需要相應(yīng)調(diào)整，但調(diào)整幅度一般在5%。Beckman CX5Beckman LX20光源采用長壽閃爍式氙燈，無需保養(yǎng)和更換。光源采用長壽閃爍式氙

11、燈，無需保養(yǎng)和更換。比色杯直徑比色杯直徑0.50.5cmcm，因數(shù)法檢測(cè)時(shí)需要在理論因數(shù)因數(shù)法檢測(cè)時(shí)需要在理論因數(shù)的基礎(chǔ)上的基礎(chǔ)上* *2 2。酶類項(xiàng)目采用因數(shù)法時(shí)免校正。酶類項(xiàng)目采用因數(shù)法時(shí)免校正。使用標(biāo)準(zhǔn)液定標(biāo)一個(gè)項(xiàng)目，需要一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液位置，使用標(biāo)準(zhǔn)液定標(biāo)一個(gè)項(xiàng)目，需要一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液位置，不能重復(fù)使用。不能重復(fù)使用。由于beckman有專用免疫儀器，所以beckman 原裝生化試劑時(shí)不包括免疫類試劑。如：APOA1,B, ASO等。Beckman無HDL, LDL試劑。機(jī)型機(jī)型 試劑位試劑位 R1/R2R1/R2 項(xiàng)目項(xiàng)目 速度速度 無無 ISEISE 樣本樣本 (ul)(ul) R1R1 (u

12、l)(ul) R2R2 (ul)(ul) 反應(yīng)液反應(yīng)液 (ul)(ul) CX4CX4 2424 2424 225225 3 3- -2525 CX5CX5 2424 2929 600600 3 3- -6969 CX7CX7 2424 3333 900900 3 3- -2525 CX9CX9 2424 3333 900900 3 3- -2525 LX20LX20 4141 7070 800800 3 3- -2525 200200- -327/6327/6- -7575 225225- -325325 試劑取出一次，如再放進(jìn)去，需要定標(biāo)。對(duì)于穩(wěn)定的單點(diǎn)定標(biāo)試劑（GLU,Tg)可以修改為f

13、actor方法，無需定標(biāo)。但多點(diǎn)定標(biāo)方式必須定標(biāo)。理論因數(shù)忘記乘2，結(jié)果低一半。71507150：19871987年推出，應(yīng)用實(shí)時(shí)質(zhì)控管理和半永久性年推出，應(yīng)用實(shí)時(shí)質(zhì)控管理和半永久性比色杯。比色杯。70607060：19931993年推出，應(yīng)用可變的反應(yīng)時(shí)間，可加入年推出，應(yīng)用可變的反應(yīng)時(shí)間，可加入4 4種試劑。種試劑。71707170：19941994年推出，應(yīng)用年推出，應(yīng)用5 5毫米光徑和觸摸式傳感毫米光徑和觸摸式傳感器。器。76007600D/PD/P：19981998年推出，應(yīng)用分析單元模塊化，非年推出，應(yīng)用分析單元模塊化，非同步控制方式，各模塊可獨(dú)立工作并進(jìn)行添加組合。同步控制方式，

14、各模塊可獨(dú)立工作并進(jìn)行添加組合。從緊湊型的從緊湊型的70207020到組合式的到組合式的76007600，都具有強(qiáng)大的功，都具有強(qiáng)大的功能，可以滿足各種項(xiàng)目的檢測(cè)需要。能，可以滿足各種項(xiàng)目的檢測(cè)需要。開放式的試劑系統(tǒng)。試劑和樣本微量化。開放式的試劑系統(tǒng)。試劑和樣本微量化。靈活的反應(yīng)時(shí)間，可自由控制。靈活的反應(yīng)時(shí)間，可自由控制。儀器線性寬，量程儀器線性寬，量程0-320000-32000。從從71707170以后，同樣一個(gè)項(xiàng)目可以同時(shí)輸入血清和尿液以后，同樣一個(gè)項(xiàng)目可以同時(shí)輸入血清和尿液兩套參數(shù)（不占試劑通道）。兩套參數(shù)（不占試劑通道）。全反應(yīng)過程監(jiān)測(cè)，可以察看任意時(shí)間反應(yīng)曲線全反應(yīng)過程監(jiān)測(cè)，可

15、以察看任意時(shí)間反應(yīng)曲線和吸光度，便于發(fā)現(xiàn)和解決問題。和吸光度，便于發(fā)現(xiàn)和解決問題。方法靈活：分析方法高達(dá)方法靈活：分析方法高達(dá)2020種，分析范圍涵蓋種，分析范圍涵蓋血液、尿液和免疫反應(yīng)、特殊項(xiàng)目檢查。血液、尿液和免疫反應(yīng)、特殊項(xiàng)目檢查。樣品可以自動(dòng)預(yù)稀釋，便于分析高值樣本。樣品可以自動(dòng)預(yù)稀釋，便于分析高值樣本。機(jī)機(jī)型型 試試劑劑位位 R R1 1/ /R R2 2 項(xiàng)項(xiàng)目目 （雙雙） 速速度度 無無 I IS SE E 樣樣本本 ( (u ul l) ) R R1 1 ( (u ul l) ) R R2 2 ( (u ul l) ) 反反應(yīng)應(yīng)液液 ( (u ul l) ) 7 76 60 0

16、0 0P P 4 44 4 8 80 00 0 2 2- -3 35 5 7 76 60 00 0D D 1 16 6 2 24 40 00 0 2 2- -2 20 0 2 20 0- -2 27 70 0 1 15 50 0- -3 38 80 0 7 71 17 70 0S S 4 45 5/ /4 45 5 8 86 6 8 80 00 0 2 2- -3 35 5 2 20 0- -2 27 70 0 1 15 50 0- -3 35 55 5 7 70 06 60 0 3 32 2/ /3 32 2 3 32 2 3 36 60 0 3 3- -5 50 0 5 50 0- -3

17、35 50 0 2 25 50 0- -5 50 00 0 7 70 08 80 0 3 33 3/ /3 33 3 4 49 9 3 36 60 0 2 2- -2 25 5 2 20 0- -2 27 70 0 1 15 50 0- -3 32 20 0 7 70 02 20 0 4 40 0 3 36 6 2 20 00 0 2 2- -5 50 0 2 20 0- -3 35 50 0 1 18 80 0- -5 50 00 0 7 71 15 50 0 3 32 2/ /3 32 2 6 60 00 0 2 25 50 0- - 7 71 18 80 0 3 33 3/ /3 33 3 8 86 6 8 80 00 0 1 1. .5 5- -3 35 5 2 20 0- -2 27 70 0 1 12 20 0- -3 30 00 0 小數(shù)點(diǎn) 定標(biāo)液的小數(shù)點(diǎn)精度，會(huì)影響K值，對(duì)于輸入理論因數(shù)的測(cè)定方