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文檔簡介
1、“傳統(tǒng)發(fā)酵技術的應用”知識歸納及試題例析一、知識歸納1、幾種常用發(fā)酵菌種的比較菌種項目酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物學分類真核生物原核生物真核生物原核生物代謝類型異養(yǎng)兼性厭氧異養(yǎng)需氧異養(yǎng)需氧異養(yǎng)厭氧繁殖方式適宜條件下出芽生殖二分裂生殖孢子生殖二分裂生殖生產(chǎn)應用釀酒釀醋制作腐乳制作泡菜發(fā)酵條件前期需氧,后期不需氧一直需氧一直需氧不需氧2、果酒、果醋、腐乳、泡菜制作中所用菌種及控制條件的比較 制作內(nèi)容比較項目 果酒果醋腐乳泡菜所用菌種酵母菌醋酸菌主要是為霉乳酸菌控制條件O2的有無無氧有氧有氧無氧最適溫度182530351518常溫時間控制1012天78天腌制8天左右腌制10天左右其他條件封閉充氣口適時
2、充氣控制鹽酒用量控制鹽水比例相關反應式3、果酒、果醋、腐乳和泡菜制作過程的比較及亞硝酸鹽含量的檢測比較項目果酒和果醋制作腐乳的制作制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量制作原理果酒:無氧呼吸 果醋:有氧呼吸多種微生物發(fā)酵泡菜制作:乳酸菌無氧呼吸亞硝酸鹽檢測:在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應后,與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料實驗流程圖挑選葡萄沖洗榨汁酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵果酒 果醋讓豆腐上長也毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制操作提示材料的選擇與處理;防止發(fā)酵液被污染;控制好發(fā)酵條件??刂坪貌牧系挠昧?;防止雜菌污染。泡菜壇的選擇;腌制的條件;測定亞硝酸鹽含量的操作。二、相關試題1(2
3、010北京理綜,1)在家庭中用鮮葡萄制作果酒時,正確的操作是()A讓發(fā)酵裝置接受光照 B給發(fā)酵裝置適時排氣C向發(fā)酵裝置通入空氣 D將發(fā)酵裝置放在45處2下列關于腐乳制作過程的說法,正確的是()A制作腐乳時只有毛霉發(fā)揮作用B豆腐的表面長出青色物質則標志著腐乳制作完成C在腐乳制作過程中必須有能產(chǎn)生蛋白酶的微生物參與D制作腐乳時加鹽是為了促進毛霉的生長3下列關于病毒、醋酸菌、毛霉的敘述,不正確的是()A病毒與后兩者比較,沒有細胞結構,遺傳物質可能是DNA或是RNAB醋酸菌是好氧菌,可以將葡萄糖分解成醋酸,其細胞結構中沒有核膜和核仁C在腐乳制作過程中,毛霉能產(chǎn)生蛋白酶,分解豆腐中的蛋白質為肽和氨基酸D
4、三者在培養(yǎng)過程中,只要培養(yǎng)基中有水、碳源、氮源和無機鹽,都能正常生長繁殖4(2010江蘇生物,7)下圖表示果酒和果醋制作過程中的物質變化過程,下列敘述正確的是()A過程和都只能發(fā)生在缺氧條件下B過程和都發(fā)生在酵母細胞的線粒體中C過程和都需要氧氣的參與D過程所需的最適溫度基本相同5(2011廣州一模,6)以下關于生物技術的說法不正確的是()A需借助胚胎移植技術才能獲得克隆牛B單倍體育種過程涉及脫分化和再分化C用自身干細胞培育的器官,移植后一般不會產(chǎn)生免疫排斥反應D果酒與果醋的制作過程需要保持缺氧狀態(tài)6(2010廣東理綜,25)小李嘗試制作果酒,他將葡萄汁放入已滅菌的發(fā)酵裝置中進行試驗(見圖),恰
5、當?shù)淖龇ㄊ牵p選)()A加入適量的酵母菌B一直打開閥b通氣C一直關緊閥a,偶爾打開閥b幾秒鐘D把發(fā)酵裝置放到4冰箱中進行實驗7下面是有關食醋和泡菜制作的實驗。請回答: (1)食醋可用大米為原料經(jīng)三步發(fā)酵來制作:第一步:大米經(jīng)蒸熟、冷卻后加入淀粉酶,將原料中的淀粉分解成(填中間產(chǎn)物),然后進一步分解成葡萄糖,這一過程可用(填淀粉指示劑)來檢測,因為該試劑遇淀粉呈藍色,遇上述中間產(chǎn)物呈紅色。第二步:用菌將葡萄糖轉化成乙醇,這一發(fā)酵過程中,玻璃發(fā)酵瓶不應完全密閉的主要原因是。第三步:用菌將乙醇轉化成乙酸,這一過程氧氣。(2)泡菜發(fā)酵過程中,會產(chǎn)生多種酸,其中主要是,還有少量的亞硝酸。對亞硝酸鹽的定量
6、測定可以用法,因為亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸的反應產(chǎn)物能與N1萘基乙二胺偶聯(lián)成色化合物。進行樣品測定時,還要取等量水進行同樣的測定,目的是。8(2011廣東肇慶一模,29)某生物興趣小組為了“探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化”,按如下左圖裝置進行了實驗,并使用如右圖所示的血球計數(shù)板對培養(yǎng)液中的酵母菌進行計數(shù)。請分析回答:(1)排氣口的膠管設計成長而彎曲的目的是。(2)實驗的最初階段,由于、,酵母菌的種群數(shù)量呈“J”型增長。(3)在上圖所示的計數(shù)室中,如果一個小方格內(nèi)酵母菌過多,難以數(shù)清,應當采取的措施是。 (4)本實驗沒有另設置對照實驗,原因是。為提高實驗的準確性,實驗時應進行。(5)請你設計表格
7、記錄實驗數(shù)據(jù)。9生物技術的廣泛應用給社會帶來了較大的經(jīng)濟效益,受到了社會的廣泛重視。請回答下列有關問題:(1)制作泡菜時需要測定亞硝酸鹽的含量,其方法是。亞硝酸鹽在特定的條件下會轉變?yōu)?,引起生物致癌。引起細胞癌變的原因是環(huán)境中的致癌因子使細胞中的 發(fā)生。、模板DNA、能量、游離的脫氧核苷酸和;在生物體內(nèi)DNA復制所必需的,而在PCR技術中不需要的成分是 。(3)為獲得一種能高效降解農(nóng)藥的細菌(目的菌),向培養(yǎng)基中加入某種化合物,將初步篩選得到的目的菌轉到固體培養(yǎng)基中,常采用的接種方法是 ;實驗結束后,使用過的培養(yǎng)基應該進行處理后再倒掉,這樣做是為了 。10低度的果酒、果醋具有一定的保健養(yǎng)生功能
8、。下圖是兩位同學制果酒和果醋時使用的裝置。同學甲用A(帶蓋的瓶子)裝置制葡萄糖,在瓶中加入適量葡萄汁,發(fā)酵溫度控制在1825,每隔12h左右將瓶蓋擰松一次(注意不是打開瓶蓋),之后再將瓶蓋擰緊。當發(fā)酵產(chǎn)生酒精后,再將瓶蓋打開,蓋上一層紗布,溫度控制在3035,進行制果醋的發(fā)酵。同學乙用B裝置,溫度控制與甲相同,不同的是制果酒階段充氣口用夾子夾緊外,排氣的橡膠管也用夾子夾住,并且每隔12h左右松一松夾子放出多余的氣體。制果醋階段適時向充氣口充氣。經(jīng)過20天左右,兩位同學先后完成了自己的發(fā)酵制作。據(jù)此回答有關問題:(1)酵母菌與醋酸桿菌在結構上的最大區(qū)別是后者 。從制酒和制醋兩階段對裝置的處理方式
9、判斷,酵母菌和醋酸桿菌的異化作用類型依次是。(2)同學甲在制酒階段,每隔12h左右就要將瓶蓋擰松一次,但又不打開,這樣做的目的是。用反應式表示出制酒過程剛開始時發(fā)生的主要化學變化: 。(3)B裝置中排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身相連,這樣做的原因是 。(4)制葡萄酒時要將溫度控制在1825,而制葡萄醋時要將溫度控制在3035,原因是。葡萄汁為酵母菌、醋酸桿菌等微生物的生長提供的營養(yǎng)成分是 。(5)制作過程中一般不需要額外添加酵母菌和醋酸桿菌即可完成。為了提高果酒品質也可在果汁中加入人工培養(yǎng)的酵母菌。利用 培養(yǎng)基可分離獲得較為純凈的酵母菌菌種,如在培養(yǎng)基中加入 可以從細菌和酵母菌的混合液中
10、分離出酵母菌。(6)為提高水果的出汁率,使果汁變得澄清,在果汁生產(chǎn)中常用到 。答案及解析1 B 2 C 3D4 C 5D 6 AC 7(1)第一步:糊精碘液第二步:酵母發(fā)酵過程中會產(chǎn)生大量CO2,使瓶內(nèi)壓力升高而可能引起爆裂第三步:醋酸桿需要消耗(2)乳酸(或有機酸)比色紫紅作為對照8(1)防止空氣中的雜菌污染(2)溫度等條件適宜,營養(yǎng)物質充足,沒有敵害和競爭(3)使酵母菌分布均勻,增加稀釋倍數(shù)。(4)該實驗時間上形成前后自身對照 重復實驗(取樣)(5) 時間次數(shù)12345671239、(1)比色法亞硝胺原癌基因和抑癌基因突變(2)DNA聚合酶引物解旋酶(3)平板劃線法防止造成環(huán)境污染 10(
11、1)沒有由核膜包圍的細胞核兼性厭氧型、需氧型(2)制酒階段的后期,酵母菌無氧呼吸會產(chǎn)生大量氣體,如不及時放出會把瓶子或瓶蓋脹破,不打開瓶蓋是防止氧氣和有害雜菌進入C6H12O56H2O6O26CO212H2O能量(3)防止污染(4)1825是酵母菌生長和發(fā)酵的合適溫度,3035是醋酸桿菌生長和發(fā)酵的合適溫度。 碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子(5)選擇青霉素(抗生素)(6)果膠酶“微生物的培養(yǎng)與應用”知識歸納及試題一、知識歸納1、培養(yǎng)基的分類和應用劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途物理性質 液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)基加凝固劑,如瓊脂觀察微生物的運動、分類、鑒定固體培養(yǎng)基加凝固劑,如瓊脂微
12、生物分離、鑒定、活菌計數(shù)化學組成天然培養(yǎng)基含化學成分不明確的天然物質 工業(yè)生產(chǎn) 合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分明確(用化學成分已知的化學物質配成) 分類、鑒定 目的用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學物質,以抑制不需要的微生物的生長,促進所需要的微生物的生長培養(yǎng)、分離出特定微生物鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點,在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品鑒別不同種類的微生物2、消毒與滅菌的區(qū)別比較項目消毒滅菌條件使用較為溫和的理化方法使用強烈的理化因素結果殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子) 殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子 適用實驗操作的空間、操作者的衣服和手 微生物的培養(yǎng)器皿、
13、接種用具和培養(yǎng)基等 常用方法煮沸消毒法(如在100,煮沸56 min)、巴氏消毒法(如在80,煮15 min);使用酒精、氯氣、石炭酸等化學藥劑進行消毒 灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌 3、三種常用滅菌方法的比較滅菌方法滅菌條件滅菌時間適用材料或用具灼燒滅菌酒精燈火焰的充分燃燒層直至燒紅接種環(huán)、接種針或其他金屬工具干熱滅菌干熱滅菌箱內(nèi),16017012 h玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)和金屬用具等高壓蒸汽滅菌100kPa,1211530 min培養(yǎng)基等4、微生物的純化培養(yǎng)包括培養(yǎng)基的制備和純化微生物兩個階段,純化微生物時常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。平板劃線法:通過接種環(huán)在瓊脂固體培
14、養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后,就可以得到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體,這就是菌落。稀釋涂布平板法:將菌液進行一系列梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。5、微生物的分離和計數(shù)(1)土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)篩選菌株:利用選擇培養(yǎng)基篩選菌株。測定微生物數(shù)量的常用方法:統(tǒng)計菌落數(shù)目和顯微鏡直接計數(shù)。土壤取樣樣品的稀釋微生物的培養(yǎng)與觀察。(2)分解纖維素的微生物的分離實驗原理即:可根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈來篩選
15、纖維素分解菌。流程:土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋涂布平板挑選菌落。二、相關試題1(2009安徽理綜,6)下列是關于“檢測土壤中細菌總數(shù)”實驗操作的敘述,其中錯誤的是 ()A用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL,分別涂布于各組平板上C將實驗組和對照組平板倒置,37恒溫培養(yǎng)2448小時D確定對照組無菌后,選擇菌落數(shù)在300以上的實驗組平板進行計數(shù)2下列對四種微生物相關的敘述,錯誤的是()ACO2和NH3分別是硝化細菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自NH3的氧化BCO2和硝酸鹽分別是褐藻的碳源和氮源,該生物所需的能源來自太
16、陽能C糖類和N2是乳酸菌的碳源和氮源,該生物所需的能源來自乳酸的氧化分解D葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源,但CO2一定不是酵母菌的碳源3酵母菌的培養(yǎng)最好使用下列哪種培養(yǎng)基()A牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基B麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基C蛋白胨酵母膏培養(yǎng)基DMS培養(yǎng)基4下列關于微生物的培養(yǎng)和運用的敘述,錯誤的是()A通過消毒不能殺死物體內(nèi)所有的微生物B利用平板劃線法可以統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目C平板劃線法和稀釋涂布法常用于微生物的接種D微生物所用的培養(yǎng)基成分和植物組織培養(yǎng)用的培養(yǎng)基成分不同5下列有關微生物的培養(yǎng)或純化的敘述,錯誤的是()A微生物在培養(yǎng)前要先對培養(yǎng)基進行滅菌處理再接種B培養(yǎng)液中溶氧量的變化會影響酵母菌的繁
17、殖和代謝途徑C分離純化微生物的常用方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法D分離自養(yǎng)型微生物的方法是用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基6在做分離“分解尿素的細菌”實驗時,A同學從對應10-6培養(yǎng)基中篩選出大約150個菌落,而其他同學只選擇出大約50個菌落。下列有關敘述正確的是(雙選)()AA同學出現(xiàn)這種結果的原因是土樣不同B可以將A同學配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進行培養(yǎng)作為空白對照,以證明培養(yǎng)基是否受到污染C讓其他同學用與A同學一樣的土壤進行實驗,如果結果與A同學一樣,則可證明A同學無誤DB、C選項的實驗思路都遵循了實驗的對照原則7(2009寧夏理綜,40)(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中,除考慮營養(yǎng)條件外,
18、還要考慮、和滲透壓等條件。由于該細菌具有體積小、結構簡單、變異類型容易選擇、等優(yōu)點,因此常作為遺傳學研究的實驗材料。 (2)在微生物培養(yǎng)操作過程中,為防止雜菌污染,需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌處理,其中對培養(yǎng)皿進行滅菌常用的方法是;操作者的雙手需要進行清洗和;靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅,其原因是紫外線能使蛋白質變性,還能。 (3)若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù),要想使所得估計值更接近實際值,除應嚴格操作、多次重復外,還應保證待測樣品稀釋的。 (4)通常,對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的。 (5)培養(yǎng)大腸桿菌時,在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于
19、固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是。 (6)若用大腸桿菌進行實驗,使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過處理后才能丟棄,以防止培養(yǎng)物的擴散。8(2010山東理綜,34)生物柴油是一種可再生的清潔能源,其應用在一定程度上能夠減緩人類對化石燃料的消耗??茖W家發(fā)現(xiàn),在微生物M產(chǎn)生的脂肪酶作用下,植物油與甲醇反應能夠合成生物柴油(如下圖)。(1)篩選產(chǎn)脂肪酶的微生物M時,選擇培養(yǎng)基中添加的植物油為微生物生長提供,培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是法。(2)測定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量,可選用法直接計數(shù);從微生物M分離提取的脂肪酶通常需要檢測,以確定其應用價值;為降低生物柴油生產(chǎn)成本,可利用技術使脂肪酶能夠重復使用。(3)若需克
20、隆脂肪酶基因,可應用耐熱DNA聚合酶催化的技術。9從自然菌樣篩選較理想的生產(chǎn)菌種的一般步驟是:采集菌樣富集培養(yǎng)純種分離性能測定。(1)不同微生物的生存環(huán)境不同,獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣,然后再按一定的方法分離、純化。培養(yǎng)嗜鹽菌的菌樣應從環(huán)境采集。(2)富集培養(yǎng)指創(chuàng)設僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件,使其在群落中的數(shù)量大大增加,從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對產(chǎn)耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應選擇的培養(yǎng)基,并在條件下培養(yǎng)。(3)下面兩圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解,請分析接種的具體方法。獲得圖A效果的接種方法是,獲得圖B效果的接種方法是。(4
21、)配制培養(yǎng)基時各種成分在溶化后分裝前必須進行,接種前要進行,在整個微生物的分離和培養(yǎng)中,一定要注意在條件下進行。10(2011廣東汕頭一模,26)有機磷農(nóng)藥殺蟲能力強,在糧食增產(chǎn)、傳染病防治等方面作用顯著,但污染環(huán)境并危害人體健康。在眾多的有機磷農(nóng)藥殘留物降解技術中,生物降解有高效、徹底、無二次污染的優(yōu)勢,其中,微生物由于具有較復雜多樣的代謝途徑,是有機磷農(nóng)藥降解的主力軍。(1)在富含有機磷農(nóng)藥殘留成分的土壤中,更容易分離到能降解農(nóng)藥的微生物。根據(jù)達爾文的理論,這是因為有機磷農(nóng)藥對于此類微生物具有作用。(2)微生物具有復雜多樣的代謝途徑,從根本上說,是由微生物的所決定的。(3)微生物主要通過酶
22、促反應,將有機磷農(nóng)藥分解為無毒或者低毒的化合物。研究發(fā)現(xiàn),利用有機磷農(nóng)藥降解酶凈化農(nóng)藥比利用微生物菌體更有效。微生物群體中,最初的降解酶基因是由于而產(chǎn)生的。從微生物中提取到一種降解酶后,需要確定在何種環(huán)境中該酶的活性高,檢測酶活性高低的指標可以是。從天然菌株中提取降解酶的含量低,成本高,難以大量應用,科學家通過基因工程解決了這一難題。他們在獲得降解酶基因后,通過技術對該基因進行大量擴增,再利用酶、酶和運載體等作為基本工具,通過一定的手段構建,并將其導入大腸桿菌體內(nèi),從而實現(xiàn)了高效表達。天然的降解酶對有機磷農(nóng)藥的降解率比較低,不能達到預期效果,科學家對降解酶特定部位的氨基酸序列進行重新設計、改造
23、,顯著提高了其降解能力,這項技術稱為。復習之四答案及解析1 D 2 C 3 B 4 B 5D 6 BC 7(1)溫度pH易培養(yǎng)生活周期短 (2)干熱滅菌法消毒損傷DNA的結構(3)比例合適 (4)鑒定(或分類) (5)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(6)滅菌8(1)碳源高壓蒸汽滅菌 (2)顯微鏡直接計數(shù)酶活性(或:酶活力)固定化酶(或:固定化細胞)(3)PCR9(1)海灘等高鹽(2)以淀粉為唯一碳源高溫(3)稀釋涂布平板法平板劃線法(4)pH調(diào)整高壓蒸汽滅菌無菌“植物的組織培養(yǎng)技術”知識歸納及試題 一、知識歸納1、菊花莖的組織培養(yǎng)與月季的花粉培養(yǎng)的比較
24、比較項目菊花莖的組織培養(yǎng)月季的花藥培養(yǎng)理論依據(jù)細胞的全能性基本過程脫分化、再分化影響因素選材、營養(yǎng)、激素、pH、溫度、光照等 選材、營養(yǎng)、激素、pH、溫度等 比較材料選取生長旺盛的嫩枝單核靠邊期的花粉pH5.85.8溫度182225光照每日光照12h開始時不需要光照,幼小植株形成后才光照操作流程制備培養(yǎng)基外植體消毒接種培養(yǎng)移栽栽培 選材材料消毒接種和培養(yǎng)篩選和誘導移栽栽培選育 2、植物激素(生長素和細胞分裂素)對實驗結果的影響影響因素實驗結果植物激素的濃度根據(jù)生長素作用的兩重性:低濃度促進生長,高濃度抑制生長,甚至殺死植物植物激素用量生長素細胞分裂素有利于根的分化、抑制芽的形成生長素細胞分裂素
25、有利于芽的分化、抑制根的形成生長素細胞分裂素促進愈傷組織的形成使用順序先生長素,后細胞分裂素有利于細胞分裂,但細胞不分化先細胞分裂素,后生長素細胞既分裂也分化同時使用分化頻率提高3、植物組織培養(yǎng)技術與微生物培養(yǎng)技術的比較比較項目植物組織培養(yǎng)微生物培養(yǎng)含義在無菌條件下,將離體的植物體器官或組織接種在適當?shù)呐囵B(yǎng)基上進行培養(yǎng),最終發(fā)育成完整植物體在無菌條件下,在適宜的營養(yǎng)和環(huán)境條件下對微生物的培養(yǎng)培養(yǎng)基成分水、礦質元素、蔗糖、維生素、有機添加物和植物激素等水、無機鹽、碳源、氮源等特殊操作要求嚴格控制無菌操作,在培養(yǎng)過程中要更換培養(yǎng)基,調(diào)節(jié)細胞分裂素和生長素的比例嚴格控制無菌操作,整個培養(yǎng)過程無需更換
26、培養(yǎng)基注:在這兩種技術中均需要一定的營養(yǎng)物質,但營養(yǎng)物質的劃分標準不同。二、相關試題1利用菊花的莖段進行組織培養(yǎng)過程中,下列哪項操作或條件是可以省略的()A消毒滅菌B適宜的溫度C適宜的養(yǎng)料D添加生長素和細胞分裂素2(2010浙江理綜,6)將無根的非洲菊幼苗轉入無植物激素的培養(yǎng)基中,在適宜的溫度和光照等條件下培養(yǎng)一段時間后,應出現(xiàn)的現(xiàn)象是()3下列關于植物組織培養(yǎng)的敘述中,正確的是()A為了提供營養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓,培養(yǎng)基中應添加葡萄糖B培養(yǎng)液中的生長素和細胞分裂素會影響愈傷組織的生長和分化C器官、組織的細胞在不離體的情況下必須通過脫分化才能形成愈傷組織D同一株綠色開花植物不同部位的細胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的
27、愈傷組織的基因是相同的4植物組織培養(yǎng)的特點不包括()A一般需經(jīng)歷脫分化和再分化兩個過程B培養(yǎng)抗病毒植株C不改變原植物的基因型D通過平衡的植物激素配比進行調(diào)控5在菊花的組織培養(yǎng)操作完成了34天后,觀察同一溫室中的外植體,發(fā)現(xiàn)有的瓶內(nèi)外植體正常生長,有的瓶內(nèi)外植體死亡,你認為外植體死亡的原因不可能是()A接種時培養(yǎng)基滅菌不徹底B接種工具灼燒后未待冷卻就接種外植體C愈傷組織形成初期沒有給予充足的光照D培養(yǎng)過程中保持溫度、pH的適宜,但沒有及時調(diào)整各種營養(yǎng)物質、激素的比例6下列關于植物組織培養(yǎng)的敘述中,正確的是(雙選)()A培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供營養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓B培養(yǎng)時先使用生長素后使用細胞分裂
28、素,細胞既能分裂,又能分化C離體器官或組織的細胞都必須通過脫分化才能形成愈傷組織D在進行花藥離體培養(yǎng)時確定花粉發(fā)育時期可用剛果紅染色法7植物組織培養(yǎng)技術指的是在含有營養(yǎng)物質及植物生長物質的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)離體植物組織(器官或細胞)并誘導使其長成完整植株的技術。請回答下列問題:(1)植物組織培養(yǎng)用到的是固體培養(yǎng)基,原因是培養(yǎng)基中添加了,培養(yǎng)基的主要成分是和有機物、植物激素。(2)培養(yǎng)基中常要添加,這兩種激素的影響植物細胞的發(fā)育方向。如果外植體是菊花的莖段,則不必添加植物激素,其原因是。(3)外植體要經(jīng)過(填消毒或滅菌)后,才能接種。8(2010安徽理綜,31)草莓生產(chǎn)上傳統(tǒng)的繁殖方式易將所感染的病
29、毒傳播給后代,導致產(chǎn)量降低。品質變差。運用微型繁殖技術可以培育出無病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本過程如下:外植株愈傷組織芽、根植株請回答:(1)微型繁殖培育無病毒草莓苗時,一般選取作為外植體,其依據(jù)是。(2)在過程中,常用的MS培養(yǎng)基主要成分包括大量元素、微量元素和,在配制好的培養(yǎng)基中,常常需要添加,有利于外植體啟動細胞分裂形成愈傷組織。接種后25d,若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染,原因可能是。(3)在過程中,愈傷組織在誘導生根的培養(yǎng)基中未形成根,但分化出了芽,其原因可能是。9(2009廣州一模,38)下圖是月季花藥離體培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑,請據(jù)圖回答有關問題:(1)選用的材料合適與否是成功誘導
30、出花粉植株的重要因素,一般來說選用期的花粉可提高成功率。選擇花粉時,一般要通過來確定花粉是否處于合適的發(fā)育期,這時需要對花粉的細胞核進行染色,常用的染色劑是。 (2)上圖中花藥經(jīng)脫分化產(chǎn)生胚狀體還是愈傷組織主要取決于培養(yǎng)基中。(3)胚狀體與愈傷組織在結構上的主要區(qū)別在于愈傷組織的細胞排列疏松無規(guī)則,是一種高度的薄壁細胞,胚狀體與發(fā)育形成的胚有類似的結構,即具有胚芽、胚軸和胚根。(4)無菌技術也是成功誘導出花粉植株的重要因素,請說明下列各項需要消毒,還是需要滅菌。培養(yǎng)基培養(yǎng)皿接種環(huán)花蕾實驗操作者的雙手三角錐形瓶。(填編號)需要滅菌,(填編號)需要消毒。(5)試管苗移栽到土壤前,通常要進行壯苗處理
31、,應如何壯苗?。 10(2010寧夏理綜,38)請回答:(1)植物微型繁殖技術屬于植物組織培養(yǎng)的范疇。該技術可以保持品種的,繁殖種苗的速度。離體的葉肉細胞在適宜的條件下培養(yǎng),最終能夠形成完整的植株,說明該葉肉細胞具有該植物的全部。(2)把試管苗轉接到新的培養(yǎng)基上時,需要在超凈工作臺上進行,其原因是避免的污染。(3)微型繁殖過程中,適宜濃度的生長素單獨使用可誘導試管苗,而與配比適宜時可促進芽的增殖。若要抑制試管苗的生長,促使愈傷組織產(chǎn)生和生長,需尊使用的生長調(diào)節(jié)劑是(脫落酸、2,4D)。(4)將某植物試管苗培養(yǎng)在含不同濃度蔗糖的培養(yǎng)基上一段時間后,單株鮮重和光合作用強度的變化如圖。據(jù)圖分析,隨著
32、培養(yǎng)基中蔗糖濃度的增加,光合作用強度的變化趨勢是,單株鮮重的變化趨勢是。據(jù)圖判斷,培養(yǎng)基中不含蔗糖時,試管苗光合作用產(chǎn)生的有機物的量(能、不能)滿足自身最佳生長的需要。(5)據(jù)圖推測,若要在誘導試管苗生根的過程中提高其光合作用能力,應(降低,增加)培養(yǎng)基中蔗糖濃度,以便提高試管苗的自養(yǎng)能力。答案及解析1答案:D解析:菊花的莖段組織培養(yǎng)比較容易,一般不必添加植物激素。2答案:B解析:植物組織培養(yǎng)過程中,由外植體脫分化形成愈傷組織需要一定量的生長素和細胞分裂素,愈傷組織再分化形成根、芽的過程也需要一定濃度的生長素和細胞分裂素,且生長素和細胞分裂素的不同配比對形成根、芽的影響不同。本題中的無根幼苗本
33、身就能夠產(chǎn)生一定量的生長素和細胞分裂素,能夠促使基部細胞脫分化、再分化出根來,所以會出現(xiàn)B項現(xiàn)象。3答案:B解析:為了提供營養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓,培養(yǎng)基中應添加的是蔗糖。只有處于離體的器官、組織的細胞才能通過脫分化形成愈傷組織。采用綠色開花植物的生殖器官部位(如花藥)進行培養(yǎng)獲得的愈傷組織的基因只是體細胞的一半。4答案:B解析:植物組織培養(yǎng)的原來是西北的全能性,屬于無性繁殖,不改變原植物的基因型。通過植物組織培養(yǎng)可以培養(yǎng)無病毒植株,而培養(yǎng)抗病毒植株要通過基因工程。5答案:C解析:由于植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小,抗性差,所以對培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的生
34、長,如一些細菌、真菌等的生長,而培養(yǎng)基一旦受到微生物的污染,就會導致實驗前功盡棄,因此要進行嚴格的無菌操作。培養(yǎng)的不同階段,對主要營養(yǎng)物質和激素的需求不同,所以培養(yǎng)過程中要及時調(diào)整各種營養(yǎng)物質、激素的比例。愈傷組織形成過程中,細胞還沒有開始再分化,沒有葉綠素和葉綠體的形成,不可能進行光合作用,因此愈傷組織形成初期不需要充足的光照。6答案:AC解析:培養(yǎng)時先使用生長素后使用細胞分裂素,有利于細胞分裂,但細胞不分化。在進行花藥離體培養(yǎng)時確定花粉發(fā)育時期可用醋酸洋紅法或焙花青鉻礬法;剛果紅染色法是通過顏色反應對纖維素分解菌進行篩選。7答案:(1)瓊脂(凝固劑)大量元素、微量元素(2)生長素和細胞分裂
35、素用量比例菊花的莖段組織培養(yǎng)比較容易(3)消毒解析:在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂后,制成瓊脂固體培養(yǎng)基,用于植物組織培養(yǎng)。用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基,其主要成分包括大量元素、微量元素、有機物。常常需要添加植物激素。植物激素中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素。當同時使用這兩類激素時,兩者用量的比例影響植物細胞的發(fā)育方向。8答案:(1)莖尖、根尖不含病毒 (2)有機物植物激素外植體消毒不徹底 (3)培養(yǎng)基中生長素類物質和細胞分裂素類物質用量的比值偏低解析:(1)因莖尖(或根尖)病毒極少,甚至無病毒,所以常用其作為外植體培育無病毒植株。(2)在植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)
36、基中,除了添加植物必需的礦質元素外,還要添加有機物,添加植物激素有利于啟動細胞分裂實現(xiàn)脫分化形成愈傷組織并且可誘導愈傷組織細胞再分化過程。若對外植體消毒不徹底,會造成外植體邊緣局部污染。(3)在培養(yǎng)基中生長素與細胞分裂素的用量比值不同,誘導生根發(fā)芽結果不同,當比值低時,有利于發(fā)芽,比值高時,有利于生根。9答案:(1)單核鏡檢(顯微鏡觀察)醋酸洋紅(2)激素的種類及其濃度配比(3)液泡化正常受精卵(或受精卵)(4)(5)將試管苗移栽到經(jīng)消毒過的培養(yǎng)基中生活一段時間,等幼苗長壯后再移栽到土壤中解析:(1)單核期花粉對離體刺激敏感,選用該期花粉可提高培養(yǎng)的成功率,選擇花粉時可用顯微鏡觀察、篩選;對花
37、粉細胞核染色應該選擇堿性染料,常用醋酸洋紅。(2)細胞培養(yǎng)成植株的兩條途徑取決于植物激素的種類及比例,尤其是生長素和細胞分裂素。(3)愈傷組織細胞的特點是細胞排列疏松、無規(guī)則、高度液泡化;胚狀體是具有與胚相似的結構,即具有胚芽、胚軸和胚根。(4)滅菌對象為培養(yǎng)基和實驗器材,消毒對象為要保持活性的材料和實驗者自身。(5)壯苗就是使試管苗逐步適應外界環(huán)境的做法。10答案:(1)遺傳性快遺傳信息(2)微生物(3)生根細胞分裂素2,4D(4)逐漸減小先增加后下降不能(5)降低解析:植物組織培養(yǎng)技術是利用植物細胞全能性的原理進行的,是植物細胞工程的基礎。在操作過程應注意無菌操作,避免雜菌污染,因為培養(yǎng)過
38、程中使用的培養(yǎng)基營養(yǎng)物質豐富,適宜濃度的生長素可以誘導試管苗生根,而如果要促進愈傷組織形成芽,則需要與細胞分裂素配比,促進愈傷組織產(chǎn)生和生長,應使用2,4D。酶研究及應用、DNA和蛋白質技術、植物有效成分的提取檢測題基礎篇(A卷)一 選擇題(每小題只有一個選項符合題意。每小題2分,共20分)1從幾千年前到現(xiàn)在,酶制劑就安全地在被使用在工業(yè)、美容和口腔護理產(chǎn)品、紡織品、食品(如酸奶酪)以及芝士、啤酒和白酒等的發(fā)酵生產(chǎn)過程中。下列各項中,不屬于酶制劑的是( )A蛋白酶 B脂肪酶 C淀粉酶 D麥芽糖酶2提取植物芳香油的方法可以根據(jù)其原料不同而不同。從柑橘、檸檬等植物原料中提取植物芳香油,通常采用的方
39、法是( )A水中蒸餾 B水下蒸餾 C壓榨法 D萃取法3固定化酶技術是近幾年新興發(fā)展起來的一項酶應用技術,它很好的解決了酶的重新利用的能力,大大提高了酶的利用率,從而避免了酶的浪費問題。下列關于固定化酶技術的說法正確的是( )A固定化酶技術就是固定反應物,將酶依附著載體圍繞反應旋轉的技術B固定化酶的優(yōu)勢在于能催化一系列的酶促反應C固定化酶中的酶無法重復利用D固定化酶是將酶固定在一定空間內(nèi)的技術4下表是某種生物活性洗衣粉的成分及用法說明,下列對資料表明的信息理解不正確的是( )A這種洗衣粉較易清除衣服上的蛋清污漬B該蛋白酶在60以上將會失去活性C這種洗衣粉可除去衣料上的各種污漬D這種洗衣粉不能用于
40、洗滌真絲織物5PCR技術又稱聚合酶鏈式反應,現(xiàn)在已成為分子生物學實驗室的一種常規(guī)手段,它可以在體外很短的時間內(nèi)將DNA大量擴增。你認為下列符合在體外進行PCR反應條件的一組是( )穩(wěn)定的緩沖液環(huán)境 DNA模板 合成引物 四種脫氧核苷酸DNA聚合酶 DNA解旋酶 限制性核酸內(nèi)切酶 溫控設備A B C D6蛋白質的分離與提純技術是蛋白質研究的重要技術,下列有關敘述不正確的( )A根據(jù)蛋白質分子不能通過半透膜的特性,可將樣品中各種不同蛋白質分離B根據(jù)蛋白質所帶電荷性質的差異及分子大小,可通過電泳分離蛋白質C根據(jù)蛋白質相對分子質量的大小,可通過凝膠色譜法分離蛋白質D根據(jù)蛋白質的分子大小、密度不同,可通
41、過離心沉降法分離蛋白質7下列有關PCR技術的實驗過程敘述,不正確的是( )A變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵,也可利用解旋酶實現(xiàn)B復性過程中引物與DNA模板鏈的結合是依靠堿基互補配對原則完成的C延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸DPCR與細胞內(nèi)DNA復制相比所需酶的最適溫度較高8從細胞中提取某種特定的蛋白質比提取DNA難度大,其原因不是( )A蛋白質對溫度、鹽濃度、pH等條件更敏感,更易失活B蛋白質的空間結構多樣,理化性質各不相同,使得蛋白質的提取沒有統(tǒng)一的方法C提取某種特定的蛋白質需據(jù)其特性摸索提取的程序D提取血紅蛋白程序可分為樣品處理、粗分離、純化、純度的鑒定
42、四大步9生物組織中有機物的提取方法有多種,如電泳、壓榨、萃取等,不同的有機物提取方法各不相同。下列有關的說法中不正確的是( )A香料工業(yè)中“液體黃金”玫瑰油的提取中要求不含有任何添加劑或化學原料,其提取方法主要是水蒸氣蒸餾B杏仁油富含礦物質和維生素,主要通過壓榨法提取C用萃取法提取胡蘿卜素,萃取的效率只受萃取劑的性質和使用量的影響D為了純化提取的DNA,往DNA濾掖中加入嫩肉粉,其目的是木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質10下列是關于血紅蛋白的提取和分離實驗中關鍵步驟,其中正確的是( )A蛋白質的提取和分離一般可分為粗分離、樣品處理、純化、純度鑒定等4步B蛋白質的提取和分離實驗可以以豬、牛、羊、蛙等動物
43、的血液為材料分離血紅蛋白C對樣品的處理過程分為紅細胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、透析和分離血紅蛋白等D對蛋白質的純化和純度鑒定的方法使用最多的是SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳二 非選擇題(30分)11(15分)生物組織中有機物的提取方法有多種,除以上方法外還有電泳、壓榨、萃取等,不同的有機物提取方法各不相同。香料工業(yè)中“液體黃金”玫瑰油的提取中要求不含有任何添加劑或化學原料,其提取方法主要是_。杏仁油富含礦物質和維生素,是一種質地輕柔、高滲透性的保濕劑,主要通過_法提取。用萃取法提取胡蘿卜素,萃取的效率主要取決于_;新鮮的胡蘿卜在干燥時,如果溫度太高,會導致_。DNA提取時,為了純化提取的DNA,往DN
44、A濾液中加入嫩肉粉,目的是_;DNA鑒定時,可以使用_試劑并在沸水中加熱產(chǎn)生藍色沉淀,工業(yè)生產(chǎn)果汁時,常常利用果膠酶破除果肉細胞壁以提高出果汁率。為研究溫度對果膠酶活性的影響,某學生設計了如下實驗:將果膠酶與蘋果泥分裝于不同試管,在10水浴中恒溫處理lOmin(如圖A)。將步驟處理后的果膠酶和蘋果泥混合,再次在10水浴中恒溫處理lOmin(如圖B)。將步驟處理后的混合物過濾,收集濾液,測量汁量(如圖C)。在不同溫度條件下重復以上實驗步驟,并記錄果汁量如下:溫度/1020304050607080果汁量/ml81315251512ll10根據(jù)上述實驗,請分析回答下列問題:(1)果膠酶能破除細胞壁,
45、是因為果膠酶可以促進細胞壁中 的水解。(2)實驗結果表明,當溫度為 時果汁量最多,此時果膠酶的活性 。當溫度再升高時,果汁量降低,說明 。(3)實驗步驟的目的是 。12(15分)某生物興趣小組在學習完“蛋白質的提取和分離”后,聯(lián)系相關實驗,準備從豬肝臟研磨液中初步提取過氧化氫酶,設計的“過氧化氫酶提取、分離流程圖”如下:試回答下列有關問題:向肝細胞懸液中加入一定量的pH=70的緩沖液并充分攪拌,可以破碎肝細胞,破碎細胞的原理是 。與使用蒸餾水相比,使用緩沖液的優(yōu)點是 。蛋白質粗分離階段透析的目的是 。電泳利用了待分離樣品中各種分子的 等的差異,而產(chǎn)生不同遷移速度,實現(xiàn)各種分子的分離。實驗小組以
46、3%過氧化氫溶液和獲得的過氧化氫酶為材料進行溫度對酶催化活性影響的探究,得到下圖所示的結果,根據(jù)實驗結果得出“過氧化氫酶能耐受100高溫”的結論。請問這一結論是否可靠? 為什么? 。能力篇(B卷)一 選擇題(每小題只有一個選項符合題意。每小題2分,共20分)1四瓶失去標簽的無色透明的液體各裝有:混有少量纖維素分解菌的清水、丙球蛋白(一種抗體)溶液、溶解有DNA分子的0015mol/L 的NaCl溶液、混有少量葡萄糖的生理鹽水溶液。依次利用下列哪組物質即可鑒別出來( )剛果紅培養(yǎng)基 雙縮脲試劑 蘇丹染液 二苯胺試劑 班氏試劑 斐林試劑 碘液A B C D2對于蒸餾法、萃取法、壓榨法來提取芳香油各
47、自的適用范圍的敘述正確的一項是( )A蒸餾法適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強的芳香油B壓榨法適用于范圍廣,要求原料的顆粒要盡可能細小,能充分浸泡在有機溶液中C萃取法適用于提取柑橘、檸檬等易焦糊的原料D玫瑰油、薄荷油、熏衣草油等芳香油主要通過壓榨法獲得3某同學用實驗來探究pH值對酶活性的影響。他準備了5份含有的等量果膠酶溶液的試管,用01%的鹽酸或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)至不同的pH值,每支試管加五塊01cm3的正方體蘋果塊,試管均置于25室溫條件下。下列的說法中,不合理的一項是( )A選取pH值梯度可以是5、6、7、8、9B為使實驗在更短的時間內(nèi)完成,可以將溫度由25提高到大約80C生成果汁量與酶活
48、性強弱的關系是酶活性越大,果膠分解越快,生成的果汁越多D可根據(jù)果汁的澄清度來判斷最適pH值4提取玫瑰精油的實驗流程如下圖所示。其中有關的說法不正確的是( )A提取的原料鮮玫瑰花和加入清水的比例是1:4B為了加速油水混合物分層一般需要加入氯化鈉, 分離的油層還需加入無水硫酸鈉將其除去多余的水分C步中使用水上蒸餾更簡便易行D中需過濾操作,目的是除去固體硫酸鈉5下圖是應用固定化酵母進行葡萄糖發(fā)酵的裝置,下列說法中不正確的是 ( )A為使固定化酵母可以反復使用,實驗過程一定要在無菌條件下進行B加入反應液后應保持活塞1始終打開,活塞2則必須關閉C裝置的長導管主要是為了釋放CO2并防止雜菌進入反應柱 D加入的反應液濃度不能過高以免酵母細胞因失水過多而死亡6 在采用雞血為材料對DNA進行粗提取的實驗中,若需進一步提取雜質較少的DNA,可以依據(jù)的原理是( )A在
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