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1、 DNA的提取和分離及鑒定知識(shí)梳理知識(shí)梳理1.DNA的粗提取與鑒定(1)基本原理0.14mol/LNaCl酒精二苯胺(2)操作流程材料的選取:選用 含量相對(duì)較高的生物組織 破碎細(xì)胞(以雞血為例):雞血細(xì)胞加 用玻璃棒攪 拌用紗布過(guò)濾收集濾液 去除雜質(zhì):利用DNA在 中溶解度不同,通過(guò)控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì)DNA蒸餾水不同濃度的NaCl溶液 DNA的析出:將處理后的溶液過(guò)濾,加入與濾液體積相等 的、冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的 溶液 DNA的鑒定:在溶有DNA的溶液中加入二苯胺試劑,混合 均勻后將試管在沸水中加熱5 min,溶液變 成 酒精藍(lán)色思維診斷(1)進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)時(shí),加入
2、洗滌劑后用力進(jìn)行快速、充分的研磨(2013江蘇,4A)( )(2)洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度(2012江蘇,18A)( )(3)將制備的含有DNA的濾液加入6075 的恒溫水浴箱中保溫1015 min,可以將DNA析出( )題組一題組一DNA的粗提取與鑒定過(guò)程分析的粗提取與鑒定過(guò)程分析1.“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中,操作正確的是()A.取制備好的雞血細(xì)胞液510 mL注入燒杯中,迅速加入物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液20 mL,同時(shí)用玻璃棒沿同一方向快速攪拌5 min,可使血細(xì)胞破裂,釋放出DNAB.整個(gè)DNA提取過(guò)程中,兩次加蒸餾水的目的都是
3、為了降低溶液中NaCl的濃度,使DNA分子的溶解度達(dá)到最低,析出DNA分子解題探究解題探究C.整個(gè)DNA提取操作中,兩次加入2 mol/L的NaCl溶液,目的都是使DNA盡可能多地溶解在NaCl溶液中D.DNA鑒定操作中,只要向溶有DNA的NaCl溶液中加入4 mL的二苯胺試劑,即可出現(xiàn)藍(lán)色c2.做DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)時(shí),實(shí)驗(yàn)材料用雞血而不用豬血的原因是()A.雞血的價(jià)格比豬血的價(jià)格低B.豬的成熟紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核,不易提取到DNAC.雞血不凝固,豬血會(huì)凝固D.用雞血提取DNA比用豬血提取操作簡(jiǎn)便B歸納提升DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中的的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中的“2、3、4、5”加蒸餾水2次加到雞血
4、細(xì)胞液中,使血細(xì)胞吸水漲破;加到含DNA的2 mol/L的NaCl溶液中,使NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度下降到0.14 mol/L,使DNA析出用紗布過(guò)濾3次過(guò)濾血細(xì)胞破裂液,得到含細(xì)胞核物質(zhì)的濾液;濾取0.14 mol/L的NaCl溶液中析出的DNA(黏稠物);過(guò)濾溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液用NaCl溶液4次加2 mol/L的NaCl溶液,溶解提取的細(xì)胞核物質(zhì);用0.14 mol/L的NaCl溶液使DNA析出;用2 mol/L的NaCl溶液,溶解濾取的DNA黏稠物;用2 mol/L的NaCl溶液,溶解絲狀物用于鑒定DNA要語(yǔ)強(qiáng)記要語(yǔ)強(qiáng)記1.DNA在NaCl溶液中的溶解度隨著NaC
5、l溶液濃度的改變而改變,在物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L時(shí)的溶解度最小。探究高考 明確考向1.(2014江蘇,16)下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述,錯(cuò)誤的是()A.酵母和菜花均可作為提取DNA的材料B.DNA既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸餾水C.向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?,可?jiàn)玻棒上有白色絮狀物D.DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱,冷卻后變藍(lán)4321C567891011121312344.下表是關(guān)于DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中所使用的材料、操作及其作用,表述正確的是() 試劑操作作用A 檸檬酸鈉溶液與雞血混合防止DNA凝固B蒸餾水與雞血細(xì)胞混合保持細(xì)胞形狀C蒸餾水加入
6、溶解有DNA的NaCl中析出DNA絲狀物D冷卻的酒精過(guò)濾后的DNA加入其中產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)C678910111213123455.下列操作中,對(duì)DNA的提取量影響較大的是()使雞血細(xì)胞在蒸餾水中充分破裂,釋放出DNA等核物質(zhì)攪拌時(shí),要用玻璃棒沿一個(gè)方向輕緩攪動(dòng)在析出DNA黏稠物時(shí),要緩緩加蒸餾水,直至溶液中黏稠物不再增多在用酒精沉淀DNA時(shí),要使用冷酒精,甚至再將混合液放入冰箱中冷卻在DNA的溶解和再溶解時(shí),要充分?jǐn)嚢鐰. B. C. D.C1234567891011121313.自1973年博耶和科恩成功地使外源基因在原核細(xì)胞中表達(dá)開(kāi)始,基因工程正式問(wèn)世了,人們對(duì)DNA的關(guān)注也越來(lái)越多。分析并回答下列問(wèn)題:(1)從生物組織中提取DNA時(shí),若要獲取含有DNA的濾液,需破碎細(xì)胞;若為雞的成熟紅細(xì)胞,可以加入一定量的蒸餾水,原因是細(xì)胞 而漲破;若為植物細(xì)胞可以加入一定量的洗滌劑。吸水膨脹(2)利用DNA和RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異,可以將它們分離。如DNA的溶解度在NaCl溶液濃度為 時(shí)最小,可以使DNA與其他雜質(zhì)初步分離。123456789101112130.14 mol/L12345678910111213(3)為了純化提取的DNA,可以用95%的酒精去除濾液中的雜質(zhì)。其原理是
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