細(xì)菌負(fù)荷定量檢測(cè)的臨床意義

1、細(xì)菌負(fù)荷定量檢測(cè)的臨床意義PCR檢測(cè)技術(shù)簡(jiǎn)介檢測(cè)技術(shù)簡(jiǎn)介聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中最重要的工具，PCR的出現(xiàn)為分離基因、DNA測(cè)序等提供了一種快捷、高效的方法PCR的原理和細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的DNA復(fù)制過(guò)程十分相像，可以使DNA分子在數(shù)小時(shí)(2-4小時(shí))內(nèi)擴(kuò)增230倍以上，使之達(dá)到可以檢測(cè)的水平在臨床實(shí)驗(yàn)中，PCR已用于病原體的檢測(cè)和流行病學(xué)研究，本法對(duì)于傳統(tǒng)培養(yǎng)等檢測(cè)方法繁復(fù)，靈敏度低，特異性差，或尚未建立可靠檢測(cè)方法的微生物尤為適用231.Waterer G et al. Current Opinion in Infectious Diseases 2011;24:1371

2、41治療社區(qū)獲得性肺炎治療社區(qū)獲得性肺炎(CAP)時(shí)為何應(yīng)檢測(cè)細(xì)菌負(fù)荷量時(shí)為何應(yīng)檢測(cè)細(xì)菌負(fù)荷量?細(xì)菌負(fù)荷量的檢測(cè)可預(yù)測(cè)患者預(yù)后細(xì)菌負(fù)荷量的檢測(cè)可預(yù)測(cè)患者預(yù)后既往研究提示，伴膿毒癥風(fēng)險(xiǎn)的CAP患者，其治療方案不同于其他患者最近研究表明細(xì)菌負(fù)荷量高的CAP患者愈后較差，這些發(fā)現(xiàn)改變了膿毒癥的治療模式，細(xì)菌負(fù)荷量與患者是否應(yīng)進(jìn)行膿毒癥相關(guān)治療、是否轉(zhuǎn)入ICU、是否需要進(jìn)行更多的侵入性操作等密切相關(guān)PCR檢測(cè)技術(shù)可準(zhǔn)確檢測(cè)血液中的細(xì)菌負(fù)荷量以及部分特殊病原體的負(fù)荷量細(xì)菌負(fù)荷量不僅能預(yù)示患者的預(yù)后，而且這些數(shù)據(jù)對(duì)重度膿毒癥的發(fā)病機(jī)理及臨床最佳抗生素的選擇具有重要的意義41.Waterer G et al

3、. Current Opinion in Infectious Diseases 2011;24:1371415肺炎鏈球菌肺炎疾病嚴(yán)重程度與細(xì)菌負(fù)荷量相關(guān)肺炎鏈球菌肺炎疾病嚴(yán)重程度與細(xì)菌負(fù)荷量相關(guān)2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840研究簡(jiǎn)介研究簡(jiǎn)介研究目的 評(píng)估社區(qū)獲得性肺炎(CAP)患者細(xì)菌負(fù)荷量與患者膿毒性休克及預(yù)后的相關(guān)性研究方法 一項(xiàng)前瞻性研究，患者均為住院的CAP患者 細(xì)菌負(fù)荷量檢測(cè)：采用rt-PCR技術(shù)測(cè)定血標(biāo)本中肺炎鏈球菌的細(xì)菌負(fù)荷量 主要研究終點(diǎn)：膿毒性休克的發(fā)生率及需行機(jī)械通氣的患者比例 次要研究終點(diǎn)：急性腎功能衰竭(AKI)、急性呼

4、吸窘迫綜合征(ARDS)的發(fā)生率及院內(nèi)死亡率62.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840患者細(xì)菌負(fù)荷量分布患者細(xì)菌負(fù)荷量分布肺炎鏈球菌肺炎患者細(xì)菌負(fù)荷量分布7患者百分比(%)(log10拷貝/mL)2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840細(xì)菌負(fù)荷量影響患者膿毒性休克的發(fā)生率細(xì)菌負(fù)荷量影響患者膿毒性休克的發(fā)生率隨著肺炎鏈球菌細(xì)菌負(fù)荷量的增加，患者膿毒性休克的發(fā)生率明顯上升8膿毒性休克的發(fā)生率(%)(log10拷貝/mL)2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840細(xì)菌負(fù)荷量影響需機(jī)械通氣的

5、患者比例細(xì)菌負(fù)荷量影響需機(jī)械通氣的患者比例高細(xì)菌負(fù)荷量的患者需要機(jī)械通氣的比例明顯高于低負(fù)荷患者9需機(jī)械通氣的患者比例(%)數(shù)據(jù)顯示，細(xì)菌負(fù)荷量每增加1log10拷貝/mL，需機(jī)械通氣的患者比例則增加2倍log10拷貝/mL可能需機(jī)械通氣的患者比例3/66 9/272.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840細(xì)菌負(fù)荷量影響患者預(yù)后細(xì)菌負(fù)荷量影響患者預(yù)后高細(xì)菌負(fù)荷量的患者出現(xiàn)AKI和ARDS的比例明顯高于低負(fù)荷患者10患者百分比(%)10/66 15/27 1/66 5/272.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840細(xì)菌負(fù)荷量

6、影響患者死亡率細(xì)菌負(fù)荷量影響患者死亡率11患者死亡率(%)4/66 7/27高細(xì)菌負(fù)荷量的患者死亡率明顯高于低負(fù)荷患者2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840研究結(jié)論研究結(jié)論12 隨著細(xì)菌負(fù)荷量的增加，感染患者出現(xiàn)膿毒性休克的比例及需機(jī)械通氣的比例明顯上升 感染患者細(xì)菌負(fù)荷量影響患者預(yù)后：高細(xì)菌負(fù)荷量的患者出現(xiàn)AKI、ARDS的比例及死亡率明顯高于低負(fù)荷患者2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:83284013腦膜炎球菌感染疾病嚴(yán)重程度與細(xì)菌負(fù)荷量相關(guān)腦膜炎球菌感染疾病嚴(yán)重程度與細(xì)菌負(fù)荷量相關(guān)3.Darton T et al.

7、Clinical Infectious Diseases 2009; 48:58794研究簡(jiǎn)介研究簡(jiǎn)介研究目的 評(píng)估腦膜炎奈瑟菌細(xì)菌負(fù)荷量與感染患者住院時(shí)間的相關(guān)性以及影響患者死亡風(fēng)險(xiǎn)的高危因素研究方法 一項(xiàng)為期3年的臨床研究，患者均為腦膜炎奈瑟菌感染的住院患者 細(xì)菌負(fù)荷量檢測(cè)：采用rt-PCR技術(shù)測(cè)定血標(biāo)本中腦膜炎奈瑟菌的細(xì)菌負(fù)荷量 評(píng)估宿主因素(如年齡、細(xì)菌負(fù)荷量等)對(duì)患者死亡率的影響143.Darton T et al. Clinical Infectious Diseases 2009; 48:58794細(xì)菌負(fù)荷量影響患者預(yù)后細(xì)菌負(fù)荷量影響患者預(yù)后研究顯示：細(xì)菌負(fù)荷量與患者住院時(shí)間、腎

8、透析以及肢體缺失或皮膚移植密切相關(guān)15細(xì)菌負(fù)荷量(log10拷貝/mL)是 否 是 否 是 否3.Darton T et al. Clinical Infectious Diseases 2009; 48:58794N=504細(xì)菌負(fù)荷量影響患者死亡率細(xì)菌負(fù)荷量影響患者死亡率死亡組患者的細(xì)菌負(fù)荷量明顯高于存活組患者16細(xì)菌負(fù)荷量(log10拷貝/mL)n=950 n=95多因素回歸分析顯示：隨著細(xì)菌負(fù)荷量的增加，患者死亡風(fēng)險(xiǎn)明顯上升變量?jī)?yōu)勢(shì)比(95%CI)P值年齡(每增加1歲)1.04 (1.021.06)0.001細(xì)菌負(fù)荷量細(xì)菌負(fù)荷量(每增加每增加1log10拷貝拷貝/mL)2.04 (1.5

9、32.71)1288644256PAB-CS7SHV-70.030.032561,02481281,0241,024264PAB-C43TEM-430.030.06641,0241321612824PAB-C12TEM-120.030.0632512412821628PAB-C10TEM-100.030.032561,024412812851222PAB-C-4TEM-40.030.03321284128326424PAB-C3TEM-30.030.06322564128163224研究顯示，碳青霉烯類不存在接種物效應(yīng)，三代和四代頭孢菌素、單環(huán)內(nèi)酰胺類及研究顯示，碳青霉烯類不存在接種物效應(yīng)，三

10、代和四代頭孢菌素、單環(huán)內(nèi)酰胺類及內(nèi)酰胺類內(nèi)酰胺類/內(nèi)酰胺酶抑制劑均存在接種效應(yīng)內(nèi)酰胺酶抑制劑均存在接種效應(yīng)碳青霉烯類：美羅培南；三代頭孢：頭孢他啶；四代頭孢：頭孢吡肟；單環(huán)內(nèi)酰胺類：氨曲南； 內(nèi)酰胺類/內(nèi)酰胺酶抑制劑：哌拉西林/他唑巴坦接種效應(yīng)的定義：在高接種菌量時(shí)(5*107CFU/ml) MIC值比標(biāo)準(zhǔn)接種菌量時(shí)(5*105CFU/ml)升高8倍頭孢菌素對(duì)大多數(shù)產(chǎn)頭孢菌素對(duì)大多數(shù)產(chǎn)ESBL腸桿菌顯示接種物效應(yīng)腸桿菌顯示接種物效應(yīng)5.吳娜等.中國(guó)感染與化療雜志.2011;11(1):31-35內(nèi)酰胺類/內(nèi)酰胺酶抑制劑三代頭孢四代頭孢碳青霉烯測(cè)定不同抗菌藥物對(duì)22株產(chǎn)ESBL大腸埃希菌和肺炎克

11、雷伯菌在標(biāo)準(zhǔn)接種菌量(5*105CFU/ml)及高接種菌量(5*107CFU/ml) 的MIC值，評(píng)估其接種效應(yīng)碳青霉烯類：美羅培南；三代頭孢：頭孢他啶；四代頭孢：頭孢吡肟； 內(nèi)酰胺類/內(nèi)酰胺酶抑制劑：哌拉西林/他唑巴坦顯示接種效應(yīng)的菌株比例頭孢菌素對(duì)40-87%產(chǎn)ESBL大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌顯示接種效應(yīng)存在接種物效應(yīng)的抗菌藥物存在接種物效應(yīng)的抗菌藥物治療敏感或中介菌株感染時(shí)臨床治療失敗率高治療敏感或中介菌株感染時(shí)臨床治療失敗率高治療失敗率(%) 對(duì)32例產(chǎn)ESBL腸桿菌菌血癥患者的調(diào)查分析，體外藥敏試驗(yàn)顯示，致病菌株對(duì)頭孢菌素(頭孢噻肟、頭孢三嗪、頭孢唑肟、頭孢吡肟、頭孢他定)敏感或中介

12、6.PATERSON DL et al. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY.2001;39(6):22062212頭孢菌素治療產(chǎn)ESBL菌株感染時(shí)，雖然藥敏試驗(yàn)顯示敏感但治療失敗率高隨著隨著MIC值的增加，值的增加，頭孢菌素治療產(chǎn)頭孢菌素治療產(chǎn)ESBL腸桿菌感染的失敗率逐漸上升腸桿菌感染的失敗率逐漸上升25治療失敗率(%)雖然藥敏試驗(yàn)顯示敏感(MIC8g/ml)，但隨著MIC值的增加，頭孢菌素治療產(chǎn)ESBL腸桿菌感染的失敗率逐漸上升6.PATERSON DL et al. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY.2001;39(6):2

13、2062212 對(duì)32例產(chǎn)ESBL腸桿菌菌血癥患者的調(diào)查分析，體外藥敏試驗(yàn)顯示，致病菌株對(duì)頭孢菌素(頭孢噻肟、頭孢三嗪、頭孢唑肟、頭孢吡肟、頭孢他定)敏感或中介3/11 1/3 2/3 6/6采用頭孢菌素治療，采用頭孢菌素治療，增加產(chǎn)增加產(chǎn)ESBL腸桿菌感染患者治療失敗率腸桿菌感染患者治療失敗率采用頭孢吡肟治療，近1/3的產(chǎn)ESBL腸桿菌感染患者治療失敗百分比(%)一項(xiàng)多中心、隨機(jī)對(duì)照研究，對(duì)其中23例產(chǎn)ESBL腸桿菌院內(nèi)肺炎患者的亞群分析N=234/130/107.Zanetti G et al. ANTIMICROBIAL AGENTS AND CHEMOTHERAPY. 2003;3442344710/109/13頭孢菌