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1、第十二章蛋白質(zhì)的生物合成一、知識(shí)要點(diǎn)(一)蛋白質(zhì)生物合成體系的重要組分蛋白質(zhì)生物合成體系的重要組分主要包括 mRNA 、 tRNA 、 rRNA 、有關(guān)的酶以及幾十種蛋白質(zhì)因子。 其中, mRNA 是蛋白質(zhì)生物合成的直接模板。 tRNA 的作用體現(xiàn)在三個(gè)方面:3 / CCA接受氨基酸;反密碼子識(shí)別mRNA鏈上的密碼子;連接多肽鏈和核糖體。rRNA和幾十種蛋白質(zhì)組成合成蛋白質(zhì)的場(chǎng)所核糖體。遺傳密碼的特點(diǎn):無(wú)標(biāo)點(diǎn)性、無(wú)重疊性;通用性和例外;簡(jiǎn)并性;變偶性。(二)蛋白質(zhì)白質(zhì)生物合成的過(guò)程蛋白質(zhì)生物合成的過(guò)程分四個(gè)步驟: 氨基酸活化、 肽鏈合成的起始、 延伸、 終止和釋放。其中,氨基酸活化即氨酰tRN
2、A 的合成,反應(yīng)由特異的氨酰tRNA 合成酶催化,在胞液中進(jìn)行。 氨酰 tRNA 合成酶既能識(shí)別特異的氨基酸, 又能辯認(rèn)攜帶該氨?;囊唤M同功受體tRNA 分子。肽鏈合成的起始對(duì)于大腸桿菌等原核細(xì)胞來(lái)說(shuō), 是 70S 起始復(fù)合物的形成。 它需要核糖體30S和50S亞基、帶有起始密碼子AUG的mRNA、fMet-tRNA f、起始因子IFi、IF2、IF3(分子量分別為 10 000、 80 000 和 21 000 的蛋白質(zhì))以及GTP 和 Mg 2+的參加。肽鏈合成的延伸需要70S 起始復(fù)合物、氨酰-tRNA 、三種延伸因子:一種是熱不穩(wěn)定的EF-Tu,另一種是熱穩(wěn)定的EF-Ts,第三種是依
3、賴 GTP的EF-G以及GTP和Mg2+。肽鏈合成的終止和釋放需要三個(gè)終止因子RF1、 RF2 、 RF3 蛋白的參與。比較真核細(xì)胞蛋白質(zhì)生物合成與原核細(xì)胞的不同。(三)蛋白質(zhì)合成后的修飾蛋白質(zhì)合成后的幾種修飾方式: 氨基末端的甲酰甲硫氨酸的切除、 肽鏈的折疊、 氨基酸殘基的修飾、切去一段肽鏈。二、習(xí) 題(一)(一)名詞解釋1 密碼子 (codon)2 反義密碼子(synonymous codon)3 反密碼子(anticodon)4 變偶假說(shuō)(wobble hypothesis)5 移碼突變(frameshift mutant)6 氨基酸同功受體(isoacceptor)7 反義RNA(an
4、tisense RNA)8 信號(hào)肽(signal peptide)9 簡(jiǎn)并密碼(degenerate code)10核糖體(ribosome)11多核糖體 (poly some)12氨?;课?aminoacyl site)13肽?;课?peptidy site)14肽基轉(zhuǎn)移酶(peptidyl transferase)15氨酰- tRNA 合成酶 (amino acy-tRNA synthetase)16 蛋白質(zhì)折疊(protein folding)17核蛋白體循環(huán)(polyribosome)18鋅指(zine finger)19亮氨酸拉鏈(leucine zipper)20順式作用元件(
5、cis-acting element)21反式作用因子(trans-acting factor)22.螺旋-環(huán)-螺旋(helix-loop-helix)(二)英文縮寫符號(hào)1. IF (initiation factor ):2. EF (elongation factor):3. RF (release factor):4. hnRNA (heterogeneous nuclear RNA):5. fMet-tRNA f :6. Met-tRNA i :(三)填空題1 .蛋白質(zhì)的生物合成是以 作為模板,作為運(yùn)輸氨基酸的工具,作為合成的場(chǎng)所。2 .細(xì)胞內(nèi)多肽鏈合成的方向是從 端到 端,而閱讀 m
6、RNA的方向是從 端到端。3 .核糖體上能夠結(jié)合 tRNA的部位有 部位,部位。4 .蛋白質(zhì)的生物合成通常以 作為起始密碼子,有時(shí)也以 作為起始密碼子,以, ,和 作為終止密碼子。5 . SD序列是指原核細(xì)胞 mRNA的5,端富含 堿基的序列,它可以和 16SrRNA的3 /端的序列互補(bǔ)配對(duì),而幫助起始密碼子的識(shí)別。6 .原核生物蛋白質(zhì)合成的起始因子(IF)有種,延伸因子(EF)有 種,終止釋放(RF)有 種;而真核生物細(xì)胞質(zhì)蛋白質(zhì)合成的延伸因子通常有 種,真菌有 種,終止釋放因子有 種。7 .原核生物蛋白質(zhì)合成中第一個(gè)被摻入的氨基酸是 。8 .無(wú)細(xì)胞翻譯系統(tǒng)翻譯出來(lái)的多肽鏈通常比在完整的細(xì)胞
7、中翻譯的產(chǎn)物要長(zhǎng),這是因?yàn)? .已發(fā)現(xiàn)體內(nèi)大多數(shù)蛋白質(zhì)正確的構(gòu)象的形成需要 的幫助。10 .分子伴侶通常具 酶的活性。11 .蛋白質(zhì)內(nèi)含子通常具有 酶的活性。12 .某一 tRNA的反密碼子是 GGC,它可識(shí)別的密碼子為 和。13 .環(huán)狀RNA不能有效地作為真核生物翻譯系統(tǒng)的模板是因?yàn)?。14 .在真核細(xì)胞中,mRNA是由 經(jīng) 合成的,它攜帶著 。它是由 降解成的,大多數(shù)真核細(xì)胞的 mRNA只編碼。15 .生物界總共有 個(gè)密碼子。其中 個(gè)為氨基酸編碼;起始密碼子為 ;終止密碼子為, , 。16 .氨酰-tRNA合成酶對(duì) 和 均有專一性,它至少有兩個(gè)識(shí)別位點(diǎn)。17 .原核細(xì)胞內(nèi)起始氨酰-tRNA
8、為;真核細(xì)胞內(nèi)起始氨酰-tRNA為_。18 .原核生物核糖體 50S亞基含有蛋白質(zhì)合成的 部位和 部位,而mRNA結(jié)合部 位。19 .許多生物核糖體連接于一個(gè)mRNA形成的復(fù)合物稱為。20 .肽基轉(zhuǎn)移酶在蛋白質(zhì)生物合成中的作用是催化 和。21 .核糖體亞基上的協(xié)助識(shí)別起始密碼子。22 .延長(zhǎng)因子G又稱,它的功能是,但需要。23 . ORF是指,已發(fā)現(xiàn)最小的 ORF只編碼一個(gè)氨基酸。24 .基因表達(dá)包括 和。25 .遺傳密碼的特點(diǎn)有方向性、連續(xù)性 和。26 .氨酰-tRNA合成酶利用 供能,在氨基酸 基上進(jìn)行活化,形成氨基酸AMP中間復(fù)合物。27原核生物肽鏈合成啟始復(fù)合體由mRNA 和組成。28
9、真核生物肽鏈合成啟始復(fù)合體由mRNA 和組成。29肽鏈延伸包括進(jìn)位和三個(gè)步驟周而復(fù)始的進(jìn)行。30原核生物肽鏈合成后的加工包括 和。31 鏈霉素和卡那霉素能與核蛋白體亞基結(jié)合, 改變其構(gòu)象, 引起 導(dǎo)致合成的多肽鏈一級(jí)結(jié)構(gòu)改變。32氯霉素能與核蛋白體 亞基結(jié)合,抑制 酶活性,從而抑制蛋白質(zhì)合成。33 乳糖操縱子的控制區(qū)啟動(dòng)子上游有結(jié)合位點(diǎn), 當(dāng)此位點(diǎn)與結(jié)合時(shí), 轉(zhuǎn)錄可增強(qiáng)一千倍左右。34真核生物蛋白質(zhì)因子與 DNA 相互作用的基元較常見的有和。35乳糖操縱子的誘導(dǎo)物是,色氨酸操縱子的輔阻遏物是 。36分泌性蛋白質(zhì)多肽鏈合成后的加工包括 、剪裁和天然構(gòu)象的形成。37. Ras癌基因的產(chǎn)物是 , s
10、rc癌基因的產(chǎn)物是 。(四)選擇題- tRNA 合成酶不需要有較對(duì)的功能:1 預(yù)測(cè)一下哪一種氨酰A 甘氨酰- tRNA 合成酶C 精氨酰- tRNA 合成酶2 某一種tRNA 的反密碼子是A UCA B ACUB 丙氨酰- tRNA 合成酶D 谷氨酰- tRNA 合成酶5' UG咫',它識(shí)別的密碼子序列是:C UCG D GCU103為蛋白質(zhì)生物合成中肽鏈延伸提供能量的是:A ATPB CTPC GTPD UTP4 一個(gè)N 端氨基酸為丙氨酸的 20 肽,其開放閱讀框架至少應(yīng)由多少核苷酸殘基組成:A 60B 63C 66D 695 在蛋白質(zhì)生物合成中tRNA 的作用是:A 將一個(gè)
11、氨基酸連接到另一個(gè)氨基酸上B 把氨基酸帶到mRNA 指定的位置上C 增加氨基酸的有效濃度D 將 mRNA 連接到核糖體上6 下列對(duì)原核細(xì)胞mRNA 的論述那些是正確的:A 原核細(xì)胞的 mRNA 多數(shù)是單順?lè)醋拥漠a(chǎn)物B 多順?lè)醋觤RNA在轉(zhuǎn)錄后加工中切割成單順?lè)醋觤RNAC 多順?lè)醋觤RNA翻譯成一個(gè)大的蛋白質(zhì)前體,在翻譯后加工中裂解成若干成熟的蛋白質(zhì)D 多順?lè)醋觤RNA上每個(gè)順?lè)醋佣加凶约旱钠鹗己徒K止密碼子;分別翻譯成各自的產(chǎn)物7在蛋白質(zhì)分子中下面所列舉的氨基酸哪一種最不容易突變?A ArgB Glu C ValD Asp8 根據(jù)擺動(dòng)學(xué)說(shuō),當(dāng)一個(gè)tRNA 分子上的反密碼子的第一個(gè)堿基為次黃嘌呤
12、時(shí),它可以和mRNA 密碼子的第三位的幾種堿基配對(duì):A 1B 2C 3D 49以下有關(guān)核糖體的論述哪項(xiàng)是不正確的:A 核糖體是蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所B 核糖體小亞基參與翻譯起始復(fù)合物的形成,確定mRNA 的解讀框架C.核糖體大亞基含有肽基轉(zhuǎn)移酶活性D 核糖體是儲(chǔ)藏核糖核酸的細(xì)胞器10關(guān)于密碼子的下列描述,其中錯(cuò)誤的是:B 每一密碼子代表一種氨基酸D 有些密碼子不代表任何氨基酸而且 tRNA 反密碼子前兩個(gè)核苷酸處于擺動(dòng)tRNA :A 每個(gè)密碼子由三個(gè)堿基組成C.每種氨基酸只有一個(gè)密碼子11 如果遺傳密碼是四聯(lián)體密碼而不是三聯(lián)體,的位置,那么蛋白質(zhì)正常合成大概需要多少種A.約256種不同的tRNAB.
13、 150250種不同的tRNAC.與三聯(lián)體密碼差不多的數(shù)目D.取決于氨酰-tRNA合成酶的種類12擺動(dòng)配對(duì)是指下列哪個(gè)堿基之間配對(duì)不嚴(yán)格:A.反密碼子第一個(gè)堿基與密碼子第三個(gè)堿基B 反密碼子第三個(gè)堿基與密碼子第一個(gè)堿基C.反密碼子和密碼子第一個(gè)堿基D 反密碼子和密碼子第三個(gè)堿基13在蛋白質(zhì)合成中,把一個(gè)游離氨基酸摻入到多肽鏈共須消耗多少高能磷酸鍵:A 1 B 2 C 3D 4 14蛋白質(zhì)的生物合成中肽鏈延伸的方向是:B 從N 端到 C 端D C 端和 N 端同時(shí)進(jìn)行B 含有肽機(jī)轉(zhuǎn)移酶活性,催化肽鍵的形成A C 端到 N 端C.定點(diǎn)雙向進(jìn)行15核糖體上A 位點(diǎn)的作用是:A 接受新的氨基酰-tRN
14、A 到位C.可水解肽酰tRNA、釋放多肽鏈D 是合成多肽鏈的起始點(diǎn)16蛋白質(zhì)的終止信號(hào)是由:A tRNA 識(shí)別B 轉(zhuǎn)肽酶識(shí)別C.延長(zhǎng)因子識(shí)別D,以上都不能識(shí)別17下列屬于順式作用元件的是:A.啟動(dòng)子 B.結(jié)構(gòu)基因C. RNA聚合酶 D.錄因子I18下列屬于反式作用因子的是:A 啟動(dòng)子B 增強(qiáng)子C 終止子D 轉(zhuǎn)錄因子19下列有關(guān)癌基因的論述,哪一項(xiàng)是正確的:A 癌基因只存在病毒中B 細(xì)胞癌基因來(lái)源于病毒基因C.癌基因是根據(jù)其功能命名的D.細(xì)胞癌基因是正?;虻囊徊糠?0下列何者是抑癌基因A . ras基因B. sis基因 C. P53基因D. src基因(五)是非判斷題) 1 由于遺傳密碼的通用
15、性真核細(xì)胞的 mRNA 可在原核翻譯系統(tǒng)中得到正常的翻譯。) 2 核糖體蛋白不僅僅參與蛋白質(zhì)的生物合成。()3.在翻譯起始階段,有完整的核糖體與 mRNA的5'端結(jié)合,從而開始蛋白質(zhì)的合成。) 4 所有的氨酰-tRNA 的合成都需要相應(yīng)的氨酰-TRNA 合成酶的催化。) 5 EF-Tu 的 GTPase 活性越高,翻譯的速度就越快,但翻譯的忠實(shí)性越低。) 6 在蛋白質(zhì)生物合成中所有的氨酰-tRNA 都是首先進(jìn)入核糖體的 A 部位。) 7 tRNA 的個(gè)性即是其特有的三葉草結(jié)構(gòu)。) 8 從 DNA 分子的三聯(lián)體密碼可以毫不懷疑的推斷出某一多肽的氨基酸序列,但氨基酸序列并不能準(zhǔn)確的推導(dǎo)出相
16、應(yīng)基因的核苷酸序列。) 9 與核糖體蛋白相比, rRNA 僅僅作為核糖體的結(jié)構(gòu)骨架,在蛋白質(zhì)合成中沒有什么直接的作用。) 10多肽鏈的折疊發(fā)生在蛋白質(zhì)合成結(jié)束以后才開始。) 11人工合成多肽的方向也是從 N 端到 C 端。) 12核糖體活性中心的A 位和 P 位均在大亞基上。) 13蛋白質(zhì)合成過(guò)程中所需的能量都由ATP 直接供給。) 14每個(gè)氨酰-tRNA 進(jìn)入核糖體的 A 位都需要延長(zhǎng)因子的參與,并消耗一分子GTP 。) 15每種氨基酸只能有一種特定的tRNA 與之對(duì)應(yīng)。) 16密碼子與反密碼子都是由AGCU 4 種堿基構(gòu)成的。) 17泛素是一種熱激蛋白。) 18原核細(xì)胞新生肽鏈N 端第一個(gè)
17、殘基為 fMet ;真核細(xì)胞新生肽鏈 N 端為 Met 。) 19蛋白質(zhì)合成過(guò)程中,肽基轉(zhuǎn)移酶起轉(zhuǎn)肽作用核水解肽鏈作用。) 20色氨酸操縱子中存在衰減子,故此操縱系統(tǒng)有細(xì)調(diào)節(jié)功能。(六)問(wèn)答題1 什么m7GTP 能夠抑制真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成,但不抑制原核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成?相反人工合成的 SD 序列能夠抑制原核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成, 但不抑制真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成?2遺傳密碼如何編碼?有哪些基本特性?3 簡(jiǎn)述tRNA 在蛋白質(zhì)的生物合成中是如何起作用的?4 mRNA 遺傳密碼排列順序翻譯成多肽鏈的氨基酸排列順序, 保證準(zhǔn)確翻譯的關(guān)鍵是什么?5 述真核生物反式作用因子與DNA 靶區(qū)和 RNA 聚合酶相互
18、作用的基本方式。6癌基因異常激活有哪些方式?7簡(jiǎn)述抑癌基因與癌變的關(guān)系。三、參考答案(一) (一) 名詞解釋1 1 密碼子( codon) :存在于信使RNA 中的三個(gè)相鄰的核苷酸順序,是蛋白質(zhì)合成中某一特定氨基酸的密碼單位。密碼子確定哪一種氨基酸叁入蛋白質(zhì)多肽鏈的特定位置上;共有 64 個(gè)密碼子 ,其中 61 個(gè)是氨基酸的密碼, 3個(gè)是作為終止密碼子。2 2 同義密碼子(synonym codon ) :為同一種氨基酸編碼的幾個(gè)密碼子之一,例如密碼子UUU 和 UUC 二者都為苯丙氨酸編碼。3 3 反密碼子(anticodon ) :在轉(zhuǎn)移 RNA 反密碼子環(huán)中的三個(gè)核苷酸的序列,在蛋白質(zhì)合
19、成中通過(guò)互補(bǔ)的堿基配對(duì),這部分結(jié)合到信使RNA 的特殊密碼上。4 4 變偶假說(shuō) ( Wobble hypothesis ) : 克里克為解釋tRNA 分子如何去識(shí)別不止一個(gè)密碼子而提出的一種假說(shuō)。據(jù)此假說(shuō),反密碼子的前兩個(gè)堿基(3/端)按照堿基配對(duì)的一般規(guī)律與密碼子的前兩個(gè)(5/端)堿基配對(duì),然而 tRNA反密碼子中的第三個(gè)堿基,在與密碼子上3/端的堿基形成氫鍵時(shí),則可有某種程度的變動(dòng),使其有可能與幾種不同 的堿基配對(duì)。5 5 移碼突變(frame-shift mutation ) :一種突變,其結(jié)果為導(dǎo)致核酸的核苷酸順序之間的正常關(guān)系發(fā)生改變。移碼突變是由刪去或插入一個(gè)核苷酸的點(diǎn)突變構(gòu)成的,
20、在這種情況下,突變點(diǎn)以前的密碼子并不改變,并將決定正確的氨基酸順序;但突變點(diǎn)以后的所有密碼子都將改變。且將決定錯(cuò)誤的氨基酸順序。6 氨基酸同功受體(isoacceptor) :每一個(gè)氨基酸可以有多過(guò)一個(gè)tRNA 作為運(yùn)載工具,這些 tRNA 稱為該氨基酸同功受體。7反義RNA (antisense RNA ) :具有互補(bǔ)序列的 RNA 。反義 RNA 可以通過(guò)互補(bǔ)序列與特定的 mRNA 相結(jié)合, 結(jié)合位置包括mRNA 結(jié)合核糖體的序列 ( SD 序列) 和起始密碼子AUG ,從而抑制 mRNA 的翻譯。又稱干擾mRNA 的互補(bǔ) RNA 。8. 8.信號(hào)肽(signal peptide):信號(hào)肽
21、假說(shuō)認(rèn)為,編碼分泌蛋白的mRNM翻譯時(shí)首先合成的是 N 末端帶有疏水氨基酸殘基的信號(hào)肽,它被內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的受體識(shí)別并與之相結(jié)合。信號(hào)肽經(jīng)由膜中蛋白質(zhì)形成的孔道到達(dá)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)腔,隨即被位于腔表面的信號(hào)肽酶水解,由于它的引導(dǎo),新生的多肽就能夠通過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜進(jìn)入腔內(nèi),最終被分泌到胞外。翻譯結(jié)束后,核糖體亞基解聚、孔道消失,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜又恢復(fù)原先的脂雙層結(jié)構(gòu)。9. 簡(jiǎn)并密碼( degenerate codon) :或稱同義密碼子(synonym codon ) ,為同一種氨基酸編碼幾個(gè)密碼子之一,例如密碼子UUU 和 UUC 二者都為苯丙氨酸編碼。10. 核糖體( ribosome ) : 核糖體是很多亞細(xì)胞核
22、蛋白顆粒中的一個(gè),由大約等量的 RNA 和蛋白質(zhì)所組成, 是細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所。 每個(gè)核糖核蛋白體在外形上近似圓形, 直徑 約為20nm。由兩個(gè)不相同的亞基組成,這兩個(gè)亞基通過(guò)鎂離子和其它非共價(jià)鍵地結(jié)合在一 起。已證實(shí)有四類核糖核蛋白體(細(xì)菌、植物、動(dòng)物和線粒體)它們以其單體的、亞單位的和核糖核蛋白體RNA 的沉降系數(shù)相區(qū)別。 細(xì)菌核蛋白體含有約 50 個(gè)不同的蛋白質(zhì)分子和 3個(gè)不同的 RNA 分子。小的亞單位含有約 20 個(gè)蛋白質(zhì)分子和1 個(gè) RNA 分子。大的亞單位含有約 30 個(gè)蛋白質(zhì)分子和2 個(gè) RNA 分子。 核蛋白體有兩個(gè)結(jié)合轉(zhuǎn)移 RNA 的部位 (部位和部位) ,并且也能附上
23、信使RNA ,簡(jiǎn)寫為Rb 。11多核糖體(polysome ) : 在信使核糖核酸鏈上附著兩個(gè)或更多的核糖體。12氨?;课?aminoacyl site) :在蛋白質(zhì)合成過(guò)程中進(jìn)入的氨酰-tRNA 結(jié)合在核蛋白體上的部位。13.肽?;课?peptidy site):指在蛋白質(zhì)合成過(guò)程中,當(dāng)下一個(gè)氨?;D(zhuǎn)移RNA接到核糖核蛋白體的氨基部位時(shí),肽酰tRNA 所在核蛋白體上的結(jié)合點(diǎn)。14肽基轉(zhuǎn)移酶(peptidyl transferase) :蛋白質(zhì)合成中的一種酶。它能催化正在增長(zhǎng)的多肽鏈與下一個(gè)氨基酸之間形成肽鍵。在細(xì)菌中此酶是50S 核糖核蛋白體亞單位中的蛋白質(zhì)之一。 15氨酰- tRNA
24、合成酶( amino acy-tRNA synthetase ) :催化氨基酸激活的偶聯(lián)反應(yīng)的酶,先是一種氨基酸連接到 AMP 生成一種氨酰腺苷酸,然后連接到轉(zhuǎn)移 RNA 分子生成氨酰 - tRNA 分子。16 蛋白質(zhì)折疊(protein folding ) :蛋白質(zhì)的三維構(gòu)象,稱為蛋白質(zhì)的折疊。是由蛋白質(zhì)多肽鏈的氨基酸順序所決定的。 不同的蛋白質(zhì)有不同的氨基酸順序, 也就各自按照一定的方式折疊而成該蛋白質(zhì)獨(dú)有的天然構(gòu)象。這個(gè)蛋白質(zhì)折疊是在自然條件下自發(fā)進(jìn)行的,在生物體內(nèi)條件下, 它是在熱力學(xué)上最穩(wěn)定的形式。 多肽鏈在核糖體上一面延長(zhǎng), 一面自發(fā)地折疊成其本身獨(dú)有的構(gòu)象。 當(dāng)肽鏈終止延長(zhǎng)并從核
25、糖體上脫落時(shí), 它也就折疊成 天然的三維結(jié)構(gòu)。17核蛋白體循環(huán)(polyribosome ) :是指已活化的氨基酸由 tRNA 轉(zhuǎn)運(yùn)到核蛋白體合成多肽鏈的過(guò)程。18鋅指(zine finger ) :是調(diào)控轉(zhuǎn)錄的蛋白質(zhì)因子中與DNA 結(jié)合的一種基元,它由大約 30個(gè)氨基酸殘基的肽段與鋅螯合形成的指形結(jié)構(gòu),鋅以 4 個(gè)配位鍵與肽鏈的 Cys 或 His 殘基結(jié)合,指形突起的肽段含 12- 13 個(gè)氨基酸殘基,指形突起嵌入 DNA 的大溝中,由 指形突起或其附近的某些氨基酸側(cè)鏈與 DNA 的堿基結(jié)合而實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)與 DNA 的結(jié)合。19亮氨酸拉鏈(leucine zipper ) :這是真核生物轉(zhuǎn)錄
26、調(diào)控蛋白與蛋白質(zhì)及與DNA 結(jié)合的基元之一。兩個(gè)蛋白質(zhì)分子近處C端肽段各自形成兩性“-螺旋,a -螺旋的肽段每隔7個(gè)氨基酸殘基出現(xiàn)一個(gè)亮氨酸殘基,兩個(gè)a -螺旋 的疏水面互相靠攏,兩排亮氨酸殘基疏水側(cè)鏈排列成拉鏈狀形成疏水鍵使蛋白質(zhì)結(jié)合成二聚體,a-螺旋的上游富含堿性氨基酸( Arg 、 Lys )肽段借Arg 、 Lys 側(cè)鏈基團(tuán)與DNA 的堿基互相結(jié)合而實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)與 DNA 的特異結(jié)合。20順式作用元件(cis-acting element ) :真核生物 DNA 的轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子和增強(qiáng)子等序列,合稱順式作用元件。21反式作用因子(trans-acting factor) :調(diào)控轉(zhuǎn)錄的各種蛋白
27、質(zhì)因子總稱反式作用因子。22.螺旋一環(huán)一螺旋(helix-loop-helix ):這種蛋白質(zhì)基元由兩個(gè)兩性a 螺旋通過(guò)一個(gè)肽段連結(jié)形成螺旋環(huán)螺旋結(jié)構(gòu),兩個(gè)蛋白質(zhì)通過(guò)兩性螺旋的疏水面互相結(jié)合,與 DNA的結(jié)合則依靠此基元附近的堿性氨基酸側(cè)鏈基團(tuán)與 DNA 的堿基結(jié)合而實(shí)現(xiàn)。(2) (二) 英文縮寫符號(hào)1 IF ( initiation factor ) :原核生物蛋白質(zhì)合成的起始因子。2 EF( elongation factor ) :原核生物蛋白質(zhì)合成的延伸因子。3 RF( release factor) :原核生物蛋白質(zhì)合成的終止因子(釋放因子)4 hnRNA ( heterogeneo
28、us nuclear RNA ) :核不均一RNA 。5 fMet-tRNA f :原核生物蛋白質(zhì)合成的第一個(gè)氨酰基轉(zhuǎn)移 RNA 。6 Met-tRNA i :真核生物蛋白質(zhì)合成的第一個(gè)氨?;D(zhuǎn)移 RNA 。(3) ( 三) 填空題1 mRNA ; tRNA ;核糖體2 . N端-C端;5/端-3/端3 P 位點(diǎn); A 位點(diǎn)。4 AUG ; GUG; UAA ; UAG ; UGA5嘌呤;嘧啶6 3 ; 3; 3; 2 ; 3 ; 17甲酰甲硫氨酸8沒有經(jīng)歷后加工,如剪切9分子伴侶10 ATPase11 核酸內(nèi)切酶12 GCU ; GCC13 缺乏帽子結(jié)構(gòu),無(wú)法識(shí)別起始密碼子14 DNA ;轉(zhuǎn)
29、錄; DNA 的遺傳信息; hnRNA ;一條多肽鏈15 64; 61; AUG ; UAA ; UAG ; UGA16氨基酸;tRNA17 fMet-tRNA ; Met-tRNA18氨?;浑孽;?;大小亞基的接觸面上19多核糖體20肽鍵的形成;肽鏈從tRNA 上分離出來(lái)21 小亞基; 16SRNA22移位酶;催化核糖體沿mRNA 移動(dòng); GTP23開放的閱讀框架;724轉(zhuǎn)錄;翻譯25簡(jiǎn)并性;通用性26 ATP ;羧27 70S 核蛋白體; .fMet-tRNA fMet28 80S 核蛋白體; Met-tRNA iMet29轉(zhuǎn)肽、移位30剪裁;天然構(gòu)象的形成31. 30S;讀碼錯(cuò)誤32.
30、50S;肽基轉(zhuǎn)移33分解代謝基因活化蛋白;CAP-cAMP 復(fù)合物34鋅指、亮氨酸拉鏈35別乳糖、色氨酸36信號(hào)肽的水解切除37 P21 蛋白; PP60 蛋白(4) ( 四) 選擇題1 A : 甘氨酸是 20 種基本氨基酸中唯一的一個(gè)不具旋光性的氨基酸, 甘氨酰 - tRNA 合成酶很容易將它與其他的氨基酸分開,不會(huì)出現(xiàn)誤載的情況。2 . A:讀碼順序均為5,-3,。3 C :肽鏈延伸包括進(jìn)位、成肽、移位三個(gè)步驟,進(jìn)位、移位分別消耗一分子GTP 。4 . C:該開放的閱讀框架由20X3 (起始密碼子)+3 (終止密碼子)=66個(gè)核甘酸組成。5 . B: TRNA分子的3的端的堿基1順序是一
31、CCA , “活化”的氨基酸的竣基連接到3/末端腺昔的核糖3 / -OH上,形成氨酰-tRNA。6 D :7 A : 4 種氨基酸中 Arg 的同義密碼子最多,為 6個(gè),因此堿基突變對(duì)它的影響最少。8 . C:根據(jù)擺動(dòng)學(xué)說(shuō),如果反密碼子的第一個(gè)堿基為次黃喋吟時(shí),它可以與 U、C、或A配 對(duì)。9 D :核糖體是儲(chǔ)藏核糖核酸的細(xì)胞器。10 C:11 C:12 A :13 . D:活化時(shí)消耗一分子ATP中兩個(gè)高能磷酸鍵;延伸時(shí)消耗兩分子 GTP。14 . B:第一個(gè)氨基酸的氨基和第二個(gè)氨基酸的竣基形成肽鍵,所以蛋白質(zhì)合成方向是N-C。15 A :16 D :蛋白質(zhì)終止過(guò)程是終止因子RF1 和 RF2
32、 識(shí)別mRNA 上的終止密碼子。17 A :真核生物 DNA 的轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子和增強(qiáng)子等序列,合稱順式作用元件。18 D :調(diào)控轉(zhuǎn)錄的各種蛋白質(zhì)因子總稱反式作用因子。19 D :20 C:(5) ( 五) 是非判斷題1 .錯(cuò):真核細(xì)胞 mRNA的5/端無(wú)SD序列,因此在原核細(xì)胞翻譯系統(tǒng)中,不能有效地翻譯。2對(duì):核糖體蛋白質(zhì)可在核糖外參與復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、后加工等過(guò)程。3 錯(cuò):核糖體需要解離成大小兩個(gè)亞基才能夠與mRNA 結(jié)合,啟動(dòng)翻譯。4 錯(cuò):某些生物缺乏谷氨冬酰胺 -tRNA 合成酶或天冬酰胺酰-tRNA 合成酶,相應(yīng)的Gln-tRNAAsn-tRNAGlnAsn的合成先是由谷氨酰-tRNA合成酶或天
33、冬氨酰-tRNA合成酶催 化 形 誤 載 的 Glu-tRNAGlnAsp-tRNAAsn, 再 經(jīng) 過(guò) 酰 胺 化 反 應(yīng) 生 成 Gln-tRNA 或 Asn-tRNAAsn 。5 對(duì):EF-Tu 的 GTPase 活性越高, 允許密碼子和反密碼子校對(duì)的時(shí)間就越短,因而忠實(shí)性就降低,而翻譯的速度反而提高。6 錯(cuò):起始tRNA 進(jìn)入 P 位點(diǎn)。7 錯(cuò) : tRNA 是一個(gè) tRNA 分子上決定所攜帶氨基酸性質(zhì)的核苷酸序列和阻止其它氨基酸被攜帶的核苷酸序列。不同種的tRNA 的個(gè)性是不同的。8 錯(cuò):從DNA 的核苷酸序列并不能始終根據(jù)三聯(lián)體密碼推斷出某一蛋白質(zhì)的氨基酸序列,這是因?yàn)槟承┑鞍踪|(zhì)的
34、翻譯經(jīng)歷再次程序化的解碼, 而且大多數(shù)真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)基因?yàn)閿嗔鸦颉? 錯(cuò):越來(lái)越多的證據(jù)表明rRNA 在翻譯中,決不是僅僅充當(dāng)組裝核糖體的結(jié)構(gòu)骨架作用,它能主動(dòng)參與蛋白質(zhì)的合成,如作為 ribozyme 發(fā)揮作用。10錯(cuò):多數(shù)多肽鏈的折疊與肽鏈延伸反應(yīng)同時(shí)進(jìn)行。11錯(cuò):人工合成多肽的方向正好與體內(nèi)的多肽鏈延伸的方向相反,是從C 端到 N 端。12 .錯(cuò):核糖體活性中心的A位和P位均在大亞基上。13 .錯(cuò):蛋白質(zhì)合成過(guò)程中所需的能量都由ATP直接供給。14對(duì):每個(gè)氨酰-tRNA 進(jìn)入核糖體的A 位都需要延長(zhǎng)因子的參與,并消耗一分子GTP。15錯(cuò):每種氨基酸只能有一種特定的tRNA 與之對(duì)應(yīng)。16錯(cuò):反密碼子中含有胸腺嘧啶堿基( T ) 。17對(duì):泛素是一種熱激蛋白,它在溫度升高的情況
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