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文檔簡介
1、半自動生化分析儀-速率法實驗目的 1、熟悉半自動生化的原理和結構 2、熟悉血清堿性磷酸酶測定（速率法）的原理，測定參數的設置及酶活性單位的計算。 3、半自動生化速率法的參數設定與操作半自動生化的原理和結構 1.樣品器 放置待測樣品、標準品、質控品 2.吸樣結構 吸樣探針、輸送樣品、試劑管道 3.稀釋器或比例泵 吸取、分配、輸送試劑 4.反應杯或反應管道 5.恒溫器 6.檢測器、比色計、分光光度計、熒光光度計 7.微處理機械或程序控制器 8.打印機或記錄儀堿性磷酸酶測定（速率法）的原理 以對-硝基苯酚磷酸鈉（4-NPP）為底物，2-氨基-2-甲基-1-丙醇（AMP）或二乙醇胺（DEA）為磷酸?；?/p>
2、的受體。在堿性條件下，ALP催化4-NPP水解釋出磷酸基團，生成游離對-硝基酚（4-NP），4-NP在堿性溶液中轉變成醌式結構，呈現較深的黃色。根據405nm處吸光度增加的速率（A/min）推算出清ALP活性單位。參數設定及操作 參數設定以試劑盒說明為主 上機操作參數：根據各實驗室儀器的型號及操作說明書設置。系數（K）2 757；孵育時間 30s；監(jiān)測時間60s；波長405nm；吸樣量500l ；溫度37。 【操作】 嚴格遵守試劑盒提供的操作規(guī)程。例如： 血清20l ，加37預溫的底物應用液1.0ml，立即吸入生化分析儀，此時血清稀釋倍數為51。計算 【計算】 2757min/02. 002.
3、 11850010min/6AALUALP式中式中18 50018 500是對硝基苯酚在是對硝基苯酚在1mol/L1mol/L二乙醇胺緩沖液二乙醇胺緩沖液（pH10.0pH10.0，2525），波長），波長405nm405nm的摩爾吸光度的摩爾吸光度?！痉椒ㄔu價】 1.血清置室溫（25），ALP活性顯示輕度增高；血清置室溫6h，ALP活性增高約1%；放置14d后，酶活性增高3%6%；血清放4ALP活性也緩緩升高；冰凍血清，ALP活性降低，但當血清復溫后，酶活性會慢慢恢復。質控血清或凍干質控血清也有類似的ALP活性升高現象。 2.作摩爾吸光系數校正用的標準物對硝基酚（4-NP）必須達到規(guī)格：（1）色澤為無色或淡黃色； （2）本法以4-NPP和AMP緩沖液為底物，其優(yōu)點在于：4-NPP易被ALP水解；產物對-硝基酚具有較高的摩爾吸光度（在pH10.0的AMP緩沖液中，18 500
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