高二生物同步微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)人教選修I張

1、課題課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)課程標(biāo)準(zhǔn)課程標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)進(jìn)行微生物的分離和培養(yǎng)。課標(biāo)解讀課標(biāo)解讀1.知知道培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識(shí)，進(jìn)行無(wú)菌技術(shù)的操作。2.進(jìn)行微生物培養(yǎng)。 1培養(yǎng)基培養(yǎng)基(1)培培養(yǎng)基概念按照微生物對(duì) 的不同需求，配制出供其 的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)基的成分及無(wú)菌操作技術(shù)培養(yǎng)基的成分及無(wú)菌操作技術(shù) 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)生長(zhǎng)繁殖(2)培養(yǎng)基種類包括 培養(yǎng)基和 培養(yǎng)基等。(3)培養(yǎng)基的化學(xué)成分一般都含有 、 、 和 四類營(yíng)養(yǎng)成分。還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì) 、 及 等的要求。固體液體水碳源氮源無(wú)機(jī)鹽pH特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)氧氣2無(wú)菌技術(shù)無(wú)菌技術(shù)(1)無(wú)無(wú)菌技術(shù)圍繞著如何避免雜菌的污染展開(kāi)，主要包括以下四個(gè)方面對(duì)

2、實(shí)驗(yàn)操作的 、操作者的 ，進(jìn)行清潔和 ；將用于微生物培養(yǎng)的器皿、 和 等進(jìn)行 ；為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在 附近進(jìn)行；實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與 相接觸?？臻g衣著和手消毒接種用具培養(yǎng)基滅菌酒精燈火焰周圍的物品(2)消毒和滅菌消毒：消毒是指使用 方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分 的微生物， (包括；不包括)芽孢和孢子，常用的方法有 消毒法、 消毒法、 消毒法。滅菌：滅菌是指使用 殺死物體內(nèi)外 ， (包括，不包括)芽孢和孢子，常用的方法有 滅菌、 滅菌和 滅菌。較為溫和的物理或化學(xué)對(duì)人體有害不包括煮沸巴氏化學(xué)藥劑強(qiáng)烈的理化因素所有的微生物包括灼燒高壓蒸汽干熱思維激活思維

3、激活1 用用酒精擦拭實(shí)驗(yàn)者手臂屬消毒還是滅菌？70%與95%的酒精，哪一種效果更好？為什么？提示提示酒精擦拭屬化學(xué)消毒，酒精消毒時(shí)，酒精擦拭屬化學(xué)消毒，酒精消毒時(shí)，70%的酒精殺菌效果最好。原因是：濃度過(guò)的酒精殺菌效果最好。原因是：濃度過(guò)高，使菌體表面蛋白質(zhì)凝固成一層保護(hù)膜，乙醇分子不能滲入其中；濃度過(guò)低，殺菌力減高，使菌體表面蛋白質(zhì)凝固成一層保護(hù)膜，乙醇分子不能滲入其中；濃度過(guò)低，殺菌力減弱。弱。1碳源、氮源及生長(zhǎng)因子的來(lái)源與功能歸納碳源、氮源及生長(zhǎng)因子的來(lái)源與功能歸納營(yíng)養(yǎng)要素營(yíng)養(yǎng)要素來(lái)源來(lái)源功能功能碳源碳源無(wú)機(jī)碳源無(wú)機(jī)碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳無(wú)機(jī)物等含碳無(wú)機(jī)物構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)

4、和一構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物；些代謝產(chǎn)物；有機(jī)碳既是碳源又有機(jī)碳既是碳源又是能源是能源有機(jī)碳源有機(jī)碳源糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、石油、花生粉有機(jī)酸、石油、花生粉餅等餅等氮源氮源無(wú)機(jī)氮源無(wú)機(jī)氮源無(wú)機(jī)氮：無(wú)機(jī)氮：NH3、銨鹽、銨鹽、硝酸鹽、硝酸鹽、N2等等將無(wú)機(jī)氮合成含氨的將無(wú)機(jī)氮合成含氨的代謝產(chǎn)物代謝產(chǎn)物有機(jī)氮源有機(jī)氮源牛肉膏、蛋白胨、牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸核酸、尿素、氨基酸合成蛋白質(zhì)、核酸及合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝產(chǎn)物含氮的代謝產(chǎn)物生長(zhǎng)因子生長(zhǎng)因子維生素、氨基酸、堿基維生素、氨基酸、堿基酶和核酸的組成成酶和核酸的組成成分；分；參與代謝過(guò)程參與代謝過(guò)程中的

5、酶促反應(yīng)中的酶促反應(yīng)2.培養(yǎng)基類型劃分培養(yǎng)基類型劃分劃分劃分標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基種類特點(diǎn)特點(diǎn)用途用途物理物理性質(zhì)性質(zhì)液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基不加凝固劑不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基加凝固劑，如加凝固劑，如瓊脂瓊脂觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分類鑒定類鑒定固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒定、活微生物分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、保藏菌種菌計(jì)數(shù)、保藏菌種化學(xué)化學(xué)成分成分天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分明確培養(yǎng)基成分明確(用化學(xué)成分已知用化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)配成的化學(xué)物質(zhì)配成)分類、鑒定分

6、類、鑒定用用途途選擇培選擇培養(yǎng)基養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物促進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng)的生長(zhǎng)培養(yǎng)、分離出特定微生物培養(yǎng)、分離出特定微生物(如如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽中加入高濃度食鹽)鑒別培鑒別培養(yǎng)基養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥某種指示劑或化學(xué)藥品品鑒別不同種類的微生物，如鑒別不同種類的微生物，如

7、可用伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別可用伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌腸桿菌(若有，菌落呈現(xiàn)黑若有，菌落呈現(xiàn)黑色，并帶有金屬光澤色，并帶有金屬光澤)3.無(wú)菌技術(shù)無(wú)菌技術(shù)(1)消消毒和滅菌的區(qū)別條件條件結(jié)果結(jié)果常用的方法常用的方法消毒消毒較為溫和較為溫和的物理或的物理或化學(xué)方法化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害部一部分對(duì)人體有害的微生物的微生物(不包括芽孢不包括芽孢和孢子和孢子)煮沸消毒法、巴氏煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法化學(xué)藥物消毒法滅菌滅菌強(qiáng)烈的理強(qiáng)烈的理化因素化因素殺死物體內(nèi)外所有的殺死物體內(nèi)外所有的

8、微生物，包括芽孢和微生物，包括芽孢和孢子孢子灼燒滅菌、干熱滅灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌菌、高壓蒸汽滅菌(2)無(wú)菌技術(shù)主要操作要求實(shí)驗(yàn)前應(yīng)對(duì)操作空間、操作人員消毒，對(duì)所用器具和培養(yǎng)基滅菌。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行時(shí)需在酒精燈火焰周圍無(wú)菌區(qū)操作，另外要避免已滅菌處理材料再次污染。特別提示特別提示(1)微生物最常用的碳源是糖類，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是銨鹽、硝微生物最常用的碳源是糖類，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是銨鹽、硝酸鹽。酸鹽。(2)對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，含對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，含C、H、O、N的有機(jī)物既是碳源，又是氮源、能源。的有機(jī)物既是碳源，又是氮源、能源。(3)大凡對(duì)生長(zhǎng)因子不能合成或合成能力有限的

9、微生物，其培養(yǎng)基中均需額外添加生長(zhǎng)因大凡對(duì)生長(zhǎng)因子不能合成或合成能力有限的微生物，其培養(yǎng)基中均需額外添加生長(zhǎng)因子，而許多微生物能自行合成生長(zhǎng)因子，其培養(yǎng)基中不需再添加。子，而許多微生物能自行合成生長(zhǎng)因子，其培養(yǎng)基中不需再添加?！眷柟天柟?】 下下列培養(yǎng)基配方中能作為選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基的依次是()。原料原料蛋白胨蛋白胨/g10101010乳糖乳糖/g5555蔗糖蔗糖/g5555KH2PO4/g2222伊紅伊紅/g0.4美藍(lán)美藍(lán)/g0.065瓊脂瓊脂/g1020NaCl/g20蒸餾水蒸餾水/mL 1 000 1 000 1 000 1 000A. B C D解析解析高濃度的食鹽可以抑制多種細(xì)菌

10、的生長(zhǎng)，但不影響金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)，從而高濃度的食鹽可以抑制多種細(xì)菌的生長(zhǎng)，但不影響金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)，從而可以將金黃色葡萄球菌分離出來(lái)，有高濃度食鹽的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。在培養(yǎng)基中加入可以將金黃色葡萄球菌分離出來(lái)，有高濃度食鹽的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。在培養(yǎng)基中加入伊紅和美藍(lán)，可以用來(lái)鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌，有伊紅和美藍(lán)的培養(yǎng)基伊紅和美藍(lán)，可以用來(lái)鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌，有伊紅和美藍(lán)的培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基。為鑒別培養(yǎng)基。答案答案D1制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基(1)制制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟： 稱量 倒平板。(2)倒平板的過(guò)程：在火焰

11、旁右手拿錐形瓶，左手 。右手拿錐形瓶，使錐形瓶的瓶口迅速通過(guò) 。 左 手 將 培 養(yǎng) 皿 打 開(kāi) 一 條 縫 隙 ， 右 手 將 培 養(yǎng) 基 倒 入 培 養(yǎng) 皿 ， 左 手 立刻 。待平板冷卻凝固后，將平板 放置，使皿蓋在下、皿底在上。培養(yǎng)基的制備與大腸桿菌的純化技術(shù)培養(yǎng)基的制備與大腸桿菌的純化技術(shù) 計(jì)算溶化滅菌拔出棉塞火焰蓋上皿蓋倒過(guò)來(lái)2純化大腸桿菌純化大腸桿菌(1)微微生物接種的最常用方法是 和 。(2)平板劃線法：通過(guò) 在瓊脂固體培養(yǎng)基表面 的操作，將聚集的菌種 。(3)稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的 ，然后將不同稀釋度的菌液分別 ，進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時(shí)，即可獲得 。平板劃線

12、法稀釋涂布平板法接種環(huán)連續(xù)劃線逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面梯度稀釋涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面單個(gè)細(xì)菌形成的菌落3菌種的保存菌種的保存為為了保持菌種的純凈，需對(duì)菌種進(jìn)行保藏。對(duì)于頻繁使用的菌種，我們可以采用 法；對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用 法。臨時(shí)保藏甘油管藏思維激活思維激活2 除除平板劃線法與稀釋涂布平板法外，還有哪些接種方法？微生物接種技術(shù)中最核心的內(nèi)容是什么？提示提示微生物接種方法還有斜面接種及穿刺接種等方法，所有微生物接種方法中最核心微生物接種方法還有斜面接種及穿刺接種等方法，所有微生物接種方法中最核心的內(nèi)容是的內(nèi)容是“防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度”。

13、1制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基計(jì)計(jì)算：依據(jù)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配方比例，計(jì)算配制100 mL的培養(yǎng)基時(shí)，各種成分的用量 稱量：牛肉膏比較黏稠，可用稱量紙稱取，牛肉膏和蛋白胨都易吸潮，稱取時(shí)動(dòng)作要迅速，稱后要及時(shí)蓋上瓶蓋2微生物分離與純化技術(shù)微生物分離與純化技術(shù)(1)原理微微生物的分離與純化就是將待檢測(cè)微生物樣品通過(guò)劃線或涂布接種在固體培養(yǎng)基上，樣品中的每一個(gè)細(xì)胞或孢子都可以生長(zhǎng)繁殖形成單個(gè)菌落。將單個(gè)菌落接種到斜面培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后，即可得到一個(gè)微生物的純種。(2)方法步驟微生物的分離包括樣品稀釋、劃線或涂布及培養(yǎng)三個(gè)步驟梯度稀釋操作(如圖1)圖圖1微生物分離操作流程圖微

14、生物分離操作流程圖a將分別盛有9 mL水的6支試管滅菌，并按101106的順序編號(hào)。b用移液管吸取1 mL已培養(yǎng)的菌懸液，注入第二支試管中。用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，使菌懸液與水充分混勻。c從101倍稀釋的試管中吸取1 mL稀釋液，注入102倍稀釋的試管中，重復(fù)第2步的操作。以此類推，直到完成最后一支試管的稀釋。注意：移液管需要經(jīng)過(guò)滅菌。操作時(shí)，試管口和移液管應(yīng)在離火焰12 cm處。劃線或涂布平板劃線分離法：在近火焰處，左手拿皿底，右手拿接種環(huán)，挑取大腸桿菌培養(yǎng)液在平板上劃線，常用的劃線方法有平行劃線和連續(xù)劃線兩種。平行劃線時(shí)，每轉(zhuǎn)一個(gè)角度燒一次接種環(huán)。劃線完畢后，蓋上培養(yǎng)皿蓋，做

15、好標(biāo)記。圖圖2劃線示意圖劃線示意圖涂布分離法：取3個(gè)平板，底面分別用記號(hào)筆寫上104、105和106三種稀釋度，然后用無(wú)菌吸管分別吸取相應(yīng)稀釋度的稀釋液各0.1 mL，放入已標(biāo)記好的平板上，用無(wú)菌玻璃涂棒在培養(yǎng)基表面輕輕地涂布均勻，室溫下靜置510 min，使菌懸液吸附進(jìn)培養(yǎng)基(圖3)。培養(yǎng)將劃線或涂布接種的平板倒置于培養(yǎng)箱或溫室中37 培養(yǎng)1624 h，即可長(zhǎng)出單菌落(圖4)圖圖3涂布法示意圖圖涂布法示意圖圖4斜面接種法斜面接種法(3)結(jié)果分析確認(rèn)培養(yǎng)基制備是否合格為確認(rèn)培養(yǎng)基制備是否合格，需設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)，即接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基都放入37 恒溫箱中，培養(yǎng)12 h和24 h，觀察

16、現(xiàn)象并記錄如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫12 d后無(wú)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則實(shí)驗(yàn)失敗需要重新制備。接種操作成功的標(biāo)準(zhǔn)如果培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落的顏色、形狀、大小基本一致，并符合該菌菌落的特點(diǎn)，則說(shuō)明接種操作是符合要求的；如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說(shuō)明接種過(guò)程中無(wú)菌操作還未達(dá)到要求，實(shí)驗(yàn)失敗，需要分析原因，再次制備。特別提醒特別提醒(1)進(jìn)行劃線時(shí)最后一區(qū)和第一區(qū)不可接觸。進(jìn)行劃線時(shí)最后一區(qū)和第一區(qū)不可接觸。(2)平板劃線各次灼燒接種環(huán)的目的。平板劃線各次灼燒接種環(huán)的目的。平板劃線操作第一次劃線及每次劃線之前都需灼燒滅菌，劃線操作結(jié)束仍需灼燒接種環(huán)，平板劃線操作第一次劃線及每次

17、劃線之前都需灼燒滅菌，劃線操作結(jié)束仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒目的不同。每次灼燒目的不同。(3)灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。第一次灼燒第一次灼燒每次劃線之前灼燒每次劃線之前灼燒劃線結(jié)束劃線結(jié)束目的目的避免接種環(huán)避免接種環(huán)上可能存在上可能存在的微生物污的微生物污染培養(yǎng)物染培養(yǎng)物灼燒殺死上次劃線結(jié)束灼燒殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌后接種環(huán)上殘留的菌種，使每種，使每 次劃線的菌種次劃線的菌種來(lái)自上次劃線末端來(lái)自上次劃線末端劃線結(jié)束后殺死接劃線結(jié)束后殺死接種環(huán)上殘留的菌種種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)，避免

18、細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者境和感染操作者【鞏固鞏固2】 下下列有關(guān)平板劃線操作的敘述不正確的是()。A第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物B每次劃線前，灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種C在第二區(qū)域內(nèi)劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于菌液D劃線結(jié)束后，灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者解析解析平板劃線操作中，接種環(huán)取菌種前灼燒的目的是避免接種環(huán)上可能存在的微生物平板劃線操作中，接種環(huán)取菌種前灼燒的目的是避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物，以后每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線后殘留的菌種。劃線結(jié)束仍污染培養(yǎng)物，

19、以后每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線后殘留的菌種。劃線結(jié)束仍需灼燒接種環(huán)，是為了能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。需灼燒接種環(huán)，是為了能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。從第二次劃線開(kāi)始，每次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端。從第二次劃線開(kāi)始，每次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端。答案答案C【例例1】 氯氯苯化合物是重要的有機(jī)化工原料，因其不易降解，會(huì)污染環(huán)境。某研究小組依照下列實(shí)驗(yàn)方案(圖1)篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培養(yǎng)基配方如表1。微生物的營(yíng)養(yǎng)與培養(yǎng)基類型微生物的營(yíng)養(yǎng)與培養(yǎng)基類型 圖圖1表1培養(yǎng)基

20、的組成(1)配制號(hào)固體培養(yǎng)基時(shí)，除添加號(hào)液體培養(yǎng)基成分外，還應(yīng)添加1%的_。(2)培養(yǎng)基配制時(shí)，滅菌與調(diào)pH的先后順序是_。(3)從用途上來(lái)說(shuō)，號(hào)培養(yǎng)基和號(hào)培養(yǎng)基分別屬于_培養(yǎng)基和_培養(yǎng)基。在號(hào)培養(yǎng)基中，為SP1菌提供氮源的成分是_。(4)在營(yíng)養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時(shí)，SP1的菌體變成一個(gè)圓形的休眠體，這種休眠體被稱為_(kāi)。(5)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的號(hào)培養(yǎng)液中培養(yǎng)，得到生長(zhǎng)曲線(如圖2)。從圖2可 知 ， S P 1 菌 在 _ _ _ _ _ _ 培 養(yǎng) 條 件 下 最 早 停 止 生 長(zhǎng) ， 其 原 因 是_。圖圖2思維導(dǎo)圖：思維導(dǎo)圖：深度剖析深度剖析本題考查培養(yǎng)基的配制原則以及微生物

21、的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)過(guò)程，意在考查考生的本題考查培養(yǎng)基的配制原則以及微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)過(guò)程，意在考查考生的圖表信息轉(zhuǎn)換與分析能力。圖表信息轉(zhuǎn)換與分析能力。(1)固體培養(yǎng)基中需加入瓊脂作為凝固劑。固體培養(yǎng)基中需加入瓊脂作為凝固劑。(2)先配制培養(yǎng)基后先配制培養(yǎng)基后滅菌，調(diào)滅菌，調(diào)pH屬于培養(yǎng)基的配制過(guò)程，故先調(diào)屬于培養(yǎng)基的配制過(guò)程，故先調(diào)pH后滅菌。后滅菌。(3)從用途上看，從用途上看，號(hào)培養(yǎng)基為號(hào)培養(yǎng)基為通用培養(yǎng)基通用培養(yǎng)基(基本培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基)；號(hào)培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，以氯苯為唯一的碳源，其中為號(hào)培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，以氯苯為唯一的碳源，其中為SP1菌提供氮源的成分是硝酸銨。菌提供氮源的成分是硝酸銨。

22、(4)芽孢是在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)高度濃縮脫水形成的抗逆性很強(qiáng)的球芽孢是在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)高度濃縮脫水形成的抗逆性很強(qiáng)的球形或橢圓形的休眠體。形或橢圓形的休眠體。(5)由圖示可知由圖示可知SP1菌在菌在20 mg/L氯苯培養(yǎng)條件下最早停止生長(zhǎng)，氯苯培養(yǎng)條件下最早停止生長(zhǎng)，20 mg/L氯苯可提供的碳源較少，碳源最早耗盡，影響菌體的生長(zhǎng)繁殖。氯苯可提供的碳源較少，碳源最早耗盡，影響菌體的生長(zhǎng)繁殖。答案答案(1)瓊瓊脂(2)先調(diào)pH，后滅菌(3)通用選擇硝酸銨(4)芽孢(5)20 mg/L氯苯碳源最早耗盡誤區(qū)警示誤區(qū)警示(1)瓊脂是最常用的凝固劑，但固體培養(yǎng)基未必均加瓊脂，如棉子殼培養(yǎng)基也瓊脂是最常用的凝固劑，但固體

23、培養(yǎng)基未必均加瓊脂，如棉子殼培養(yǎng)基也屬固體培養(yǎng)基。屬固體培養(yǎng)基。(2)牛肉膏、蛋白胨等天然物質(zhì)既可提供碳源，也可提供氮源及生長(zhǎng)因子。牛肉膏、蛋白胨等天然物質(zhì)既可提供碳源，也可提供氮源及生長(zhǎng)因子?！纠?】 培養(yǎng)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌、消毒方法依次是()。化學(xué)消毒灼燒滅菌干熱滅菌紫外線滅菌高壓蒸汽滅菌巴氏消毒法A BC D無(wú)菌操作技術(shù)無(wú)菌操作技術(shù) 思維導(dǎo)圖：思維導(dǎo)圖：深度剖析深度剖析培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌；培養(yǎng)皿能耐高溫，需用干熱滅菌；接種環(huán)可用灼燒培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌；培養(yǎng)皿能耐高溫，需用干熱滅菌；接種環(huán)可用灼燒滅菌達(dá)到迅速?gòu)氐椎臏缇Ч?；?shí)驗(yàn)操作者的雙

24、手可用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒，如用酒精擦拭滅菌達(dá)到迅速?gòu)氐椎臏缇Ч粚?shí)驗(yàn)操作者的雙手可用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒，如用酒精擦拭雙手；空氣可用紫外線消毒；牛奶為不破壞其營(yíng)養(yǎng)成分可采用巴氏消毒法。雙手；空氣可用紫外線消毒；牛奶為不破壞其營(yíng)養(yǎng)成分可采用巴氏消毒法。答案答案A思維深化思維深化幾種常用滅菌方法比較幾種常用滅菌方法比較(見(jiàn)下表見(jiàn)下表)方法方法滅菌操作滅菌操作適用對(duì)象適用對(duì)象灼燒灼燒滅菌滅菌在酒精燈火焰的充分燃燒在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒層灼燒對(duì)接種環(huán)、接種針或其他金屬對(duì)接種環(huán)、接種針或其他金屬工具滅菌，也可以對(duì)試管口、工具滅菌，也可以對(duì)試管口、瓶口滅菌瓶口滅菌干熱干熱滅菌滅菌在干熱滅菌箱內(nèi)，在干熱滅

25、菌箱內(nèi)，160170 條件下，加熱條件下，加熱12 h耐高溫且需保持干燥的物品，耐高溫且需保持干燥的物品，如玻璃器皿和金屬用具等如玻璃器皿和金屬用具等高壓高壓蒸汽蒸汽滅菌滅菌在高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，在高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，121 ，100 kPa，滅菌，滅菌1530 min培養(yǎng)基、發(fā)酵設(shè)備等培養(yǎng)基、發(fā)酵設(shè)備等紫外紫外線滅線滅菌菌30 W照射照射30 min小型接種室、接種箱等小型接種室、接種箱等【例例3】 如如圖是微生物平板劃線示意圖，劃線的順序?yàn)?2345。下列操作方法正確的是()。A操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B劃線操作須在火焰上進(jìn)行C在5區(qū)域中才可以得到所需菌落D在12345區(qū)域中劃線前后

26、都要對(duì)接種環(huán)滅菌微生物純化培養(yǎng)微生物純化培養(yǎng) 深度剖析深度剖析本題考查平板劃線的操作方法。在每次劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌，接本題考查平板劃線的操作方法。在每次劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼燒，接種時(shí)劃線操作是在火焰邊進(jìn)行。在種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼燒，接種時(shí)劃線操作是在火焰邊進(jìn)行。在5個(gè)區(qū)域中，只個(gè)區(qū)域中，只要有單個(gè)活細(xì)菌，通過(guò)培養(yǎng)即可獲得所需菌落。要有單個(gè)活細(xì)菌，通過(guò)培養(yǎng)即可獲得所需菌落。答案答案D歸納提升歸納提升(1)倒平板時(shí)不要將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間，否則此培養(yǎng)基不能用來(lái)培養(yǎng)倒平板時(shí)不要將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間，否則此培養(yǎng)基不能用來(lái)培養(yǎng)微生物。

27、微生物。(2)平板倒置原因：平板皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，培養(yǎng)基表面的溫度也較高，平板倒置后，既平板倒置原因：平板皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，培養(yǎng)基表面的溫度也較高，平板倒置后，既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染?？墒古囵B(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。(3)兩種純化方法的比較兩種純化方法的比較項(xiàng)目項(xiàng)目?jī)?yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)缺點(diǎn)適用范圍適用范圍平板劃平板劃線法線法可以觀察菌落特征，可以觀察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)行分離對(duì)混合菌進(jìn)行分離不能計(jì)數(shù)不能計(jì)數(shù)適用于好氧菌適用于好氧菌稀釋涂稀釋涂布平板布平板法法可以計(jì)數(shù)，可以觀察可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征菌落特征

28、吸收量較少，較吸收量較少，較麻煩，平板不干麻煩，平板不干燥效果不好，容燥效果不好，容易蔓延易蔓延適用于厭氧菌適用于厭氧菌和兼性厭氧菌和兼性厭氧菌單擊此處進(jìn)入單擊此處進(jìn)入 隨堂達(dá)標(biāo)檢測(cè)隨堂達(dá)標(biāo)檢測(cè)旁欄思考題旁欄思考題1無(wú)無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外，還有什么目的？解析解析許多微生物對(duì)人類是有害的，因此實(shí)驗(yàn)室中無(wú)菌技術(shù)還能有效避免操作者自許多微生物對(duì)人類是有害的，因此實(shí)驗(yàn)室中無(wú)菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。身被微生物感染。答案答案無(wú)無(wú)菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。2請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請(qǐng)選擇合適的方法。(1)培養(yǎng)細(xì)

29、菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿。(2)玻璃試管、燒瓶和吸管。(3)實(shí)驗(yàn)操作者的雙手。解析解析消毒和滅菌是無(wú)菌技術(shù)的兩項(xiàng)基本技術(shù)，實(shí)踐中需要根據(jù)無(wú)菌操作的對(duì)象合消毒和滅菌是無(wú)菌技術(shù)的兩項(xiàng)基本技術(shù)，實(shí)踐中需要根據(jù)無(wú)菌操作的對(duì)象合理地選擇使用。原則是既要考慮使用的效果，又要考慮無(wú)菌操作對(duì)象的承受能力。理地選擇使用。原則是既要考慮使用的效果，又要考慮無(wú)菌操作對(duì)象的承受能力。答案答案(1)、(2)需需要滅菌；(3)需要消毒。倒平板操作討論題倒平板操作討論題1培培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50 左右時(shí)，才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？答案答案可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙

30、手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。2為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？答案答案通通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3平板冷凝后，為什么要將平板倒置？答案答案平平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。4在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎？為什么？答案答案空空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。平板劃線操作討論題平板劃線操作討論題1為為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)

31、？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？答案答案操操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到單個(gè)菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。2在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？答案答案以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3在做第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線？答案答案劃劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)

32、目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開(kāi)始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。涂布平板操作討論題涂布平板操作討論題涂涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無(wú)菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)如何進(jìn)行無(wú)菌操作？答案答案應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無(wú)菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍；等等。練習(xí)練習(xí)1提示提示可以通過(guò)保持干燥、真空的條件，以及冷藏等方法來(lái)阻止微生物的生長(zhǎng)?？梢酝ㄟ^(guò)保持干燥、真空的條件，以及冷藏等方法來(lái)阻止微生物的生長(zhǎng)。解析解析可以從微生物生長(zhǎng)需要哪些條件的角度來(lái)思

33、考。例如，微生物的生長(zhǎng)需要水、可以從微生物生長(zhǎng)需要哪些條件的角度來(lái)思考。例如，微生物的生長(zhǎng)需要水、空氣、適宜的溫度等?？諝?、適宜的溫度等。2提示提示相同點(diǎn)：三種培養(yǎng)技術(shù)都需要為培養(yǎng)物提供充足的營(yíng)養(yǎng)。相同點(diǎn)：三種培養(yǎng)技術(shù)都需要為培養(yǎng)物提供充足的營(yíng)養(yǎng)。不同點(diǎn)：無(wú)土栽培技術(shù)的操作并不需要保證無(wú)菌的條件，而其他兩種技術(shù)都要求嚴(yán)格的不同點(diǎn)：無(wú)土栽培技術(shù)的操作并不需要保證無(wú)菌的條件，而其他兩種技術(shù)都要求嚴(yán)格的無(wú)菌條件。無(wú)菌條件。解析解析可以從這三種培養(yǎng)技術(shù)的原理、操作步驟等方面分別進(jìn)行總結(jié)歸納?？梢詮倪@三種培養(yǎng)技術(shù)的原理、操作步驟等方面分別進(jìn)行總結(jié)歸納。3提示提示巴斯德設(shè)計(jì)了一個(gè)鵝頸瓶巴斯德設(shè)計(jì)了一個(gè)鵝頸

34、瓶(曲頸瓶曲頸瓶)，現(xiàn)稱巴斯德燒瓶。燒瓶有一個(gè)彎曲的長(zhǎng)管，現(xiàn)稱巴斯德燒瓶。燒瓶有一個(gè)彎曲的長(zhǎng)管與外界空氣相通。瓶?jī)?nèi)的溶液加熱至沸點(diǎn)，冷卻后，空氣可以重新進(jìn)入，但因?yàn)橛邢蛳聫澟c外界空氣相通。瓶?jī)?nèi)的溶液加熱至沸點(diǎn)，冷卻后，空氣可以重新進(jìn)入，但因?yàn)橛邢蛳聫澢拈L(zhǎng)管，空氣中的塵埃和微生物不能與溶液接觸，使溶液保持無(wú)菌狀態(tài)，溶液可以較長(zhǎng)曲的長(zhǎng)管，空氣中的塵埃和微生物不能與溶液接觸，使溶液保持無(wú)菌狀態(tài)，溶液可以較長(zhǎng)時(shí)間不腐敗。如果瓶頸破裂，溶液就會(huì)很快腐敗變質(zhì)，并有大量的微生物出現(xiàn)。實(shí)驗(yàn)得到時(shí)間不腐敗。如果瓶頸破裂，溶液就會(huì)很快腐敗變質(zhì)，并有大量的微生物出現(xiàn)。實(shí)驗(yàn)得到了令人信服的結(jié)論：腐敗物質(zhì)中的微生物是

35、來(lái)自空氣中的微生物，這個(gè)實(shí)驗(yàn)也導(dǎo)致了巴斯了令人信服的結(jié)論：腐敗物質(zhì)中的微生物是來(lái)自空氣中的微生物，這個(gè)實(shí)驗(yàn)也導(dǎo)致了巴斯德創(chuàng)造了一種有效的滅菌方法德創(chuàng)造了一種有效的滅菌方法巴氏滅菌法。巴氏滅菌法又稱低溫滅菌法，先將要求滅菌巴氏滅菌法。巴氏滅菌法又稱低溫滅菌法，先將要求滅菌的物質(zhì)加熱到的物質(zhì)加熱到65 30 min鐘或鐘或72 15 min，隨后迅速冷卻到，隨后迅速冷卻到10 以下。這樣既不以下。這樣既不破壞營(yíng)養(yǎng)成分，又能殺死細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)體，巴斯德發(fā)明的這種方法解決了酒質(zhì)變酸的問(wèn)題，破壞營(yíng)養(yǎng)成分，又能殺死細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)體，巴斯德發(fā)明的這種方法解決了酒質(zhì)變酸的問(wèn)題，拯救了法國(guó)釀酒業(yè)?，F(xiàn)代的食品工業(yè)多采取間

36、歇低溫滅菌法進(jìn)行滅菌。拯救了法國(guó)釀酒業(yè)?，F(xiàn)代的食品工業(yè)多采取間歇低溫滅菌法進(jìn)行滅菌。解析解析這是一道開(kāi)放性的問(wèn)題，答案并不唯一，重點(diǎn)在于鼓勵(lì)學(xué)生積極參與，從不同的這是一道開(kāi)放性的問(wèn)題，答案并不唯一，重點(diǎn)在于鼓勵(lì)學(xué)生積極參與，從不同的角度思考問(wèn)題。例如，正是由于證明了微生物不是自發(fā)產(chǎn)生的，微生物學(xué)才可能發(fā)展成為角度思考問(wèn)題。例如，正是由于證明了微生物不是自發(fā)產(chǎn)生的，微生物學(xué)才可能發(fā)展成為一門獨(dú)立的學(xué)科；巴斯德實(shí)驗(yàn)中用到的加熱滅菌的方法導(dǎo)致了有效的滅菌方法的出現(xiàn)，而一門獨(dú)立的學(xué)科；巴斯德實(shí)驗(yàn)中用到的加熱滅菌的方法導(dǎo)致了有效的滅菌方法的出現(xiàn)，而這一滅菌原理也適用于食品的保存等。這一滅菌原理也適用于食品的保存等。1培養(yǎng)基培養(yǎng)基(1)培培養(yǎng)基概念按照微生物對(duì) 的不同需求，配制出供其 的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)基的成分及無(wú)菌操作技術(shù)培養(yǎng)基的成分及無(wú)菌操作技術(shù) 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)生長(zhǎng)繁殖(2)培養(yǎng)基種類包括 培養(yǎng)基和 培養(yǎng)基