REGγ基因敲除小鼠類精神分裂癥行為學(xué)及分子機(jī)制初探

1、C 易發(fā)表用yiT論女第表匸家REGY基因敲除小鼠類精神分裂癥行為學(xué)及分子機(jī)制初探【摘要】：REGy（又稱 PA28y,Psme3,kiantigen 是非泛素化的蛋白酶體降解途徑中的一個重要組分。已證實該蛋白可以選擇性的降解完整的 大分子底物如 SRC-3,p21 等。更多的靶蛋白有待更多的實驗證明。 在 REGy敲除小鼠中研究人員發(fā)現(xiàn)存在發(fā)育遲緩、體重較輕和輕微的免 疫學(xué)缺陷。該小鼠在神經(jīng)系統(tǒng)的表型是否有異常尚未有人研究。本課 題以 REGy 敲除小鼠為研究對象，較全面的分析了其在自發(fā)活動量、 運動和協(xié)調(diào)能力、空間記憶能力、焦慮樣行為和精神分裂癥樣行為方 面的表型，結(jié)果發(fā)現(xiàn)REGy 敲除小

2、鼠的自發(fā)活動量和刻板樣行為增加，前脈沖抑制率降低，做窩能力下降等類似精神分裂癥的表型，而運動和 協(xié)調(diào)能力、空間記憶能力和焦慮樣行為與對照相比未發(fā)生變化。行為學(xué)的結(jié)果提示 REGy 敲除小鼠存在類似精神分裂癥的行為變化。本課 題利用熒光定量（RT-）PCR、WesternBlot 等分子生物學(xué)手段分析了 REGy敲除小鼠大腦不同部位的一些基因表達(dá)水平變化。此外,本課題還對 REGy 敲除小鼠體重、外觀、大腦的形態(tài)學(xué)做了檢測和分析；利 U 用TUNEL 分析該小鼠大腦內(nèi)的細(xì)胞凋亡情況，為研究 REGy 的生物學(xué) 功能做了初步探索。1.REGy 敲除小鼠的繁育和外觀形態(tài)學(xué)鑒定本實 驗通過PCR 反應(yīng)

3、對 REGy 基因的野生型、雜合和純合表型加以區(qū)分。 并在 RNA水平上驗證 REGy 敲除小鼠中 REGy 基因表達(dá)的缺失。同 時對 REGy 敲除小鼠的體重同其對照鼠加以比較，證明 REGy 敲除小 鼠存在體重偏輕的現(xiàn)象，與前人報道一致。此外還觀察到 REGy 敲除小鼠的外觀上的免疫學(xué)缺陷。通過 Nissl 染色發(fā)現(xiàn)大腦的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu) 未發(fā)生明顯改變。2.REGy 基因敲除小鼠的行為學(xué)分析本實驗以 REGy 敲除小鼠為研究對象，首次開展了其神經(jīng)系統(tǒng)方面一系列關(guān)于自發(fā)活 動量、運動及協(xié)調(diào)能力、學(xué)習(xí)與記憶能力、負(fù)性情緒等行為學(xué)實驗。 實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),REGy 敲除小鼠自發(fā)活動量增加，刻板樣運動的次

4、數(shù)、 時間等顯著增加；在運動及協(xié)調(diào)能力上未發(fā)生改變； 在空間記憶能力 上未發(fā)生明顯改變；在焦慮情緒方面未發(fā)生改變；在與精神分裂樣癥 狀相關(guān)的前脈沖抑制能力和做窩能力上 REGy 敲除小鼠有明顯下降。 通過這一系列行為學(xué)測試，提示我們 REGy 敲除小鼠類似精神分裂癥 的表型。3.REGy 敲除小鼠的初步分子生物學(xué)分析實驗中利用定量 PCR 對 REGy 敲除小鼠海馬部位的一些基因的 mRNA 水平做了檢測。結(jié)果發(fā)現(xiàn) NR1、IL-1 僅 D2 受體及 APC 五個基因的 mRNA 水平在成 年REGy 基因敲除小鼠及其對照組之間均無差別，IGFBP2 基因的mRNA 水平則有顯著降低（p0.0

5、5）。NR2B 基因的 mRNA 表達(dá)水平則 可能在 REGy 基因敲除小鼠海馬中有年齡依賴性的表達(dá)下降。利用WesternBlot 發(fā)現(xiàn) REGy 敲除小鼠前腦皮層 APC 蛋白表達(dá)量高于對照 組小鼠。提示 APC 蛋白水平可能受 REGy 基因敲除的影響。利用 TUNEL法則未發(fā)現(xiàn)在 REGy 敲除小鼠大腦中與對照組相比有更高的 的細(xì)胞凋亡?！娟P(guān)鍵詞】：REG 基因敲除小鼠精神分裂癥【學(xué)位授予單位】：華東師范大學(xué)【學(xué)位級別】：博士【學(xué)位授予年份】：2010【分類號】：Q789【目錄】：摘要 7-9ABSTRACT9-11 第一章REG敲除小鼠的繁育和 外觀形態(tài)學(xué)鑒定 11-27 摘要 11 前言 11-13 材料與方法 13-19 結(jié)果 19-20 討論20-21 版圖與說明 21-27 第二章 REG 基因敲除小鼠的行為學(xué)分 析 27-51摘要 27 前言 27-28 材料與方法 28-33 結(jié)果 33-36 討論 36-39 版圖與說明39-51 第三章 REG 敲除小鼠的初步分子生物學(xué)分析 51-68 摘要 51 前言51-52 材料與方法 52-59 結(jié)