藥物制劑的微生物學(xué)檢測

1、藥物制劑的微生物學(xué)檢查無抗菌無抗菌作用的作用的供試品供試品抽抽樣樣接種于培養(yǎng)基硫乙醇酸鹽培養(yǎng)接種于培養(yǎng)基硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基及改良馬丁培養(yǎng)基管基及改良馬丁培養(yǎng)基管 培培養(yǎng)養(yǎng)細(xì)菌細(xì)菌 37 37 霉菌、酵母菌霉菌、酵母菌 25 25 接接種種實驗方法實驗方法（一）、蜜丸細(xì)菌總數(shù)測定一）、蜜丸細(xì)菌總數(shù)測定（二）、蜜丸霉菌總數(shù)測定（二）、蜜丸霉菌總數(shù)測定1、無菌條件下隨機(jī)稱取、無菌條件下隨機(jī)稱取10g蜜丸置研缽中逐漸加入蜜丸置研缽中逐漸加入100ml生理鹽水研磨為生理鹽水研磨為1：10藥液，分別量取藥液，分別量取9ml生理鹽水置生理鹽水置10ml 具塞刻度試管中，其中一支加入具塞刻度試管中，其中一支加入

2、1：10藥液藥液1ml后稀后稀釋為釋為1：100后再取后再取1ml加入加入9ml生理鹽水具塞刻度試管中生理鹽水具塞刻度試管中藥物稀釋為藥物稀釋為1：1000。2、取、取10個干烤后玻璃平皿，其中個干烤后玻璃平皿，其中6個平皿，每個平皿，每2個分別加個分別加入入1：10，1：100，1：1000藥液各藥液各1ml，然后加入，然后加入50普普通瓊脂培養(yǎng)基、（通瓊脂培養(yǎng)基、（2，3，5-氯化三苯基四氮唑）氯化三苯基四氮唑）15ml做細(xì)做細(xì)菌培養(yǎng)；剩余的菌培養(yǎng)；剩余的4個平皿，每個平皿，每2個分別加入個分別加入1：10，1：100，藥液各藥液各1ml共共4個，然后加入個，然后加入50虎紅馬丁培養(yǎng)基虎紅

3、馬丁培養(yǎng)基15ml做做霉菌培養(yǎng)，并立刻轉(zhuǎn)動平板使藥液與培養(yǎng)基充分混勻。霉菌培養(yǎng)，并立刻轉(zhuǎn)動平板使藥液與培養(yǎng)基充分混勻。10個平板置個平板置37培養(yǎng)箱培養(yǎng)培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h后并計數(shù)每個稀釋度的后并計數(shù)每個稀釋度的3個平個平板的菌落均數(shù)。板的菌落均數(shù)。 陰性 菌落紫黑色、有金屬光澤乳糖發(fā)酵、IMViC試驗發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、MViC：+ + - -培培 養(yǎng)養(yǎng) 基基菌菌 落落 形形 態(tài)態(tài)伊紅美藍(lán)瓊伊紅美藍(lán)瓊脂（脂（EMBEMB平板）平板）呈呈紫黑色紫黑色、淺紫色、藍(lán)紫色或粉紅色，菌落中心呈深紫色或無明、淺紫色、藍(lán)紫色或粉紅色，菌落中心呈深紫色或無明顯暗色中心，圓形，稍凸起，邊緣整齊，表面光滑，濕潤，顯暗

4、色中心，圓形，稍凸起，邊緣整齊，表面光滑，濕潤，常有常有金屬光澤。金屬光澤。麥康凱瓊脂麥康凱瓊脂（MacC） 鮮桃紅色或微紅色，菌落中心呈深鮮桃紅色或微紅色，菌落中心呈深桃紅色桃紅色，圓形，扁平，圓形，扁平，邊緣整齊，表面光滑，濕潤。邊緣整齊，表面光滑，濕潤。 大腸埃希菌菌落形態(tài)特征大腸埃希菌菌落形態(tài)特征大腸埃希菌在麥康凱瓊脂平板上大腸埃希菌在麥康凱瓊脂平板上 發(fā)酵乳糖菌落發(fā)酵乳糖菌落 大腸埃希菌在伊紅美藍(lán)瓊脂平板大腸埃希菌在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上的菌落特征上的菌落特征吲哚試驗（吲哚試驗（I I）+ -+ -甲基紅試驗甲基紅試驗(M) (M) + -+ -VPVP試驗（試驗（ViVi）+ -+ -枸椽酸鹽利用試驗（枸椽酸鹽利用試驗（C C） + -+ - - +M - 甲基紅（methyl red）實驗葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇 甲基紅 -葡萄糖丙酮酸 甲基紅 +- +葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇 二乙酰紅色化合物 + 胍基化合物葡萄糖丙酮酸 乙酰甲基甲醇 - - +利用枸櫞酸鹽