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蛋白質(zhì)含量測定蛋白質(zhì)含量測定南京曉莊學(xué)院生命科學(xué)系一 實驗原理v利用考馬斯亮藍能使蛋白質(zhì)染色的利用考馬斯亮藍能使蛋白質(zhì)染色的特性,能快速簡單地測定蛋白質(zhì)的特性,能快速簡單地測定蛋白質(zhì)的含量,本方法的靈敏度較高,且不含量,本方法的靈敏度較高,且不受游離氨基酸和小肽的影響。受游離氨基酸和小肽的影響。二 實驗器材和試劑實驗儀器:實驗儀器:v分光光度計v分析天平v樣品v容量瓶v移液管實驗材料:蘆薈v實驗試劑實驗試劑v標準牛血清蛋白溶液v染料試劑三三 實驗步驟實驗步驟v1 取蘆薈葉片0.1剪碎,從磷酸緩沖液研磨,倒入10ml 離心管中,定容到10 ml,12000 pm離心,20min 得上清液作為待測樣品。2 取0.5 ml提取液叫上5 ml考馬斯亮蘭試劑,搖勻在30攝氏度水浴 20min ,于595nm處測得OD值。3 制定標準曲線,配制20 40 60 80 100 mg/ml牛血清蛋白液,同2法測595nm 處的OD 值,以蒸餾水加考馬斯亮蘭試劑為作照。四四 計算計算v蘆薈:0.067v0.067=0.0042 x-0.0141v x=19.31mg/ml蛋白質(zhì)含量=19.31*10/0.1*1000000 =0.193五五 注意事項注意事項由于取的組織不同,所以 OD值相差較大。 研磨須充分,否則溶解后析光時所得數(shù)據(jù)并不是1克
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