月季的花藥培養(yǎng)詳解課件

1、 請拿出你的38號導(dǎo)學(xué)案，課本，雙色筆(s b)和典題本，還有你的激情！今日贈言：當(dāng)一個(gè)人先從自己的內(nèi)心開始奮斗(fndu)，他就是個(gè)有價(jià)值的人。第一頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解 花中皇后月季又稱花中皇后月季又稱“月月紅月月紅”，自然花期自然花期(huq)5至至11月月，開花連續(xù)不斷開花連續(xù)不斷 ，通常扦插就可以成活通常扦插就可以成活。 第二頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解課題課題(kt)(kt)2 2 月季的花藥培月季的花藥培養(yǎng)養(yǎng)第三頁，共三十六頁。1.識記被子植物花粉發(fā)育的過程。2.通過學(xué)習(xí)花藥培養(yǎng)的基本技術(shù)(jsh)，培養(yǎng)設(shè)計(jì)試驗(yàn)、動手操作、分析解釋實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的能力。第四頁，共三十

2、六頁。1.被子植物花粉(hufn)發(fā)育過程。 2.花藥離體培養(yǎng)過程。第五頁，共三十六頁?；ㄋ庪x體培養(yǎng)(piyng)過程。第六頁，共三十六頁。 【導(dǎo)學(xué)案(xu n)反饋】第七頁，共三十六頁。小 組優(yōu) 秀 個(gè) 人得分 1組 2組 3組 4組 5組 6組 小 組優(yōu) 秀 個(gè) 人得分 7組 8組 9組 10組 11組 第八頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解知識(zh shi)回顧 單倍體育種單倍體育種(y zhng)的過程？的過程？花藥花藥(huyo)離體培養(yǎng)（離體培養(yǎng)（N）單倍體植株（單倍體植株（N）秋水仙素處理，使秋水仙素處理，使染色體翻倍染色體翻倍植株（植株（2N）特點(diǎn)：特點(diǎn)：1 明顯縮短育種年限

3、明顯縮短育種年限2 后代植株都為純合子。后代植株都為純合子。正常植株（正常植株（2N）第九頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解花的結(jié)構(gòu)花的結(jié)構(gòu)(jigu)花托花托(hutu)花萼花萼花瓣花瓣雄蕊雄蕊(xingru)花藥花藥花絲花絲雌蕊雌蕊柱頭柱頭花柱花柱子房子房第十頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解花絲花絲(hu s)花藥花藥(huyo)：囊狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)有很多花粉囊狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)有很多花粉1 雄蕊雄蕊一、基礎(chǔ)知識一、基礎(chǔ)知識2 花粉的概念花粉的概念:由由花粉母細(xì)胞花粉母細(xì)胞經(jīng)過經(jīng)過減數(shù)分裂減數(shù)分裂形成的形成的單單倍體的生殖細(xì)胞倍體的生殖細(xì)胞.第十一頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解被子植物花粉被子植物

4、花粉(hufn)的發(fā)育過的發(fā)育過程程小孢子母細(xì)胞小孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂減數(shù)分裂4個(gè)小孢子個(gè)小孢子(小孢子四分小孢子四分(s fn)體時(shí)期體時(shí)期)小孢子小孢子(單核居中期單核居中期) 小孢子小孢子(單核靠邊期單核靠邊期)小孢子小孢子 生殖細(xì)胞核生殖細(xì)胞核+花粉管細(xì)胞核花粉管細(xì)胞核有絲分裂有絲分裂（花粉粒的雙核期）（花粉粒的雙核期）生殖細(xì)胞將再進(jìn)行一次有絲分裂生殖細(xì)胞將再進(jìn)行一次有絲分裂(yu s fn li)，形成兩個(gè)精子，形成兩個(gè)精子第十二頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解小孢子母細(xì)胞（小孢子母細(xì)胞（2n）小孢子時(shí)期（小孢子時(shí)期（n）四分體時(shí)期（四分體時(shí)期（n）雙核期雙核期4個(gè)生殖細(xì)胞核（個(gè)生殖

5、細(xì)胞核（n）4個(gè)花粉管細(xì)胞核（個(gè)花粉管細(xì)胞核（n）4個(gè)生殖細(xì)胞（個(gè)生殖細(xì)胞（n）4個(gè)營養(yǎng)細(xì)胞（個(gè)營養(yǎng)細(xì)胞（n）42個(gè)精子個(gè)精子(n)有絲分裂有絲分裂減數(shù)分裂減數(shù)分裂單核期（單核期（n）有絲分裂有絲分裂第十三頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解注意注意：二核花粉粒二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管細(xì)胞核和生殖細(xì)胞核。（精：成熟的花粉粒中，只含花粉管細(xì)胞核和生殖細(xì)胞核。（精子子(jngz)在花粉管中形成）在花粉管中形成）4個(gè)小孢子個(gè)小孢子減數(shù)分裂減數(shù)分裂有絲分裂有絲分裂4個(gè)花粉管細(xì)胞核個(gè)花粉管細(xì)胞核4個(gè)生殖細(xì)胞核個(gè)生殖細(xì)胞核有絲分裂有絲分裂8個(gè)精子個(gè)精子1花粉母細(xì)胞花粉母細(xì)胞三核花粉粒三核花粉粒

6、：有些：有些(yuxi)植物的花粉，在成熟前，生殖細(xì)胞進(jìn)行一次有植物的花粉，在成熟前，生殖細(xì)胞進(jìn)行一次有絲分裂，形成兩個(gè)精子，這樣的花粉在成熟時(shí)，含有一個(gè)花粉管細(xì)胞核和兩絲分裂，形成兩個(gè)精子，這樣的花粉在成熟時(shí)，含有一個(gè)花粉管細(xì)胞核和兩個(gè)精子個(gè)精子。例題例題1：兩個(gè)：兩個(gè)(lin )精子和花粉管細(xì)胞核的精子和花粉管細(xì)胞核的基因型基因型相同？相同？2NNNN第十四頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解 1、關(guān)于被子植物花粉發(fā)育的說法，不正確的是（、關(guān)于被子植物花粉發(fā)育的說法，不正確的是（ ） A、花粉粒是在花藥中的花粉囊里形成的、花粉粒是在花藥中的花粉囊里形成的 B、被子植物精子的形成是直接減數(shù)分裂

7、的結(jié)果、被子植物精子的形成是直接減數(shù)分裂的結(jié)果 C、被子植物的花粉的發(fā)育要經(jīng)歷四分、被子植物的花粉的發(fā)育要經(jīng)歷四分(s fn)體時(shí)期、單核期、雙體時(shí)期、單核期、雙核期等階段核期等階段 D、花粉粒在發(fā)育過程中，核先位于細(xì)胞一側(cè)，再移到細(xì)、花粉粒在發(fā)育過程中，核先位于細(xì)胞一側(cè)，再移到細(xì)胞中央胞中央BD注：花粉注：花粉(hufn)(hufn)母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成4 4個(gè)單核花粉個(gè)單核花粉(hufn)(hufn)粒，每個(gè)花粉粒，每個(gè)花粉(hufn)(hufn)粒的細(xì)胞核進(jìn)行一次有絲分裂形成粒的細(xì)胞核進(jìn)行一次有絲分裂形成1 1個(gè)花粉個(gè)花粉(hufn)(hufn)管細(xì)胞核和管細(xì)胞核和1

8、 1個(gè)生個(gè)生殖細(xì)胞核，每個(gè)生殖細(xì)胞核再進(jìn)行一次有絲分裂生成殖細(xì)胞核，每個(gè)生殖細(xì)胞核再進(jìn)行一次有絲分裂生成2 2個(gè)精子。個(gè)精子。第十五頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解雌蕊雌蕊(cru) 的結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)第十六頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解移栽移栽(y zi)花藥中花藥中的花粉的花粉胚狀體胚狀體脫分化脫分化 愈傷組織愈傷組織 花藥中花藥中的花粉的花粉脫分化脫分化 分化分化 叢芽叢芽 再分化再分化 叢芽叢芽 誘導(dǎo)誘導(dǎo)生根生根體細(xì)胞胚（胚狀體）：在組織培養(yǎng)過程中，某些細(xì)胞在形態(tài)上轉(zhuǎn)變?yōu)轶w細(xì)胞胚（胚狀體）：在組織培養(yǎng)過程中，某些細(xì)胞在形態(tài)上轉(zhuǎn)變?yōu)榕c與合子發(fā)育成的胚非常合子發(fā)育成的胚非常(fichng)

9、相似的結(jié)構(gòu)相似的結(jié)構(gòu)，發(fā)育過程亦與合子胚類似，發(fā)育過程亦與合子胚類似原因：培養(yǎng)基中的激素種類及濃度配比原因：培養(yǎng)基中的激素種類及濃度配比第十七頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解部分花藥部分花藥(huyo)(huyo)通過胚狀體途徑形成小植株通過胚狀體途徑形成小植株煙草煙草(ynco)花藥培養(yǎng)花藥培養(yǎng)胚狀體發(fā)育(fy)途徑第十八頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解愈傷組織愈傷組織(zzh)轉(zhuǎn)接種到再生培養(yǎng)基轉(zhuǎn)接種到再生培養(yǎng)基愈傷組織分化愈傷組織分化(fnhu)形成再生形成再生植株植株水稻水稻(shudo)花藥培養(yǎng)花藥培養(yǎng)愈傷組織發(fā)育途徑部分花藥產(chǎn)生愈傷組織部分花藥產(chǎn)生愈傷組織接種在平板上的水稻花藥

10、接種在平板上的水稻花藥第十九頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解 1、材料的選擇、材料的選擇 不同植物的誘導(dǎo)成功率不同不同植物的誘導(dǎo)成功率不同. 同一植物的不同生理狀況也對誘導(dǎo)成功率有同一植物的不同生理狀況也對誘導(dǎo)成功率有直接的影響直接的影響. （一般選月季的初花期）（一般選月季的初花期） 合適合適(hsh)的花粉發(fā)育期的花粉發(fā)育期（單核居中期與靠邊期之間）（單核居中期與靠邊期之間） 2、培養(yǎng)基的組成、培養(yǎng)基的組成（ MSMS培養(yǎng)基培養(yǎng)基+ +不同比例的植物生長不同比例的植物生長調(diào)節(jié)激素）調(diào)節(jié)激素）此外，植株生長條件、材料此外，植株生長條件、材料(cilio)低溫預(yù)處理、接種密度等低溫預(yù)處理、接

11、種密度等(三三)、影響花藥培養(yǎng)的主要、影響花藥培養(yǎng)的主要(zhyo)因素因素注意：選擇最合適的花粉發(fā)育時(shí)期注意：選擇最合適的花粉發(fā)育時(shí)期:單核單核期期 不選擇單核期之前花藥原因：不選擇單核期之前花藥原因：花花藥質(zhì)地幼嫩，容易破碎藥質(zhì)地幼嫩，容易破碎； 不選擇單核期之后花藥原因：不選擇單核期之后花藥原因：花瓣花瓣開始松動，給材料消毒帶來困難困難開始松動，給材料消毒帶來困難困難； 挑選單核期花藥方法：應(yīng)當(dāng)選擇挑選單核期花藥方法：應(yīng)當(dāng)選擇完全未開放的花蕾，微生物少，易消完全未開放的花蕾，微生物少，易消毒。毒。第二十頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)(shyn)操作操作一、材料一、材料(cil

12、io)的選取的選取二、材料的消毒二、材料的消毒三、接種和培養(yǎng)三、接種和培養(yǎng)第二十一頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解（一）材料（一）材料(cilio)選取選取 2、通過、通過鏡檢鏡檢來確定是否處于適宜的發(fā)育期來確定是否處于適宜的發(fā)育期。 方法：方法：醋酸醋酸(c sun)洋紅法洋紅法(將染色體染成紅色將染色體染成紅色) 焙花青焙花青-鉻礬法鉻礬法(花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色)。1、從花藥看從花藥看：月季的初花期：月季的初花期(huq) 從花粉看：從花粉看：單核期單核期 從花蕾看從花蕾看：完全未開放的：完全未開放的 花藥（載玻片上）花藥（載玻片上）1%的醋酸洋紅的醋酸洋紅1滴滴用鑷

13、柄將花藥搗碎，蓋上蓋玻片用鑷柄將花藥搗碎，蓋上蓋玻片鏡檢（花粉粒的細(xì)胞核被染成紅色）鏡檢（花粉粒的細(xì)胞核被染成紅色） 花藥（在卡諾氏固定液中處理花藥（在卡諾氏固定液中處理20min）取出，置于載玻片上取出，置于載玻片上焙焙花青鉻礬溶液染色花青鉻礬溶液染色蓋上蓋玻片蓋上蓋玻片鏡檢（花粉粒的細(xì)胞核被染成藍(lán)鏡檢（花粉粒的細(xì)胞核被染成藍(lán)黑色）黑色）第二十二頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解第二十三頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解（二）材料（二）材料(cilio)的消毒的消毒5 5、無菌水沖洗、無菌水沖洗3 35 5次次 花藥的外面有花萼、花瓣保護(hù)花藥的外面有花萼、花瓣保護(hù)(boh)(boh)，通常處

14、于無菌狀態(tài)，通常處于無菌狀態(tài)1、花蕾用、花蕾用體積體積(tj)分?jǐn)?shù)為分?jǐn)?shù)為70%的酒精的酒精浸泡浸泡30秒秒2、無菌水清洗、無菌水清洗3、無菌吸水紙吸干花蕾表面的水分、無菌吸水紙吸干花蕾表面的水分4、放入、放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞的氯化汞溶液中溶液中24分鐘分鐘 （質(zhì)量質(zhì)量分?jǐn)?shù)為分?jǐn)?shù)為1%的的次氯酸鈣溶液次氯酸鈣溶液或飽和漂白粉溶液或飽和漂白粉溶液）第二十四頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解為什么花瓣松動為什么花瓣松動(sngdng)會會給材料的消毒帶來困難？給材料的消毒帶來困難？答：花瓣松動后，微答：花瓣松動后，微生物就可能侵入生物就可能侵入(qnr)到花藥到花藥，給材料的消

15、毒帶來困難。，給材料的消毒帶來困難。為什么花瓣松動會給材為什么花瓣松動會給材料料(cilio)的消毒帶來困難？的消毒帶來困難？第二十五頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解（三）接種（三）接種(jizhng)和培養(yǎng)和培養(yǎng) 1 1 滅菌后花蕾，要在滅菌后花蕾，要在 下除去下除去(ch q)(ch q)萼片和花瓣，并萼片和花瓣，并立即將花藥接種到培養(yǎng)基上。立即將花藥接種到培養(yǎng)基上。 3 通常每瓶接種花藥通常每瓶接種花藥(huyo) ，溫度控制在，溫度控制在 左左右，右， 。幼小植株形成后才。幼小植株形成后才 。 2 在剝離花藥時(shí)，要盡量在剝離花藥時(shí)，要盡量 （否則接種后，容易從否則接種后，容易從受傷部

16、位產(chǎn)生二倍體的愈傷組織受傷部位產(chǎn)生二倍體的愈傷組織），同時(shí)還要徹底），同時(shí)還要徹底 ，因?yàn)榕c花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成因?yàn)榕c花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成。 一般經(jīng)過一般經(jīng)過20-30天培養(yǎng)后，會發(fā)現(xiàn)花藥開裂，長出天培養(yǎng)后，會發(fā)現(xiàn)花藥開裂，長出愈傷組織或釋放出愈傷組織或釋放出胚狀體胚狀體。將愈傷組織及時(shí)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上，以便進(jìn)一步分化出。將愈傷組織及時(shí)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上，以便進(jìn)一步分化出再生植株。再生植株。 4 進(jìn)一步鑒定和篩選：進(jìn)一步鑒定和篩選：常常會出現(xiàn)染色體倍性的變化常常會出現(xiàn)染色體倍性的變化無菌條件無菌條件不損傷花藥不損傷花藥去除花絲去除花絲7-10個(gè)個(gè)2

17、5不需要光照不需要光照需要光照需要光照主要原因是主要原因是花花粉管核和生粉管核和生殖核融合殖核融合造造成的成的第二十六頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解植物組織培養(yǎng)技術(shù)植物組織培養(yǎng)技術(shù)(jsh)與花藥培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)(jsh)的比較的比較項(xiàng)目項(xiàng)目 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng) 花藥培養(yǎng)技術(shù)花藥培養(yǎng)技術(shù)相同點(diǎn)相同點(diǎn)1 、培養(yǎng)基配制方法、無菌技術(shù)及接種操培養(yǎng)基配制方法、無菌技術(shù)及接種操作等基本相同。作等基本相同。2 、都經(jīng)過了脫分化都經(jīng)過了脫分化不同點(diǎn)不同點(diǎn)1 、離體培養(yǎng)的外植體為離體培養(yǎng)的外植體為體細(xì)胞體細(xì)胞。2 、有絲分裂有絲分裂(yu s fn li)的過程，的過程，染色體數(shù)量不染色體數(shù)量

18、不變變。1 、花粉是花粉是生殖細(xì)胞生殖細(xì)胞，得，得到的到的單倍體植株單倍體植株，弱小，弱小(ruxio)且高度不育。且高度不育。2、秋水仙素處理，染色秋水仙素處理，染色體加倍，恢復(fù)正常的染色體加倍，恢復(fù)正常的染色體數(shù)，為體數(shù)，為。第二十七頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解課題成果課題成果(chnggu)評價(jià)評價(jià) 三三 接種是否成功接種是否成功人工人工(rngng)種子：胚狀體種子：胚狀體 /頂芽頂芽 /不頂芽等不頂芽等+人工人工(rngng)種皮種皮+人工人工(rngng)胚乳胚乳課外知識課外知識第二十八頁，共三十六頁。月季的花藥培養(yǎng)詳解練習(xí)：小麥高桿（練習(xí)：小麥高桿（D）對矮桿（）對矮桿（d

19、）為顯性，抗銹病（）為顯性，抗銹?。═）對不抗銹病（）對不抗銹?。╰）為顯性，現(xiàn)有高桿）為顯性，現(xiàn)有高桿抗銹病和矮桿不抗病的兩種純合體，要獲得矮桿抗銹病的良種，可用雜交育種和單倍體育種法抗銹病和矮桿不抗病的兩種純合體，要獲得矮桿抗銹病的良種，可用雜交育種和單倍體育種法，步驟，步驟(bzhu)如下：如下： 高桿抗銹病（高桿抗銹?。―DTT） 矮稈不抗銹病矮稈不抗銹病 （ddtt） F1：的基因型和表現(xiàn)型的基因型和表現(xiàn)型 a 各種各種( zhn)配子的種類配子的種類 a 符合要求的單倍體的基因型符合要求的單倍體的基因型 良種的基因型表現(xiàn)型良種的基因型表現(xiàn)型 單倍體育種方法的主要優(yōu)點(diǎn)是單倍體育種方法的主要優(yōu)點(diǎn)是 。1 、可以明顯可以明顯(mngxin)縮短育種年縮短育種年限限 2、 后代為純合子后代為純合子P：DdTt，高稈抗銹病，高稈抗銹病DT，Dt,dT, dtddTT矮稈銹病矮稈銹病雜交育種雜交育種花藥離體培養(yǎng)花藥離體培養(yǎng)DT，Dt,dT, dt秋水仙素處理秋水仙素處理第二十九頁，共三十六頁