實(shí)驗(yàn)6-胰島素和腎上腺素對家兔血糖濃度的影響

1、掌握血糖掌握血糖(blood sugar)的測定方法及的測定方法及 激素激素(hormone)對對血糖濃度的影響。血糖濃度的影響。了了解血糖測定的臨床意義。解血糖測定的臨床意義。機(jī)體的血糖水平受多種激素的調(diào)節(jié)而維持穩(wěn)定機(jī)體的血糖水平受多種激素的調(diào)節(jié)而維持穩(wěn)定影響血糖的激素分為兩類：影響血糖的激素分為兩類：降低血糖的激素：胰島素降低血糖的激素：胰島素(insulin)升高血糖的激素：腎上腺素升高血糖的激素：腎上腺素(adrenaline)、胰升糖素、胰升糖素、 糖皮質(zhì)激素和生長激素糖皮質(zhì)激素和生長激素 血漿血漿(plasma)：全血經(jīng)抗凝處理后得到的液體成分，：全血經(jīng)抗凝處理后得到的液體成分，

2、含有凝血因子、纖維蛋白原等含有凝血因子、纖維蛋白原等血清血清(serum)：全血凝固后析出的液體，：全血凝固后析出的液體， 不含纖維蛋白原不含纖維蛋白原620 nm測定待測血樣的吸光度測定待測血樣的吸光度(A)與同樣處理的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液比較與同樣處理的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液比較(標(biāo)準(zhǔn)管法標(biāo)準(zhǔn)管法)即可求得血樣中葡萄糖的含量。即可求得血樣中葡萄糖的含量。酸性、加熱酸性、加熱 -3 H2O羥羥甲基糠醛甲基糠醛鄰甲苯胺鄰甲苯胺 醛亞胺（藍(lán)色）醛亞胺（藍(lán)色）葡萄糖葡萄糖(glucose)2、血樣的采集、血樣的采集 1）心臟內(nèi)取血）心臟內(nèi)取血5ml，加入抗凝劑（草酸鈉）【胰，加入抗凝劑（草酸鈉）【胰-1、腎、腎

3、-1】 2）皮下注射）皮下注射 胰胰島素島素0.5ml/kg（2U/kg），），1小時(shí)后小時(shí)后 1%腎上腺素腎上腺素0.4ml/kg，半小時(shí)后，半小時(shí)后 3）心臟內(nèi)取血）心臟內(nèi)取血5ml，加入抗凝劑【胰，加入抗凝劑【胰-2、腎、腎-2】1、動(dòng)物的準(zhǔn)備、動(dòng)物的準(zhǔn)備 家兔兩只，禁食一晚。標(biāo)記后，測量體重并記錄。家兔兩只，禁食一晚。標(biāo)記后，測量體重并記錄。4、鄰甲苯胺法測定血糖濃度、鄰甲苯胺法測定血糖濃度 1）取大試管，按）取大試管，按Page78表格添加試劑表格添加試劑 2）混勻各管，沸水浴中加熱）混勻各管，沸水浴中加熱10min后取出，流水冷卻。后取出，流水冷卻。 3）用空白管校正吸光度零點(diǎn)，讀

4、取各管）用空白管校正吸光度零點(diǎn)，讀取各管620nm的的吸光度。吸光度。3、血漿的制備、血漿的制備 血樣采集后，血樣采集后，2000rpm離離心心5min，取上清。，取上清。空白空白對照對照注射激素前注射激素前注射激素后注射激素后胰島素組胰島素組胰胰-1胰胰-2腎上腺組腎上腺組腎腎-1腎腎-2G胰胰-1 G胰胰-2G腎腎-1 G腎腎-2A測定：測定：m胰胰-1、m胰胰-2、m腎腎-1、m腎腎-2 A測定測定 m標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn) A標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)血糖濃度血糖濃度 = 1000 V測定測定 180 g/mol1、鄰甲苯胺試劑中含冰乙酸，、鄰甲苯胺試劑中含冰乙酸，謹(jǐn)防腐蝕分光光度計(jì)謹(jǐn)防腐蝕分光光度計(jì)2、分光光度計(jì)的

5、使用方法、分光光度計(jì)的使用方法3、微量移液器的使用、微量移液器的使用4、離心機(jī)使用前必須配平：質(zhì)量配平、離心機(jī)使用前必須配平：質(zhì)量配平&位置配平位置配平5、電磁爐使用前、電磁爐使用前10min打開；絕對不可干煮；打開；絕對不可干煮； 加加熱完成后，用夾子取出試管，絕對不可用手拿熱完成后，用夾子取出試管，絕對不可用手拿6、兔子的抓取、固定、心臟采血、皮下注射方法、兔子的抓取、固定、心臟采血、皮下注射方法1、打開電源，調(diào)節(jié)旋鈕至需要的波長，預(yù)熱、打開電源，調(diào)節(jié)旋鈕至需要的波長，預(yù)熱2030min2、1檔（空白管），檔（空白管），T模式下調(diào)模式下調(diào)100%，顯示，顯示“Blank”、“100

6、”3、拉桿拉至、拉桿拉至1.5檔，檔，T模式下調(diào)模式下調(diào)0%，顯示，顯示“0.00”4、換到、換到A模式，拉至模式，拉至2、3、4檔，讀取各個(gè)樣品的吸光度檔，讀取各個(gè)樣品的吸光度拉桿，拉桿，0-4檔檔樣品池樣品池讀數(shù)讀數(shù)波長波長毛面毛面光面光面1、分清光面、毛面。手應(yīng)接觸毛面，光線從光面通過、分清光面、毛面。手應(yīng)接觸毛面，光線從光面通過2、用溶液潤洗、用溶液潤洗2-3次，裝至次，裝至2/3至至4/5體積體積3、粗紙吸水、柔紙擦亮光面、粗紙吸水、柔紙擦亮光面比色杯比色杯血糖升高血糖升高 1、糖尿病、糖尿病 2、內(nèi)分泌疾?。杭卓骸⒛I上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)、嗜鉻細(xì)胞瘤、內(nèi)分泌疾?。杭卓骸⒛I上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)、嗜鉻細(xì)胞瘤、 胰高血糖素瘤胰高血糖素瘤 3、妊娠高血糖、妊娠高血糖 4、胰腺疾?。簤乃佬砸认傺住⒁认偈中g(shù)、原發(fā)胰腺癌、胰腺疾?。簤乃佬砸认傺?、胰腺手術(shù)、原發(fā)胰腺癌 5、應(yīng)激性高血糖、應(yīng)激性高血糖血糖降低血糖降低 1、胰島、胰島 細(xì)胞瘤或增生細(xì)胞瘤或增生 2、內(nèi)分泌疾?。捍贵w前葉功能減退癥、腎上腺皮質(zhì)功能減低、內(nèi)分泌疾?。捍贵w前葉功能減退癥、腎上腺皮質(zhì)功能減低 3、肝源性低血糖，各種肝病致肝功能衰竭、肝源性低血糖，各種肝病致肝功能衰竭測試時(shí)間：測試時(shí)間：515