鹽酸氟西汀驗(yàn)證實(shí)例

1、徐禾豐分析方法驗(yàn)證鹽酸氟西汀驗(yàn)證實(shí)例現(xiàn)代驗(yàn)證系列簡(jiǎn)介 美國(guó)某公司生產(chǎn)10mg和20mg鹽酸氟西汀兩種相膠囊 其重量與配方相同,僅鹽酸氟西汀與輔料比例不同 所驗(yàn)證方法是公司內(nèi)部對(duì)美國(guó)和歐盟市場(chǎng)產(chǎn)品產(chǎn)品放行和穩(wěn)定性研究中使用的含量和雜質(zhì)分析的方法 該分析方法已經(jīng)建立2含量與雜質(zhì)的分析方法基本一致驗(yàn)證項(xiàng)目清單1. 精密度2. 線性3. 范圍4. 準(zhǔn)確性5. 低濃度鹽酸氟西汀驗(yàn)證6. m-鹽酸氟西汀驗(yàn)證7. 選擇性8. 耐用性3精密度項(xiàng)目:1.系統(tǒng)重復(fù)性2.方法重復(fù)性3.中間精密度4系統(tǒng)重復(fù)性方法 按照分析方法要求,配制鹽酸氟西汀標(biāo)準(zhǔn)溶液 重復(fù)進(jìn)樣5次計(jì)算 峰面積平均值 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差5目的是檢查系統(tǒng)是

2、否可靠方法重復(fù)性方法 按照分析方法要求,分別配制20mg鹽酸氟西汀樣品溶液6個(gè) 分別進(jìn)樣計(jì)算 含量相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差6目的是檢查分析方法本身是否可靠中間精密度方法 由另外一個(gè)分析員 在不同日期 另外的儀器上 按照分析方法要求 分別配制20mg鹽酸氟西汀樣品溶液6個(gè)計(jì)算 含量及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差7目的是檢查分析方法對(duì)不同人,日期,儀器是否可靠線性方法 正常含量分析用標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的50%到200%范圍內(nèi) 均勻選擇5個(gè)點(diǎn) 配制相應(yīng)濃度的鹽酸氟西汀含量標(biāo)準(zhǔn)溶液 分別進(jìn)樣計(jì)算 線性回歸分析 相關(guān)系數(shù) 斜率 Y軸截距8范圍方法 正常20mg樣品含量分析濃度50%到200%范圍內(nèi) 均勻選5個(gè)點(diǎn) 并配制鹽酸氟西汀樣品溶液

3、 分別進(jìn)樣計(jì)算 線性回歸分析 相關(guān)系數(shù) 斜率 Y軸截距9準(zhǔn)確性項(xiàng)目:1. 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確性2. 樣品準(zhǔn)確性10標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確性方法 按照分析方法要求 配制鹽酸氟西汀標(biāo)準(zhǔn)溶液 重復(fù)進(jìn)樣5次計(jì)算 準(zhǔn)確性 測(cè)定濃度值用峰面積按照回歸方程進(jìn)行計(jì)算11樣品準(zhǔn)確性方法 按照產(chǎn)品的標(biāo)示量 在70%到180%正常標(biāo)示量選均勻選擇4個(gè)點(diǎn) 混合輔料與及鹽酸氟西汀 每點(diǎn)3個(gè)樣品 分別進(jìn)樣計(jì)算 回收率 測(cè)定濃度值用峰面積按照回歸方程進(jìn)行計(jì)算12低濃度鹽酸氟西汀驗(yàn)證項(xiàng)目:1. 線性2. 準(zhǔn)確性3. 系統(tǒng)重復(fù)性4. 定量限度5. 檢測(cè)限度13線性方法 按照分析方法要求 均勻選擇6個(gè)點(diǎn) 配制標(biāo)示量的0.02%到1.0%含量標(biāo)準(zhǔn)溶液

4、 分別進(jìn)樣計(jì)算 線性回歸分析 相關(guān)系數(shù) 斜率 Y軸截距14準(zhǔn)確性方法 配制雜質(zhì)濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液 進(jìn)樣6次計(jì)算 按峰面積用回歸線性方程來(lái)計(jì)算測(cè)量濃度 平均值 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差15系統(tǒng)重復(fù)性方法 配制工作濃度的0.02%和0.05%標(biāo)準(zhǔn)溶液 分別進(jìn)樣6次計(jì)算 峰面積的平均值 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差16定量限度用系統(tǒng)重復(fù)性實(shí)驗(yàn)中的標(biāo)準(zhǔn)偏和線性回歸方程中的斜率差計(jì)算17檢測(cè)限度用系統(tǒng)重復(fù)性實(shí)驗(yàn)中的標(biāo)準(zhǔn)偏和線性回歸方程中的斜率差計(jì)算18m-鹽酸氟西汀驗(yàn)證項(xiàng)目:1. 線性2. 檢測(cè)限度3. 定量限度4. 準(zhǔn)確性5. 精密度 方法重復(fù)性 中間精密度19m-鹽酸氟西汀簡(jiǎn)介m-鹽酸氟西汀是產(chǎn)品中的一個(gè)雜質(zhì)m-鹽酸氟西汀在0.0

5、5%1.0%區(qū)間呈線性相對(duì)響應(yīng)因子(對(duì)鹽酸氟西汀):F=132.73952/74859534=1.820定量限度根據(jù)鹽酸氟西汀定量限度相對(duì)響應(yīng)值計(jì)算鹽酸m-氟西汀定量限度21檢測(cè)限度根據(jù)鹽酸氟西汀檢測(cè)限度相對(duì)響應(yīng)值計(jì)算鹽酸m-氟西汀檢測(cè)限度22回收方法: 分別6個(gè)標(biāo)空白中加0.05%的m-鹽酸氟西汀進(jìn)樣計(jì)算: 回收率 實(shí)際檢測(cè)值用峰面積按照回歸線性方程計(jì)算23準(zhǔn)確性方法: 在已知m-鹽酸氟西汀含量的樣品中分別在0.4%,0.5%和0.6%3個(gè)水平加入m-鹽酸氟西汀標(biāo)準(zhǔn)品 每組3個(gè)樣品中計(jì)算: 回收率 實(shí)際檢測(cè)值用峰面積按照回歸線性方程計(jì)算24重復(fù)性項(xiàng)目:1. 方法重復(fù)性2. 中間精密度25方法

6、重復(fù)性方法: 按照要求配制溶液 反復(fù)進(jìn)樣6次計(jì)算: 平均值 標(biāo)準(zhǔn)偏差 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差26中間精密度方法: 另外一個(gè)分析員 在不同日期 另外的儀器上按照方法重復(fù)性方法 配制溶液6次 并分別進(jìn)樣計(jì)算: 含量 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差27選擇性降解原樣酸降解堿降解氧化降解日光降解溶液加熱降解粉末加熱降解系統(tǒng)適應(yīng)性空白28簡(jiǎn)介 降解產(chǎn)物的選擇性試驗(yàn)是分析方法穩(wěn)定性指示性驗(yàn)證的一個(gè)重要部分 主要目的是通過(guò)試驗(yàn)證明各種降解的產(chǎn)物與所要分析的物質(zhì)可以完全分開(kāi) 本試驗(yàn)中的主要設(shè)備是二極管矩陣檢測(cè)器 并通過(guò)計(jì)算純度角,匹配角,純度閾值,匹配閾值,含量來(lái)證明峰的純度29原樣品方法 20mg膠囊按照規(guī)定的方法進(jìn)樣分析 標(biāo)準(zhǔn)品按照

7、規(guī)定的方法進(jìn)樣分析30酸降解樣品 稱量大約等量20mg的樣品 轉(zhuǎn)移到50ml容量瓶中 加入20ml稀釋劑 并超聲處理10分鐘 加1ml的濃鹽酸 放置18小時(shí) 用10N氫氧化鈉中和到pH5.5 稀釋到刻度 過(guò)濾31酸降解標(biāo)準(zhǔn)品 稱量大約22mg的標(biāo)準(zhǔn)品 轉(zhuǎn)移到50ml容量瓶中 加入20ml稀釋劑,加2ml的鹽酸 放置18小時(shí) 用10N氫氧化鈉中和到pH5.5 稀釋到刻度32堿降解樣品 稱量大約等量20mg的樣品 轉(zhuǎn)移到50ml容量瓶中 加入20ml稀釋劑,并超聲處理10分鐘 加1ml的5N氫氧化鈉 放置18小時(shí) 用5N鹽酸中和到pH5.5 稀釋到刻度 過(guò)濾33堿降解標(biāo)準(zhǔn)品 稱量大約22mg的標(biāo)準(zhǔn)

8、品 轉(zhuǎn)移到50ml容量瓶中 加入20ml稀釋劑 加2ml的5N氫氧化鈉 放置18小時(shí) 用5N鹽酸中和到pH5.5 稀釋到刻度34氧化降解樣品 稱量大約等量20mg的樣品 轉(zhuǎn)移到50ml容量瓶中 加入20ml稀釋劑 并超聲處理10分鐘 加1ml的30%過(guò)氧化氫 放置5小時(shí) 稀釋到刻度 過(guò)濾35氧化降解標(biāo)準(zhǔn)品 稱量大約22mg的標(biāo)準(zhǔn)品 轉(zhuǎn)移到50ml容量瓶中 加入20ml稀釋劑 2ml的30%過(guò)氧化氫 放置5小時(shí) 稀釋到刻度36陽(yáng)光降解樣品 稱量大約等量20mg的樣品 在500w/hr.cell下曝光1小時(shí) 設(shè)定BST35C,ACT45C37陽(yáng)光降解標(biāo)準(zhǔn)品 稱量大約等量20mg的樣品 在500w/

9、hr.cell下曝光1.5小時(shí) 設(shè)定BST35C,ACT42C38溶液加熱降解樣品 稱量大約等量20mg的樣品 轉(zhuǎn)移到50ml容量瓶中 加入20ml稀釋劑 并超聲處理10分鐘 稀釋到刻度 取4ml溶液并轉(zhuǎn)移到坩堝內(nèi) 與105C加熱2小時(shí) 冷卻到室溫 過(guò)濾39溶液加熱降解標(biāo)準(zhǔn)品 4ml的工作標(biāo)準(zhǔn)液轉(zhuǎn)移到坩堝內(nèi) 與105C加熱2小時(shí) 冷卻到室溫 過(guò)濾40粉末加熱降解樣品 稱量大約等量20mg的樣品 轉(zhuǎn)移到合適的試管中 于100C加熱4小時(shí) 冷卻到室溫 轉(zhuǎn)移到50ml容量瓶 加入20ml稀釋劑 并超聲處理10分鐘 稀釋到刻度 過(guò)濾41粉末加熱降解標(biāo)準(zhǔn)品 稱量大約等量45mg的標(biāo)準(zhǔn)品 轉(zhuǎn)移到合適的試管

10、中 于100C加熱4小時(shí) 冷卻到室溫 轉(zhuǎn)移到100ml容量瓶 稀釋到刻度 過(guò)濾系統(tǒng)適應(yīng)性 系統(tǒng)適應(yīng)性按照規(guī)定方法進(jìn)行 氟西汀與m-氟西汀間分離度應(yīng)不小于2.0 氟西汀峰拖尾因子應(yīng)不大于2.0 氟西汀的典型保留時(shí)間大約在9.5到10.0分之間43空白 分析兩個(gè)批號(hào)的空白與氟西汀,并分析混合樣品 沒(méi)發(fā)現(xiàn)干擾峰44標(biāo)準(zhǔn)與樣品溶液的穩(wěn)定性項(xiàng)目:1. 標(biāo)準(zhǔn)溶液2. 樣品溶液45標(biāo)準(zhǔn)溶液穩(wěn)定性方法 配制標(biāo)準(zhǔn)溶液 冷藏于4C8C放置30天以上 與兩個(gè)新配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液一道測(cè)試46樣品溶液穩(wěn)定性方法 配制樣品溶液 冷藏放置48小時(shí) 重新分析47耐用性項(xiàng)目:1. 提取效率2. 析因設(shè)計(jì)48提取效率方法 取三個(gè)樣品

11、 按照要求配置溶液 但超聲分為5,10和15分鐘 每個(gè)樣品測(cè)定3次49析因設(shè)計(jì)因素項(xiàng)目規(guī)格柱Shandon, Hypersil BDS C-8, 5m, 1504.6mm流動(dòng)相溶液A:溶液B(55:45)溶液A三乙胺緩沖液:乙腈:四氫呋喃(75:15:10)溶液B三乙胺緩沖液:乙腈:四氫呋喃(65:20:15)流量1.41.6mL/min溫度30C(2C)進(jìn)樣量10mL檢測(cè)器UV detector l = 227nm, Flow Cell = 10mm.稀釋劑溶液B50析因設(shè)計(jì)參數(shù)1. 流動(dòng)相構(gòu)成2. 流量參數(shù)3. 柱溫4. 柱生產(chǎn)商51柱生產(chǎn)商事件柱溫(C)流量(mL/min)溶液A(%)柱型號(hào)1301.555Shandon, Hypersil, BDS C-8, 5m, 150 x 4.6mm -1271.060Hypersil, BDS C-8, 5m, 150 x 4.6mm52析因設(shè)計(jì)序號(hào)溶液A(%)柱流量(ml/min