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文檔簡介

1、北京中醫(yī)藥大學(xué)北京中醫(yī)藥大學(xué)東 直 門 醫(yī) 院 檢 驗 科東 直 門 醫(yī) 院 檢 驗 科 姚興姚興偉偉1主要內(nèi)容一、概一、概 述述二、標本采集和運送二、標本采集和運送三、微生物形態(tài)學(xué)檢查三、微生物形態(tài)學(xué)檢查四、細菌分離、培養(yǎng)與鑒定四、細菌分離、培養(yǎng)與鑒定五、藥物敏感性實驗五、藥物敏感性實驗六、細菌的耐藥性六、細菌的耐藥性七、醫(yī)院感染與管理七、醫(yī)院感染與管理21 概念 病原體指可造成人或動物感染疾病的微生物(包括細菌、細菌、病毒、支原體、衣原體、螺旋體、真菌、寄生蟲)。 凡是由病原微生物引起的疾病統(tǒng)稱為感染性疾病。感染性疾病。一、概述32 臨床微生物檢查的任務(wù)(1)為臨床提供快速、準確的病原學(xué)診

2、斷。(2)指導(dǎo)臨床合理使用抗生素。(3)對醫(yī)院感染進行監(jiān)控。一、概述43 臨床微生物學(xué)檢查的程序一、概述5 采集標本是病原學(xué)實驗診斷的第一步,留取標本的質(zhì)量關(guān)系到實驗診斷的結(jié)果正確與否。 實實 驗驗 室室二、標本采集和運送6(一)呼吸道標本 鼻/咽拭子、痰、通過氣管收集的標本均可作為呼吸道標本。1.送檢指征(1)上呼吸道標本病毒性普通感冒伴有明顯咽痛時,懷疑為咽部鏈球菌感染,應(yīng)做細菌培養(yǎng)。細菌性咽扁桃體炎:明顯咽痛、畏寒、發(fā)熱,體溫可達39以上。(2)下呼吸道標本咳嗽、咳痰??┭⒑粑щy。發(fā)熱。胸痛。二、標本采集和運送上呼吸道下呼吸道72.采集注意事項(1)用藥前采集(2)晨起為宜(3)清潔

3、口腔(4)咳深部痰注:作結(jié)核分枝桿菌檢查,痰量要多或留取注:作結(jié)核分枝桿菌檢查,痰量要多或留取2424小時痰液,小時痰液,以提高陽性檢出率。以提高陽性檢出率。二、標本采集和運送83.標本采集方法(1)鼻、咽拭子:鼻拭子鼻拭子:讓病人頭部自然放松,將拭子貼鼻孔壁慢慢轉(zhuǎn)動進入病人一鼻孔內(nèi),至鼻腭處,然后邊擦拭邊旋轉(zhuǎn)慢慢取出。以同一拭子,用同樣的方法擦拭另一鼻孔。咽拭子咽拭子:囑患者用清水反復(fù)漱口,讓病人頭部微仰,嘴張大,并發(fā)“啊”音,露出兩側(cè)咽扁桃體,手持拭子在病人兩側(cè)咽扁桃體稍微用力來回擦拭至少3次,然后再在咽后壁上下擦拭至少3次。二、標本采集和運送9二、標本采集和運送(2)下呼吸道標本(1)自

4、然咳痰法(2)氣管吸出物(氣管插管患者) (3)支氣管鏡采集法 支氣管肺泡灌洗液 防污染毛刷采集上呼吸道下呼吸道10痰標本鏡下分類痰標本鏡下分類注:注:A、B兩種情況的痰標本適合做培養(yǎng),兩種情況的痰標本適合做培養(yǎng),C級標本為不合級標本為不合格標本,應(yīng)重新留?。「駱吮?,應(yīng)重新留?。》旨壏旨壈准毎▊€白細胞(個/LP/LP)鱗狀上皮細胞(個鱗狀上皮細胞(個/LP/LP)A252525C25二、標本采集和運送11二、標本采集和運送鱗狀上皮細胞鱗狀上皮細胞102525個個/ /每低倍視野每低倍視野合格合格12二、標本采集和運送鱗狀上皮細胞鱗狀上皮細胞2525個個/ /每低倍視野每低倍視野 白細胞白細胞

5、1020/20/分或分或COCO2 2分分壓壓32mmHg10.010.010109 9/ L/ L,特別,特別是有是有“核左移核左移”時);時);(4)(4)粒細胞減少(粒細胞減少(1.0 A+B)(2)相加作用:兩種藥物聯(lián)合作用時的活性等于兩種單獨抗菌活性之和。 (AB=A+B) (3)無關(guān)作用:兩種藥物聯(lián)合作用的活性等于其單獨活性。(A=B)(4)拮抗作用:兩種藥物聯(lián)合作用顯著低于單獨抗菌活性。(ABB AB)五、藥物敏感性實驗協(xié)同協(xié)同 相加相加 無關(guān)無關(guān) 拮抗拮抗668 抗生素聯(lián)合應(yīng)用的效果(1)+ 協(xié)同或相加作用。 (2)+ 拮抗作用。(3)+ 無關(guān)作用。(4)+ 協(xié)同或相加作用。

6、(5)+協(xié)同或相加作用。(6)+相加作用。類類繁殖期殺菌劑繁殖期殺菌劑類類靜止期殺菌劑靜止期殺菌劑類類速效抑菌劑速效抑菌劑類類慢效抑菌劑慢效抑菌劑五、藥物敏感性實驗協(xié)同協(xié)同 相加相加 無關(guān)無關(guān) 拮抗拮抗67六、細菌的耐藥性1 細菌耐藥性 細菌耐藥性又稱抗藥性,系指細菌對于抗菌藥物作用的耐受性。 耐藥性根據(jù)其發(fā)生原因可分為天然耐藥性和獲得耐藥性。前者是染色體DNA突變而致,后者往往是質(zhì)粒、噬菌體及其他遺傳物質(zhì)攜帶外來DNA片段導(dǎo)致產(chǎn)生的耐藥性。682 細菌耐藥性機制(1)產(chǎn)生針對抗生素的滅活酶和鈍化酶: -內(nèi)酰胺酶、超廣譜-內(nèi)酰胺酶 氨基糖苷類產(chǎn)生鈍化酶 其他酶類:金屬酶等(2)抗生素作用的靶位

7、改變:MRSA(3)改變細菌外膜通透性:銅綠假單胞菌的亞胺培南通道蛋白OprD缺失后可導(dǎo)致耐藥。(4)主動流出系統(tǒng):細菌可以將進入菌體內(nèi)的藥物泵出體外。注:細菌的耐藥機制往往不是單個存在的!注:細菌的耐藥機制往往不是單個存在的!六、細菌的耐藥性693 當前關(guān)注的耐藥問題(1)革蘭陽性菌革蘭陽性菌 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)、耐萬古霉素金黃色葡萄球菌(VRSA)。 耐萬古霉素腸球菌(VRE)。 耐青霉素肺炎鏈球菌(PRSP)。(2)革蘭陰性菌革蘭陰性菌 產(chǎn)ESBLs腸桿菌科細菌:大腸埃希菌、克雷伯菌、奇異變形桿菌。 產(chǎn)AmpC酶腸桿菌科細菌:陰溝腸桿菌。 多重耐藥的銅綠假單胞菌、不動桿

8、菌、嗜麥芽窄食單胞菌。 產(chǎn)碳青霉烯酶的腸桿菌科細菌。六、細菌的耐藥性704 MRSA的耐藥機制、耐藥性及治療原則(1)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)的主要耐藥機制是產(chǎn)生青霉素結(jié)合蛋白PBP2a,這種蛋白和-內(nèi)酰胺類抗生素的親和力降低,導(dǎo)致細菌耐藥。(2)mecA 基因是PBP2a的編碼基因。(3)MRSA幾乎對所有的-內(nèi)酰胺類抗菌藥物耐藥。(4)目前,首選萬古霉素。六、細菌的耐藥性715 ESBLs的耐藥性和治療原則(1)ESBL(Extended-spectrum-lactamases )超廣譜-內(nèi)酰胺酶 。(2)主要的產(chǎn)酶細菌:大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、奇異變形桿菌。六

9、、細菌的耐藥性72(3)青霉素類、頭孢類、氨曲南耐藥,碳青霉烯類、 內(nèi)酰胺/酶抑制劑、頭霉素類可能敏感。(4)用藥原則: 碳青霉烯類抗生素是治療產(chǎn)ESBLs菌感染的首選藥物。但國內(nèi)外已有報道指出,已經(jīng)分離出耐碳青霉烯類的腸桿菌科細菌,這可能由于碳青霉烯類抗菌藥的廣泛應(yīng)用,造成其耐藥菌株逐漸產(chǎn)生。六、細菌的耐藥性736 耐藥性監(jiān)測的意義(1)指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物,防止濫用抗生素,延緩細菌耐藥性發(fā)生。(2)有助于預(yù)防、控制和遏制本地的、地區(qū)的以及全國的耐藥性發(fā)生發(fā)展。(3)幫助制定修訂經(jīng)驗處理和標準化的用藥指南,為修訂國家藥典提供信息。(4)為研制新的抗菌藥物和改造老抗菌藥物提供信息。六、細菌

10、的耐藥性741 醫(yī)院感染的概念醫(yī)院感染或醫(yī)院獲得性感染是指病人在入院時既不存在、亦不處于潛伏期,而在住院期間獲得的感染,包括在醫(yī)院內(nèi)獲得而于出院后發(fā)生的感染。七、醫(yī)院感染與管理752 醫(yī)院感染的分類和條件(1) 醫(yī)院感染按其感染來源分為內(nèi)源性感染和外源性感染兩種。(2)病原體是內(nèi)源性感染和外源性感染的共同的必備條件, 但外源性感染還必須具備: 感染源。 傳播途徑:直接接觸傳播、間接接觸傳播、空氣傳播、共同媒介傳播、生物媒介傳播。 易感宿主。七、醫(yī)院感染與管理763 醫(yī)院感染的常見致病菌(1)革蘭陽性球菌:金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、腸球菌和鏈球菌。(2)革蘭陰性桿菌:大腸埃希菌、克雷伯菌、銅綠假單胞菌、不動桿菌、腸桿菌等。(3)近來醫(yī)院感染的病原體特點:正常菌群致病增多,新的病原體不斷出現(xiàn)。七、醫(yī)院感染與管理774 醫(yī)院感染的預(yù)防與控制措施(1)對具

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