四川省貿易學校咖啡堿檢驗

1、 孟令國孟令國 四川省貿易學校四川省貿易學校任務五 咖啡堿檢驗任務描述任務分析任務實施任務評價任務描述咖啡堿屬嘌呤類衍生物，能強烈吸收紫外光，物質不同，吸收光譜的范圍也不同。據研究咖啡堿的特征吸收峰是在272-274nm，因此，將茶湯提取液加入堿或醋酸鉛以除去色素和多酚類物質的干擾后，在特定波長下測出吸光度求其量。任務分析茶葉咖啡堿含量與品質、茶樹生育階段、不同器官、外界條件、栽培技術措施等有關。學習咖啡堿的測定方法，可用于品種選育、茶葉品質鑒定等，本任務學習紫外分管光度法。任務實施1.測定原理茶葉巾的咖啡堿易溶于水，除去干擾物質后，用特定波長測定其含量。2.主要儀器包括：紫外分光光度計；分析

2、天平，感量0.0001g；各種規(guī)格的容量瓶和移液管等。3.試劑配制所用試劑均為分析純（AR），水為蒸餾水。（1）堿式乙酸鉛溶液。稱取50g堿式乙酸鉛，加水l00ml，靜置過夜，傾出上清液過濾備用。（2）0.01mol/L鹽酸溶液。取0.9ml，加水稀釋至1L，搖勻。（3） 4.5mol/L硫酸溶液。取硫酸250ml，加水稀釋至1L，搖勻。（4）咖啡堿標準液。準確稱取l00ml咖啡堿（純度不低于99%）溶于l00ml水中，作為母液。準確吸取母液5ml，加水稀釋至l00ml，作為工作液（0.05mg/ml）。任務實施4.測定方法（1）試液制備。按GB8305-2002茶水浸出物測定中試液制備的方法

3、操作。（2）測定。咖啡堿標準曲線的制作：分別吸取0、1、2、3、 4、5、6ml咖啡堿工作液于一組25ml容量瓶中，各加入1.0ml 0.001mol/L鹽酸溶液，用水稀釋至刻度，混勻，用10mm石英比色杯，在波長274nm處，以試劑空白溶液作參比，測定吸光度。將測得的吸光度與對應的咖啡堿濃度繪制標準曲線。試樣測定：用移液管準確吸取試液l0ml移入l00ml容量瓶中，加入4ml0.01mol/L鹽酸和1ml堿式乙酸鉛溶液，用水稀釋至刻度，混勻，靜置澄清過濾，準確吸取濾液25ml，注入50ml容是瓶中，加入五0.1ml4.5mol/L硫酸溶液，加水稀釋至刻度，混勻，靜置澄清過濾，濾液用10mm比色杯，在波長274nm處，以試劑空白溶液作參比，測定吸光度。任務實施5.結果計算茶葉中咖啡堿的含量以干態(tài)質量百分率表示，按下式計算：咖啡堿=CL/1000 Mm100/1050/25100%式中 C -根據試樣的吸光度從標準曲線上查得咖啡堿的相應含量（mg/ml）； L-試樣液總體積（ml）； M-試樣質量（g）；m-試樣干物質含量百分率（%）。同一試樣的兩次測定值之差，每100g試樣不得超過0.2g。任務評價表10-5任務評價表指導教師指導教師 小組自評小組自評小組互評小組互評教師評價教師評價姓名姓名日期序號序號