信息論基礎(chǔ)成功范本

1、自然科學(xué)基金申請書資助類別：面上項目亞類說明：青年科學(xué)基金項目附注說明：項目名稱：急性白血病干細(xì)胞橫向分化為肝癌干細(xì)胞中 Hiwi 信號的功能及白樺脂酸的調(diào)節(jié)作用申 請 者：吳秋玲：依托：華技大學(xué)通訊地址：省市航空路 13 號：430030：電子郵件：imaxy申報日期：2005 年 2 月 25 日自然科學(xué)基金委員會申請代碼：C03050402受理部門：收件日期：受理編號：基本信息 yoKWT/OQ出生年月女1975 年 11 月申請者信息學(xué)位講師主 要 研 究 領(lǐng) 域血液系統(tǒng)電電子郵件imaxy傳個人網(wǎng)頁 工作 華技大學(xué)/同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院在研項目批準(zhǔn)號依托單位信息名稱代 碼43007

2、402人張婷姣電子郵件kjcjcb電地址合作單位信息單 位名 稱代碼項目名稱資助類別面上項目亞類說明 青年科學(xué)基金項目項目基本信息附注說明C03050402:中西醫(yī)結(jié)合臨床基礎(chǔ)研究申請代碼基地類別預(yù)計研究年限2006 年 1 月 2008 年 12 月研究屬性應(yīng)用基礎(chǔ)研究申請經(jīng)費25.0000 萬元項目研究內(nèi)容和意義簡介（限 400 字）：腫瘤干細(xì)胞是腫瘤復(fù)發(fā)的根源，目前對腫瘤干細(xì)胞的的最大問題是絕大多數(shù)的腫瘤干細(xì)胞缺乏特異性標(biāo)記，無法得到分離純化，從多項研究得出推論腫瘤干細(xì)胞極有可能也具有“橫向分化”能力。急性髓系白血病干細(xì)胞是目前已知腫瘤干細(xì)胞中免疫學(xué)表型相對比較確切的，研究急性髓系白血病

3、干細(xì)胞橫向分化為肝癌肝細(xì)胞的能力必然為深入研究腫瘤干細(xì)胞的生物學(xué)特性開辟新的途徑。Hiwi 是來源于人的摘要Piwi成員，以自調(diào)控的方式干細(xì)胞的和分化，Hiwi極有可能在急性白血病干細(xì)胞的橫向分化過程中起重要作用，研究腫瘤干細(xì)胞中 Hiwi 的功能對于理解干細(xì)胞分化調(diào)控的機(jī)制將有很大的幫助，為白血病的治療提供新的口。白樺脂酸具有顯著的抑制腫瘤增殖、促進(jìn)凋亡作用，以 Hiwi 信號為靶點研究白樺脂酸治療急性白血病和肝癌的作用及其機(jī)制將為腫瘤干細(xì)胞的治療探索新的治療，并為傳統(tǒng)中藥發(fā)掘新的藥理作用。急性白血病干細(xì)胞；肝癌干細(xì)胞；橫向分化；Hiwi；白樺脂酸(用分號，最多 5 個)項目組主要成員(杰出

4、青年科學(xué)基金不填此欄)說明: 1. 高級、中級、初級、博士后、博士生、生數(shù)由申請者負(fù)責(zé)填報，總?cè)藬?shù)自動生成。2. 項目組主要成員不包括項目申請者。編號姓 名出生年月學(xué) 位名稱電子郵件項目分工每年工作時間（月）1姚軍霞1973-10-27女講師博士華技大學(xué)yao_junxia 生物學(xué)技術(shù)72楊玲1970-12-24女講師博士華技大學(xué)yang_lng生物學(xué)技術(shù)73張純1973-4-11女講師華技大學(xué)chun2411免疫學(xué)技術(shù)74劉芳1964-4-1女講師博士華技大學(xué)liufang流式細(xì)胞儀技術(shù)75何靜1975-1-16女講師華技大學(xué)jing937細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)76劉紅利1976-8-22女博士生華技

5、大學(xué)liuh160細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)77陳衛(wèi)華1965-8-26女博士生華技大學(xué)ceweih免疫學(xué)技術(shù)78舒文秀1979-11-20女生學(xué)士華技大學(xué)wxshu-1120細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)79總?cè)藬?shù)高級中級初級博士后博士生生906021經(jīng)費申請表（金額：萬元）科目申請經(jīng)費備注（計算依據(jù)與說明）一.研究經(jīng)費23.00001.科研業(yè)務(wù)費3.5000（1）測試/計算/分析費1.0000流式細(xì)胞儀檢測費；電鏡檢測費；統(tǒng)計分析（2）能源/動力費0.5000水費、電費（3）會議費/差旅費1.0000（4）物/文獻(xiàn)/信息費0.5000資料復(fù)印、查新、費用（5）其它0.5000資料鑒定2.實驗材料費13.5000（1）原材

6、料/試劑/藥品購置費13.5000白樺脂酸；各種抗體；蛋白電泳試劑盒等（2）其它3.儀器設(shè)備費4.0000（1）購置2.0000電泳儀（2）試制2.0000實驗耗財4.改裝費5.協(xié)作費2.0000利用同濟(jì)醫(yī)學(xué)院中心，與國外二.國際合作與交流費0.00001.項目組成員出國合作交流2.來華合作交流三.勞務(wù)費1.0000四.1.0000合計25.0000與本項目相關(guān)的其他經(jīng)費來源其他計劃資助經(jīng)費其他經(jīng)費資助（含部門匹配）其他經(jīng)費來源合計0.0000報告正文（一）立項依據(jù)與研究內(nèi)容（4000-8000 字）：1. 1. 項目的立項依據(jù)（研究意義、國內(nèi)外研究現(xiàn)狀及分析，附主要參考文獻(xiàn)目錄。）（基礎(chǔ)研究

7、需結(jié)合科學(xué)研究發(fā)展趨勢來論述科學(xué)意義；應(yīng)用研究需結(jié)合和發(fā)展中迫切需要解決的關(guān)鍵科技問題來論述其應(yīng)用前景。）的高復(fù)發(fā)率一直是困擾腫瘤醫(yī)生的難題，越來越多的研究證實腫瘤細(xì)胞群體中存在少數(shù)能使群體擴(kuò)增的腫瘤干細(xì)胞。它們通常處于慢周期狀態(tài)，對化療敏感性低，是腫瘤復(fù)發(fā)的根源。對腫瘤干細(xì)胞的研究必然有助于探索新的發(fā)病機(jī)制，并為徹底治愈腫瘤提供可能。目前對腫瘤干細(xì)胞的的最大問題是絕大多數(shù)的腫瘤干細(xì)胞缺乏特異性標(biāo)記，無法得到分離純化，從而限制了對腫瘤干細(xì)胞的研究。隨著對干細(xì)胞研究的日益深入，正常成體干細(xì)胞的“可塑性”理論越來越被人們所接受，是否腫瘤干細(xì)胞也具有類似的“橫向分化”能力？我們是否能通過這種“橫向分

8、化”能力從極少數(shù)幾種能分離純化的腫瘤干細(xì)胞（白血病干細(xì)胞、干細(xì)胞、腦腫瘤干細(xì)胞）通過橫向分化生成其他類型腫瘤干細(xì)胞，從而為廣泛地研究腫瘤干細(xì)胞的生物學(xué)特性提供可能？最近有學(xué)者提出了的“共同”理論。證據(jù)如下：（1）來源于骨髓的肝癌干細(xì)胞肝細(xì)胞癌可能于骨髓來源的前體細(xì)胞。膽堿缺陷飲食小鼠在乙基硫氨酸或 N-2-AAF處理后可誘導(dǎo)肝細(xì)胞癌，此種肝癌模型中肝癌于骨髓來源的管周干細(xì)胞。（2）來源于骨髓的淋巴瘤干細(xì)胞 Robert 研究發(fā)現(xiàn) 2 例已治療的 Burkitt 淋巴瘤或慢性淋巴細(xì)胞白血病患者幾年后發(fā)展成淋巴瘤樣丘疹病，此患者骨髓雖未累及，但具有與淋巴瘤樣丘疹病皮膚損害相同的 TCR重排，而且骨

9、髓的 TCR重排在 3 年前患者的常規(guī)檢查中已檢測到。此外 Berg 等發(fā)現(xiàn) 1 例大細(xì)胞淋巴瘤患者接受T 細(xì)胞去除的骨髓移植，3 年半之后供者和受者均患有皮下脂膜炎樣淋巴瘤，遺傳學(xué)分析發(fā)現(xiàn)淋巴瘤來源于供者。上述病例證實骨髓中存在淋巴瘤干細(xì)胞，在其歸巢至皮膚后發(fā)育并進(jìn)一步分化為淋巴瘤細(xì)胞。（3）來源于骨髓的胃癌Houghton 等研究發(fā)現(xiàn)幽門螺旋桿菌誘導(dǎo)的胃癌小鼠的胃癌細(xì)胞來源于骨髓，而不是上皮細(xì)胞。示蹤實驗顯示供體小鼠骨髓來源的細(xì)胞在胃粘膜占優(yōu)勢，通過化生和發(fā)育異常逐漸形成上皮細(xì)胞癌。此外，最新研究表明腫瘤細(xì)胞也可表達(dá)其他系細(xì)胞的遺傳學(xué)標(biāo)記：（1）通過 DNA 微序列分析方法檢測急性髓系白血

10、病細(xì)胞的表達(dá)發(fā)現(xiàn)急性髓系白血病細(xì)胞表達(dá) 122 種非造血細(xì)胞表達(dá)的，包括神經(jīng)組織、肌肉、肝臟和，而且 IL-6 或 thapsigargin 處理白血病細(xì)胞可使白血病細(xì)胞重新編程，誘導(dǎo)其產(chǎn)生其他非造血細(xì)胞的。（2）檢測一例骨髓移植患者的肝細(xì)胞發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞表達(dá)供者造血干細(xì)胞的遺傳學(xué)標(biāo)記。綜上所述，我們得出推論腫瘤干細(xì)胞極有可能也具有“橫向分化”能力。急性髓系白血病干細(xì)胞是目前已知腫瘤干細(xì)胞中免疫學(xué)表型（CD34+、CD38、CD71、HLA-DR、CD90、CD117、CD123+）比較確切的，而肝癌干細(xì)胞尚無明確的免疫學(xué)標(biāo)記，研究急性髓系白血病干細(xì)胞橫向分化為肝癌肝細(xì)胞的能力在探索新的發(fā)病機(jī)理的

11、同時為深入研究腫瘤干細(xì)胞的生物學(xué)特性開辟新的途徑。Piwi是干細(xì)胞的關(guān)鍵調(diào)控因子, 參與核內(nèi) mRNA 轉(zhuǎn)錄后的修飾過程, 與干細(xì)胞自我更新的調(diào)節(jié)相關(guān)。Hiwi 是來源于人的 Piwi成員，在 12 號染色體的長臂，以自調(diào)控的方式干細(xì)胞的和分化。Hiwi 僅表達(dá)在骨髓 CD34 +細(xì)胞中, 隨著 CD34 + 細(xì)胞的分化,Hiwi 的表達(dá)逐漸減少。在骨髓基質(zhì)或骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中也檢測不到 Hiwi 的表達(dá)。Shama 等觀察到 Hiwi 的表達(dá)與永生化的白血病細(xì)胞KG1 喪失增殖能力有關(guān),過表達(dá)則導(dǎo)致 KG1 的凋亡。Hiwi還可能在維持干細(xì)胞的靜息或下調(diào)干/ 祖細(xì)胞的細(xì)胞周期中發(fā)揮作用。最新

12、研究表明 Piwi 同源物 Cniwi 可能參與干細(xì)胞的橫向分化。腔腸動物的橫紋肌細(xì)胞在體外橫向分化為平滑肌細(xì)胞時，cniwi表達(dá)出現(xiàn)短期上調(diào)。近年來有證據(jù)表明：過量表達(dá) wnt-1（類似的干細(xì)胞分化基因）的 P19 胚胎癌細(xì)胞不需要維甲酸的誘導(dǎo)，就可自發(fā)地向神經(jīng)細(xì)胞分化。以上資料證明，Hiwi極有可能在急性白血病干細(xì)胞的橫向分化過程中起重要作用。研究腫瘤干細(xì)胞中 Hiwi 的功能對于理解干細(xì)胞分化調(diào)控的機(jī)制及干細(xì)胞的“重編程”現(xiàn)象將有很大的幫助，并為的治療提供新的靶點。傳療腫瘤的化療均存在耐藥問題，尤其是腫瘤干細(xì)胞更不敏感?？拱┲兴幉┐缶睿咝У投?，從中極有可能篩選出高效腫瘤干細(xì)胞治療的。

13、白樺脂酸（Betulinic acid）是從樺樹皮中提取的三萜類物質(zhì)，具有顯著的抗腫瘤效應(yīng)，可誘導(dǎo)黑色素瘤、胃癌、肝癌的凋亡，抑制 Lewis 肺癌、肉瘤、艾氏腹水癌的增殖。我們的預(yù)實驗也顯示白樺脂酸可顯著抑制急性髓系白血病細(xì)胞系 K562 的增殖（IC50 值為50mol/l）。白樺脂酸還可抑制結(jié)腸癌、肺癌等癌細(xì)胞中 NF-B 的激活,而最新研究表明 NF-B 可能參與細(xì)胞的橫向分化，NF-B 激活參與急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞 U937分化為破骨細(xì)胞，在神經(jīng)干細(xì)胞分化為星型膠質(zhì)細(xì)胞過程中 NF-B 也被激活。因此白樺脂酸有可能通過調(diào)節(jié) Hiwi 的表達(dá)來抑制腫瘤干細(xì)胞的增殖并影響腫瘤干細(xì)胞的橫

14、向分化，研究白樺脂酸對腫瘤干細(xì)胞的增殖分化的調(diào)節(jié)作用必然有助于探索新的治療。目前對腫瘤干細(xì)胞的研究尚處于初級階段，而且由于大多數(shù)腫瘤干細(xì)胞無法分離純化限制了對它的進(jìn)一步的研究，本課題利用腫瘤干細(xì)胞具有橫向分化能力的推論試圖通過急性白血病干細(xì)胞橫向分化來獲取目前尚無確切免疫學(xué)表型的肝癌干細(xì)胞，為腫瘤干細(xì)胞的深入研究提供新的途徑；研究 Hiwi 信號在急性白血病干細(xì)胞分化和橫向分化中的作用，必將探索急性白血病新的發(fā)病機(jī)制并為白血病的治療提供新的口。以 Hiwi信號為靶點研究白樺脂酸治療急性白血病和肝癌的作用及其機(jī)制將為急性白血病和肝癌的治療發(fā)掘新的，并為傳統(tǒng)中藥開拓新的藥理作用機(jī)制。參考文獻(xiàn)：1

15、Robert G. Neoplastic stem cells in cutaneous lymphomas. Arch Dermatol. 2004140:1156-1160.2Houghton J, Stoicov C, Nomura S. Gastric cancer oringinating from bone marrow derivedcells. Science 2004 306(5701):1568-713Katja S, Nathalie Y, Volker S. The germ line and somatic stem cell gene Cniwi in thejel

16、lyfish Podocoryne carneaInt. J. Dev. Biol. 2004 48: 1-74P Nuciforo and F Fraggetta. Cancer stem cell theory: pathologists considerations andruminations about wasting time and wrong evaluations J Clin pathol 2004 57:782-7845Stewart S. Cellular origin of hepatocellular carcinomas. Cell & developme

17、ntal biology2002 13:419-4246Sharma AK, Nelson MC , Brandt J E ,. Human CD34( + ) stem cells express the hiwigene , a human homologue of the Drosophila gene Piwi. Blood , 2001 , 97: 426434.7Gniadecki R, Lukowsky A, Rossen K,lymphoma. Blood2003 102:3797-3799. Bone marrow precursor of extranodal T-cell

18、8Lee SM, Nguyen TH, Park MH,. EPO receptor-mediated ERK kinase and NF-kappaBdifferentiation of astrocytes. Biochem Biophys Resactivation in-promotedCommun 2004 320(4):1087-95.9Amoui M, Suhr SM, Baylink DJ,play a role in differentiation and. An osteoclastic protein-tyrosine phosphatase mayactivity of

19、 human monocytic U-937 cell-derived,osteoclast-like cells. Am J Physiol Cell Physiol 2004 287(4):C874-84.10 Yasunari T and Bharat B Betulinic acid suppresses carcinogen-induced NF- Bactivation throrgh inhibition of I B kinase and P65 phosphorylation. JImmunol 2003 171:3278-32862、項目的研究內(nèi)容、研究目標(biāo),以及擬解決的關(guān)

20、鍵問題。（此部分為重點闡述內(nèi)容）研究內(nèi)容： 驗證急性白血病干細(xì)胞橫向分化為肝癌干細(xì)胞的能力明確 Hiwi 在急性白血病干細(xì)胞的分化及橫向分化中的作用明確白樺脂酸對急性白血病干細(xì)胞、肝癌干細(xì)胞、急性白血病、肝癌細(xì)胞增殖、凋亡的影響明確白樺脂酸對急性白血病干細(xì)胞橫向分化為肝癌干細(xì)胞的能力的影響研究目標(biāo)： 確定急性白血病干細(xì)胞具有橫向分化為肝癌干細(xì)胞的能力，探索獲得肝癌干細(xì)胞的新的途徑，為深入研究肝癌干細(xì)胞的生物學(xué)特性提供可能。 研究 Hiwi 是否參與急性白血病干細(xì)胞的分化及橫向分化，干擾 Hiwi 的表達(dá)對急性白血病干細(xì)胞橫向分化能力的影響。 明確白樺脂酸對急性白血病干細(xì)胞、肝癌干細(xì)胞的增殖分化

21、的影響，尋求針對腫瘤干細(xì)胞的理想 探討白樺脂酸是否具有干擾急性白血病干細(xì)胞橫向分化的能力 探討白樺脂酸是否能影響 Hiwi 的表達(dá)，開拓傳統(tǒng)中藥新的藥理機(jī)制擬解決的關(guān)鍵問題: 急性白血病干細(xì)胞的最佳培養(yǎng)條件、誘導(dǎo)急性白血病干細(xì)胞橫向分化為肝癌干細(xì)胞的最優(yōu)條件 Hiwi 是影響急性白血病干細(xì)胞的分化及橫向分化的重要信號的表達(dá)。， Hiwi 白樺脂酸能否抑制急性白血病干細(xì)胞橫向分化為肝癌干細(xì)胞3、擬采取的研究方案及可行性分析。（包括有關(guān)方法、技術(shù)路線、實驗、等說明）擬采取的研究方案：用淋巴細(xì)胞分離液提取急性髓系白血病患者的骨髓有核細(xì)胞，免疫磁珠分選分離高純度白血病干細(xì)胞（CD34+、CD38、CD

22、71、HLA-DR、CD90、CD117、CD123+）白血病干細(xì)胞+高濃度肝細(xì)胞生長因子（HGF）+堿性成因子（FGF）培養(yǎng)誘導(dǎo)白血病干細(xì)胞橫向分化為肝癌干細(xì)胞鑒定肝癌干細(xì)胞：1分別用 RT-PCR 方法和流式細(xì)胞術(shù)檢測AFP、白蛋白 ALB、甲狀腺素蛋白（TTR）、CK8/18 等 mRNA 和蛋白水平的表達(dá)2顯微鏡下觀察有無肝癌細(xì)胞形態(tài)3長期傳代培養(yǎng)分化的肝癌干細(xì)胞是否具有持續(xù)白蛋白的能力4自我更新能力的鑒定：長期傳代培養(yǎng)肝癌干細(xì)胞經(jīng)門靜脈移植到鼠，觀察肝癌發(fā)生幾率，檢測肝癌組織中癌細(xì)胞的形態(tài) RT-PCR 方法和流式細(xì)胞術(shù)比較白血病干細(xì)胞、白血病細(xì)胞、肝癌干細(xì)胞、肝癌細(xì)胞中 Hiwi

23、的 mRNA 和蛋白表達(dá)水平 比較白血病干細(xì)胞+高濃度 HGF+ FGFHiwi 抗體培養(yǎng)與不加 Hiwi 抗體培養(yǎng)誘導(dǎo)白血病干細(xì)胞橫向分化為肝癌干細(xì)胞的能力的變化 利用質(zhì)粒轉(zhuǎn)染技術(shù)將 Hiwi導(dǎo)入，+高濃度 HGF+FGF 或不加 HGF、FGF 培養(yǎng)誘導(dǎo)橫向分化為肝癌干細(xì)胞，比較 Hiwi/和 Hiwi-/-白血病干細(xì)胞橫向分化能力的不同。 MTT 法檢測白樺脂酸對白血病干細(xì)胞、肝癌干細(xì)胞、白血病細(xì)胞、肝癌細(xì)胞增殖的影響；Tunel 法檢測白樺脂酸對白血病干細(xì)胞、肝癌干細(xì)胞、白血病細(xì)胞、肝癌細(xì)胞凋亡的影響 RT-PCR 和流式細(xì)胞術(shù)檢測白樺脂酸對白血病干細(xì)胞、肝癌干細(xì)胞、白血病細(xì)胞、肝癌細(xì)

24、胞 Hiwi mRNA 及蛋白水平的影響 白血病干細(xì)胞+高濃度 HGF+ FGF白樺脂酸培養(yǎng)誘導(dǎo)白血病干細(xì)胞橫向分化為肝癌干細(xì)胞，與不加白樺脂酸培養(yǎng)體系比較橫向分化能力的差異?？尚行苑治觯?我們的預(yù)實驗也顯示白樺脂酸可顯著抑制急性髓系白血病細(xì)胞系K562 的增殖（IC50 值為 50mol/l）。本實驗所需材料、各種抗體及試劑均可夠得。本擁有所需的實驗設(shè)備及長期從事相關(guān)實驗研究的經(jīng)驗。本課題組主要成員具有豐富的生物學(xué)理論和實驗經(jīng)驗。4、本項目的特色與創(chuàng)新之處。首次驗證了急性白血病干細(xì)胞的橫向分化能力首次研究了 Hiwi 在急性白血病干細(xì)胞橫向分化和分化中的作用首次研究了中藥白樺脂酸治療急性白血

25、病和肝癌的作用及其機(jī)制，開拓傳統(tǒng)中藥新的作用機(jī)制，為傳統(tǒng)中藥新的臨床應(yīng)用提供新思路總之，以腫瘤干細(xì)胞為切入點研究新的發(fā)病機(jī)理，首次驗證了急性白血病干細(xì)胞的橫向分化能力，內(nèi)容新，層次深，研究 Hiwi 在急性白血病干細(xì)胞橫向分化和分化中的作用為的治療提供新的靶點，從全新的角度闡明傳統(tǒng)中藥白樺脂酸新的藥理作用，具有重要的科學(xué)理論價值及廣闊的臨床應(yīng)用前景。本課題的研究設(shè)想在國內(nèi)外未見。5、年度研究計劃及預(yù)期研究結(jié)果。（包括擬組織的重要學(xué)術(shù)交流活動、國際合作與交流計劃等）（1）年度研究計劃2006.1-2006.12免疫磁珠分選分離高純度骨髓白血病干細(xì)胞，誘導(dǎo)白血病干細(xì)胞橫向分化為肝癌干細(xì)胞2007.

26、12007.6肝癌干細(xì)胞的鑒定2007.72007.12研究 Hiwi 在白血病干細(xì)胞、肝癌干細(xì)胞的表達(dá)及其在白血病干細(xì)胞橫向分化為肝癌干細(xì)胞中的作用2008.12008.10研究白樺脂酸對急性白血病干細(xì)胞增殖、凋亡、橫向分化的影響2008.11-2008.12總結(jié)匯報（2）預(yù)期研究結(jié)果急性白血病干細(xì)胞可橫向分化為肝癌干細(xì)胞Hiwi 信號參與急性白血病干細(xì)胞的分化和橫向分化白樺脂酸可抑制急性白血病干細(xì)胞、肝癌干細(xì)胞、急性白血病細(xì)胞、肝癌細(xì)胞 Hiwi信號的表達(dá) 白樺脂酸可抑制急性白血病干細(xì)胞的增殖、促進(jìn)其凋亡、抑制其橫向分化（二）研究基礎(chǔ)與工作條件1、工作基礎(chǔ)（與本項目相關(guān)的研究工作積累和已取

27、得的研究工作成績）本課題組對的生物學(xué)有較深厚的理論及實驗基礎(chǔ)，課題組成員均熟練掌握生物學(xué)實驗技術(shù)，已的發(fā)病機(jī)理、診斷、臨床研究等方面的文章 20 余篇。參與973 重點課題子項目人胚胎生殖脊干細(xì)胞的分化與組織干細(xì)胞的可塑性研究中維持胚胎干細(xì)胞不分化機(jī)理課題和自然基金杰出青年基金課題白血病干細(xì)胞鑒別、基本特征和臨床意義（項目批準(zhǔn)號 No.30225038）、調(diào)節(jié)急性白血病核孔蛋白新型抗腫瘤中藥的篩選（項目批準(zhǔn)號 30472267）的研究工作，我們的預(yù)實驗也顯示白樺脂酸可顯著抑制急性髓系白血病細(xì)胞系 K562 的增殖。2、工作條件（包括已具備的實驗條件，尚缺少的實驗條件和擬解決的途徑，包括利用和部

28、門開放的計劃與落實情況。）已具備的實驗條件：1 流式細(xì)胞儀3 定量 PCR 擴(kuò)增儀2 DNA儀4 定量原位 PCR 檢測儀6 超速低溫離心機(jī)及其他各種細(xì)胞離心機(jī)5 DNA儀7 各種電泳儀9 倒置顯微鏡11 紫外光檢測儀擁有細(xì)胞培養(yǎng)8培養(yǎng)箱10 熒光顯微鏡12 超凈工作臺和生物學(xué)，并可租用同濟(jì)醫(yī)學(xué)院免疫重點實驗室，生物學(xué)開放。尚缺有關(guān)單克隆抗體、各種檢測試劑盒、PCR 引物，可通過國內(nèi)外有關(guān)生物公司和國外有關(guān)科研合作贈送。3、申請人簡歷（包括申請者和項目組主要成員的學(xué)歷和研究工作簡歷，近期已與本項目有關(guān)的主要論著目錄和獲得學(xué)術(shù)情況及在本項目中承擔(dān)的任務(wù)。論著目錄要求詳細(xì)列出所有作者、論著題目、期

29、刊名或名、年、卷（期）、起止頁碼等；情況也須詳細(xì)列出全部受獎、名稱等級、授獎年等。）吳秋玲，女 ，28 歲，血液科主治醫(yī)師，1999 年 6 月畢業(yè)于華技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院獲臨床醫(yī)學(xué)學(xué)位，在職醫(yī)學(xué)博士，具有較豐富的臨床和實驗經(jīng)驗，熟練掌握細(xì)胞培養(yǎng)、生物學(xué)、工程等實驗技術(shù)。1995 年曾參與的流行病學(xué)研究課題，是自然科學(xué)基金課題調(diào)節(jié)急性白血病核孔蛋白新型抗腫瘤中藥的篩選（項目批準(zhǔn)號 30472267）的主要成員，目前正在承擔(dān)該課題主要研究內(nèi)容，2004 年獲華技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院院內(nèi)課題資助，課題名稱H2AX 在惡性血液病耐藥中的地位。本課題。文章：1、吳秋玲，等電切斷坐骨神經(jīng)大鼠足三里穴肥大細(xì)胞的影響

30、針刺研究1996 年 36（5）：47-492、吳秋玲，等結(jié)核性和惡性胸腔積液中白細(xì)胞介素 4 和干擾素的變化中華結(jié)核和呼吸雜志2000 23（1）：1203、吳秋玲，等rhTPO 治療難治性特發(fā)性血小板減少性紫癜的臨床研究華技大學(xué)學(xué)報2004 33（3）：2974、何靜，吳秋玲 rhTPO 治療急性白血病化療后血小板減少的臨床研究臨床血液學(xué)雜志200417（4）：1585、吳秋玲，等姜黃素對 Raji 細(xì)胞41 整合素表達(dá)及遷移的影響臨床血液學(xué)雜志 已接受姚軍霞，女，30 歲，主治醫(yī)師， 2002 年獲華技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院內(nèi)科血液病學(xué)博士。博士為人巨細(xì)胞體外人巨核細(xì)胞及其反義寡核苷

31、酸抗作用的研究。2002 年始在協(xié)和醫(yī)院干細(xì)胞研究中心工作，主要從事干細(xì)胞的研究。掌握細(xì)胞培養(yǎng)、造血干細(xì)胞分析、分選等實驗技術(shù)。熟悉激光共聚焦顯微鏡、遺傳工作站、動物模型等平臺的基本研究方法和應(yīng)用。正在參與973 重點課題子項目人胚胎生殖脊干細(xì)胞的分化與組織干細(xì)胞的可塑性研究中維持胚胎干細(xì)胞不分化機(jī)理課題和自然基金杰出青年基金課題白血病干細(xì)胞鑒別、基本特征和臨床意義（項目批準(zhǔn)號 No.30225038）的研究工作。在本課題研究中負(fù)責(zé)急性白血病干細(xì)胞的分選及培養(yǎng)。近期文章：1） Junxia Yao,. Respiratory syncytialbronchiolitis ininfants i

32、s associated with predominantTh2-like response.Peadatric Research.1999,49（5）：758（SCI 收錄雜志）2） 姚軍霞，吳健民.呼吸道合胞毛細(xì)支炎患兒 IFN-/IL-4 水平變化及意義.上海免疫學(xué)雜志.2001，21：49-523） 姚軍霞，宋善俊等.人巨細(xì)胞對人巨核系祖細(xì)胞體外生長的影響.臨床血液學(xué)雜志.2002，15：69-724） 姚軍霞，宋善俊等.人巨細(xì)胞巨核系祖細(xì)胞及反義寡核苷酸抗作用的研究.中華血液學(xué)雜志.2004，25：720-7235）Yao Junxia, Song Shanjun, Hu Lihua

33、. The effect of human cytomegaloon the formation ofCFU-MK in vitro. Journal of Huazhong Science and Technology University（Medical Science），2004，24：134-137楊玲主治醫(yī)師，醫(yī)學(xué)博士，博士后在站。1994 年畢業(yè)于瀘州醫(yī)學(xué)院， 1997 年畢業(yè)并獲學(xué)位,畢業(yè)后于中醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院肝病，從事中防治慢性肝病的科研與臨床工作，1998 年在北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)習(xí)生物學(xué)技術(shù)。2002 年博士畢業(yè)并獲博士學(xué)位，博士畢業(yè)后在華技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院協(xié)和醫(yī)院消化內(nèi)科從事博士后

34、研究。1997 年開始先后參加了中管理局資助的“中醫(yī)不同治則對 HBV前 C 區(qū)變異的影響”(95B059)、自然科學(xué)基金資助“丙型肝炎鼠模型的建立及對中藥篩選的價值”（39670910）、省教育廳資助“抗纖軟肝沖劑抗大鼠肝化的作用及機(jī)理研究”、省自然科學(xué)基金資助“抗纖軟肝沖劑影響肝星狀細(xì)胞增殖的信號機(jī)制”（2000J042）、省衛(wèi)生廳資助的“莪術(shù)對血吸蟲病大鼠肝星狀細(xì)胞收縮及門脈高壓的調(diào)節(jié)作用”等課題的研究工作。目前承擔(dān)在研科研課題有：1. 莪術(shù)提取物調(diào)控 Rho 信號途徑對肝星狀細(xì)胞活化的影響（2004035198），項目負(fù)責(zé)人，中國博士后科學(xué)基金資助。2.肝病血瘀證的資助。辨證機(jī)理研究（

35、04-05JP42），項目第二，中管理局3.非性脂肪肝與瘦素調(diào)節(jié)及中藥干預(yù)的實驗研究，項目科研獲獎：，院內(nèi)課題。1. 中醫(yī)證型及多法聯(lián)用與慢性乙型肝炎 HBV 前 C 區(qū)突變的相關(guān)性研究（成果編號 EK020622），2004 年獲省科技進(jìn)步三等獎，排名第二。2. 抗纖軟肝顆粒影響肝星狀細(xì)胞增殖的跨膜信號機(jī)制，2003 年獲獎，排名第二。省科技進(jìn)步三等3. 抗纖軟肝沖劑抗大鼠肝化的作用及機(jī)理研究，2001 年獲省科技進(jìn)步三等獎（成果編號 EK010224），排名第三。論著：1楊玲，程紅求，張赤志. 抗纖軟肝顆粒對 PDGF 誘導(dǎo)的 HSC 細(xì)胞周期及胞內(nèi) Ca2+濃度的影響.中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志

36、2002.10(1):23楊玲，朱清靜，張赤志. 抗纖軟肝沖劑對肝星狀細(xì)胞表達(dá) TGF-1mRNA2及型膠原 mRNA 的影響.中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志2001.8:143Yang L, Zhang CZ, Zhu QJ. Kangxian ruangan keli inhibits hepatic stellate cell proliferation mediated by PDGF. World J Gastroenterol 2003；9(9):1530-1553楊玲，朱清靜，張赤志，明安萍.抗纖軟肝顆粒對肝星狀細(xì)胞增殖與凋亡的影響.中醫(yī)雜志，2004；45（1）：55-58楊玲，朱清靜，

37、笪邦紅，張赤志.中藥抗纖軟肝顆粒抑制 PDGF 誘導(dǎo)的肝星45狀細(xì)胞 MEK-1、c-fos 表達(dá).世界消化雜志，2004，12（2）：347-3506楊玲，杜修明，聶廣.中藥防治實驗性肝10（1）：46化研究概況.中醫(yī)研究，1997，7程紅球，張赤志，楊玲，朱清靜.PDGF 受體酪氨酸激酶介導(dǎo)的細(xì)胞信號傳導(dǎo)在 HSC 增殖中的作用. 中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志，2002，12（1）：63-648朱清靜，楊玲，盛國光，等. 慢性乙型肝炎前 C 區(qū)突變與 TNF-的關(guān)系.世界消化雜志1999.7(6):5409Zhu Qingjing, Yang Ling, Sheng Guoguang. Relati

38、onship of precore mutation in patients with chronic hepatitis B to the syndromes type of TCM. Journal of Gastroenterology and Hepatology,1999(suppl):327唐智敏，楊玲，金文銀，等.原代培養(yǎng)大鼠肝細(xì)胞分離方法比較研究.中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志，1999，9（4）：191011楊玲，盛國光，李翰旻，等. 慢性乙型肝炎 HBV 前 C 區(qū)實證的關(guān)系.中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志1998.8(3):23突變與中醫(yī)虛12朱清靜，楊玲，盛國光. 慢性乙型肝炎系.中國中西醫(yī)結(jié)

39、合脾胃雜志1999.7(2):87前 C 區(qū)突變與中醫(yī)證型的關(guān)13朱清靜，楊玲，盛國光，等. 52 例慢性乙型肝炎 HBV 前 C 區(qū)究.臨床肝膽病雜志2000.16(1):28突變研14 楊玲，朱清靜，盛國光，李漢旻.慢性乙型肝炎前 C 區(qū)突變與 sIL-2R 的關(guān)系.中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志2001.11(3):104、承擔(dān)科研項目情況（申請者和項目組主要成員正在承擔(dān)的科研項目情況，包括自然科學(xué)基金的項目，要注明項目的名稱和編號、經(jīng)費來源、起止年月、負(fù)責(zé)的內(nèi)容等。）（1）吳秋玲 目前承擔(dān)在研科研課題有：自然科學(xué)基金課題調(diào)節(jié)急性白血病核孔蛋白新型抗腫瘤中藥的篩選（項目批準(zhǔn)號 30472267，2005 年-2007 年），課題組主