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文檔簡介
1、RNA的生物合成過程一、選擇題 (一) A 型題 1 下列關(guān)于轉(zhuǎn)錄的敘述正確的是 A 轉(zhuǎn)錄過程需 RNA 引物 B 轉(zhuǎn)錄生成的 RNA 都是翻譯模板 C 真核生物轉(zhuǎn)錄是在胞漿中進(jìn)行的 D DNA 雙鏈一股單鏈?zhǔn)寝D(zhuǎn)錄模板 E DNA 雙鏈同時(shí)作為轉(zhuǎn)錄模板 2 DNA 上某段編碼鏈堿基順序?yàn)?5 ' -ACTAGTCAG-3 ' , 轉(zhuǎn)錄后 mRNA 上相應(yīng)的堿基順序?yàn)?A 5 ' -TGATCAGTC-3 ' B 5 ' -UGAUCAGUC-3 ' C 5 ' -CUGACUAGU-3 ' D 5 ' -CTGACTAGT
2、-3 ' E 5 ' -CAGCUGACU-3 ' 3 不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄是 A 雙向復(fù)制后的轉(zhuǎn)錄 B 以 DNA 為模板雙向進(jìn)行轉(zhuǎn)錄 C 同一單鏈 DNA ,轉(zhuǎn)錄時(shí)可以交替作為編碼鏈和模板鏈 D 同一單鏈 DNA ,轉(zhuǎn)錄時(shí)只轉(zhuǎn)錄外顯子部分 E 沒有規(guī)律的轉(zhuǎn)錄 4 真核生物的轉(zhuǎn)錄特點(diǎn)是 A 發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)內(nèi),因?yàn)檗D(zhuǎn)錄產(chǎn)物主要供蛋白質(zhì)合成用 B 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物有 poly ( A ) 尾, DNA 模板上有相應(yīng)的 poly ( dT )序列 C 轉(zhuǎn)錄的終止過程需( Rho )因子參與 D 轉(zhuǎn)錄起始需要形成 PIC (轉(zhuǎn)錄起始前復(fù)合物) E 需要因子辨認(rèn)起點(diǎn) 5 下列關(guān)于轉(zhuǎn)錄編碼鏈的敘述正
3、確的是 A 能轉(zhuǎn)錄生成 mRNA 的 DNA 單鏈 B 能轉(zhuǎn)錄生成 tRNA 的 DNA 單鏈 C 同一 DNA 單鏈不同片段可作模板鏈或編碼鏈 D 是基因調(diào)節(jié)的成份 E 是 RNA 鏈 6 Pribnow box 序列是 A AAUAAA B TAAGGC C TTGACA D TATAAT E AATAAA 7 真核生物的 TATA 盒是 A 參與轉(zhuǎn)錄起始 B 翻譯的起始點(diǎn) C RNA 聚合酶核心酶結(jié)合位點(diǎn) D 因子結(jié)合位點(diǎn) E 復(fù)制的起始點(diǎn) 8 原核生物 DNA 指導(dǎo)的 RNA 聚合酶由數(shù)個(gè)亞基組成,其核心酶的組成是 A 2 ' ( ) B 2 ( ) C 2 ' ( )
4、 D 2 ' ( ) E ' 9 原核生物識(shí)別轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的是 A 因子 B 核心酶 C RNA 聚合酶的亞基 D 亞基 E RNA 聚合酶的 亞基 10 因子的功能是 A 參與轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)過程 B 參與轉(zhuǎn)錄的全過程 C 加速 RNA 的合成 D 參與轉(zhuǎn)錄的終止過程 E 可改變 RNA 聚合酶的活性 11 在轉(zhuǎn)錄延長階段, RNA 聚合酶與 DNA 模板的結(jié)合是 A 全酶與模板結(jié)合 B 核心酶與模板特定位點(diǎn)結(jié)合 C 結(jié)合松弛而有利于 RNA 聚合酶向前移動(dòng) D 和轉(zhuǎn)錄起始時(shí)的結(jié)合狀態(tài)沒有區(qū)別 E 結(jié)合狀態(tài)相對(duì)牢固穩(wěn)定 12 下列關(guān)于轉(zhuǎn)錄因子( TF )的敘述正確的是 A 是真核生物
5、 RNA 聚合酶的組分 B 參與真核生物轉(zhuǎn)錄的起始、延長和終止階段 C 是轉(zhuǎn)錄調(diào)控中的反式作用因子 D 是真核生物的啟動(dòng)子 E 是原核生物 RNA 聚合酶的組分 13 真核生物轉(zhuǎn)錄終止 A 需要( Rho )因子 B 需要釋放因子( RF ) C 與加尾修飾同步進(jìn)行 D 需要信號(hào)肽 E 形成莖環(huán)形式的二級(jí)結(jié)構(gòu) 14 外顯子是 A DNA 的調(diào)節(jié)序列 B 轉(zhuǎn)錄模板鏈 C 真核生物的編碼序列 D 真核生物的非編碼序列 E 原核生物的編碼序列 15 DNA 復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程具有許多異同點(diǎn),下列關(guān)于 DNA 復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的描述中錯(cuò)誤的是 A 在體內(nèi)只有一條 DNA 鏈轉(zhuǎn)錄,而兩條 DNA 鏈都復(fù)制 B 在
6、這兩個(gè)過程中合成方向都為 5 ' 3 ' C 兩個(gè)過程均需 RNA 引物 D 兩個(gè)過程均需聚合酶參與 E 通常情況下復(fù)制的產(chǎn)物其分子量大于轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物 16 以下哪些代謝過程需要以 RNA 為引物 A DNA 復(fù)制 B 轉(zhuǎn)錄 C RNA 復(fù)制 D 翻譯 E 逆轉(zhuǎn)錄 17 下列有關(guān)真核細(xì)胞 mRNA 的敘述,錯(cuò)誤的是 A 是由 hnRNA 經(jīng)加工后生成的 B 5 ' 末端有 m 7 GpppN 帽子 C 3 ' 末端有 poly ( A )尾 D 為多順反子 E 成熟過程中需進(jìn)行甲基化修飾 (二) B 型題 A pppG B PIC C TF D TATAAT E
7、AATAAA 1 順式作用元件 2 反式作用因子 3 真核生物的轉(zhuǎn)錄起始前復(fù)合物 A 5 ' 3 ' B 3 ' 5 ' C C 端 N 端 D N 端 C 端 E 一個(gè)點(diǎn)向兩個(gè)方向同時(shí)進(jìn)行 4 雙向復(fù)制 5 肽鏈的生物合成方向 6 轉(zhuǎn)錄的方向 A DNA 指導(dǎo)的 RNA 聚合酶 B RNA 指導(dǎo)的 DNA 聚合酶 C DNA 連接酶 D 引物酶 E 拓?fù)涿?7 在復(fù)制中催化小片段 RNA 合成的酶 8 RNA 合成時(shí)所需的酶 9 DNA 合成時(shí)所需的酶 A DNA 聚合酶 B RNA 聚合酶 C 逆轉(zhuǎn)錄酶 D 核酶 E Taq 酶 10 化學(xué)本質(zhì)為核酸的酶 1
8、1 遺傳信息由 RNA DNA 傳遞的酶 12 耐熱的 DNA 聚合酶 (三) X 型題 1 下列關(guān)于 RNA 生物合成的敘述,正確的是 A RNA 聚合酶的核心酶能識(shí)別轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn) B 轉(zhuǎn)錄復(fù)合物是由 RNA 聚合酶和 DNA 組成的復(fù)合物 C 轉(zhuǎn)錄在胞質(zhì)進(jìn)行從而保證了翻譯的進(jìn)行 D DNA 雙鏈中僅一股單鏈?zhǔn)寝D(zhuǎn)錄模板 E 合成 RNA 引物 2 真核生物 mRNA 轉(zhuǎn)錄后加工方式有 A 在 3 ' 端加 poly ( A )尾 B 切除內(nèi)含子,拼接外顯子 C 合成 5 ' 端的帽子結(jié)構(gòu) D 加接 CCA 的 3 ' 末端 E 去掉啟動(dòng)子 3 下列哪項(xiàng)因素可造成轉(zhuǎn)錄終止
9、 A 因子參與 B 因子參與 C 在 DNA 模板終止部位有特殊的堿基序列 D RNA 鏈 3 ' 端出現(xiàn)莖環(huán)結(jié)構(gòu) E RNA 鏈 3 ' 端出現(xiàn)寡聚 U 與模板結(jié)合能力小 4 真核生物的 tRNA A 在 RNA-pol 催化下生成 B 轉(zhuǎn)錄后 5 ' 端加 CCA 尾 C 轉(zhuǎn)錄后修飾形成多個(gè)稀有堿基( I 、 DHU 、) D 5 ' 端加 m 7 GpppN 帽子 E 二級(jí)結(jié)構(gòu)呈三葉草型 5 真核生物 rRNA A 單獨(dú)存在無生理功能,需與蛋白質(zhì)結(jié)合為核蛋白體發(fā)揮作用 B 在 RNA-pol 作用下合成 rRNA 前體 C 45S-rRNA 剪切為 5.8
10、S 、 18S 、 28S 三種 rRNA D 45S-rRNA 與蛋白質(zhì)結(jié)合為核蛋白體 E 轉(zhuǎn)錄后加工在細(xì)胞核內(nèi)進(jìn)行 二、是非題 1 復(fù)制和轉(zhuǎn)錄起始均需 RNA 引物。 2 核酶是一些 RNA 前體分子具有催化活性,可以準(zhǔn)確地自我剪接。 3 原核生物 mRNA 一般不需要轉(zhuǎn)錄后加工。 4 由于 RNA 聚合酶缺乏校讀功能,因此 RNA 生物合成的忠實(shí)性低于 DNA 的生物合成。 5 原核生物啟動(dòng)子中 RNA 聚合酶牢固結(jié)合并打開 DNA 雙鏈的部分稱為 Pribnow box ,真核生物啟動(dòng)子中相應(yīng)的序列稱為 Hogness box ,因?yàn)楦缓?A-T ,又稱 TATA box 。 6 原核
11、生物和真核生物的 RNA 聚合酶都能直接識(shí)別啟動(dòng)子。 7 在原核生物轉(zhuǎn)錄過程中,當(dāng)?shù)谝粋€(gè)磷酸二酯鍵形成后, 因子即與核心酶解離。 8 大腸桿菌所有的基因轉(zhuǎn)錄都由同一種 RNA 聚合酶催化。 9 真核生物四種 rRNA 基因的轉(zhuǎn)錄都由 RNA 聚合酶催化。 10 外顯子是在斷裂基因及其初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物上可表達(dá)的片段。 11 帽子結(jié)構(gòu)是真核生物 mRNA 的特點(diǎn)。 12 tRNA 的 3 ' 端所具有的 CCA 序列是轉(zhuǎn)錄后加工才加上的。 13 DNA 分子中的兩條鏈在體內(nèi)都可能被轉(zhuǎn)錄生成 RNA 。 14 真核生物 mRNA 的編碼區(qū)不含修飾堿基。 15 基因的內(nèi)含子沒有任何功能。 16 大
12、腸桿菌染色體 DNA 由兩條鏈組成,其中一條鏈充當(dāng)模板鏈,另外一條鏈充當(dāng)編碼鏈。 17 利福平是通過阻止 RNA 聚合酶與啟動(dòng)子部位的結(jié)合來阻斷 mRNA 合成的起始。 三、填空題 1 在 RNA 的生物合成中,其反應(yīng)體系以 -_ 為模板,原料為 _ 、 RNA 聚合酶、 Mg 2+ 和 Mn 2+ ,合成方向?yàn)?_ ,連接方式為 _ 。 2 DNA 的兩股鏈中只有一股可轉(zhuǎn)錄。作為模板轉(zhuǎn)錄生成 RNA 的一股稱為 _ ,相對(duì)的一股稱為 _ 。 3 基因組 DNA 全長中能轉(zhuǎn)錄出 RNA 的 DNA 區(qū)段稱為 _ 。該基因在真核生物中由若干 _ 和 _ 相互間隔但又連續(xù)鑲嵌而成。 4 RNA 聚
13、合酶位于 _ ,催化合成 _ ; RNA 聚合酶位于 _ ,轉(zhuǎn)錄生成 _ ; RNA 聚合酶位于 _ ,催化轉(zhuǎn)錄編碼 _ 、 5S-rRNA 和 _ 的基因。 5 DNA 復(fù)制時(shí), RNA 引物的合成需 _ 酶催化;轉(zhuǎn)錄時(shí) RNA 的合成需 _ 酶催化;病毒 RNA 復(fù)制時(shí)需 _ 酶催化,以上三種酶均屬于 RNA 聚合酶。 6 原核生物識(shí)別轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的是 _ 因子,識(shí)別轉(zhuǎn)錄終止部位的是 _ 因子。 7 真核生物 hnRNA 轉(zhuǎn)錄后的加工包括 _ 、 _ 、 _ 、 _ 和 _ ,才能成為成熟的 mRNA 。 8 轉(zhuǎn)錄過程分為 _ 、 _ 和 _ 三個(gè)階段。 9 原核生物轉(zhuǎn)錄起始 -35 區(qū)的序
14、列是 _ , -10 區(qū)的序列是 _ 。 10 原核生物轉(zhuǎn)錄起始過程需 _ 酶催化,由 _ 亞基辨認(rèn)起始點(diǎn),延長過程的核苷酸聚合需 _ 酶催化。 11 電鏡下看原核生物轉(zhuǎn)錄的羽毛狀圖形,伸展的小羽毛是 _ ,在 RNA 鏈上的小黑點(diǎn)是 _ ,這種形狀說明 _ 。 12 真核生物轉(zhuǎn)錄終止修飾點(diǎn)的特異序列是 _ ,轉(zhuǎn)錄越過修飾點(diǎn)后, mRNA 在修飾點(diǎn)處被切斷,隨即加入 _ 和 _ 。 13 mRNA 轉(zhuǎn)錄后剪接加工是除去 _ ,把鄰近的 _ 連接起來。 四、名詞解釋 1 asymmetric transcription 2 coding strand 3 template strand 4 RN
15、A polymerase 5 holoenzyme 6 translation 7 Pribnow box 8 transcription bubble 9 CTD 10 TATA box 11 RNA replication 12 TF 13 split gene 14 intron 15 extron 16 mRNA splicing 17 self-splicing 18 structural gene 19 spliceosome 20 mRNA cleavage 五、問答題 1 試述復(fù)制和轉(zhuǎn)錄有何異同。 2 簡述原核生物轉(zhuǎn)錄終止的方式。 3 真核生物由 hnRNA 轉(zhuǎn)變?yōu)?mRNA
16、包括哪些加工過程? 4 何謂帽子結(jié)構(gòu)?意義何在? 5 簡述真核生物 tRNA 前體的轉(zhuǎn)錄后加工方式。 6 試比較原核生物和真核生物轉(zhuǎn)錄過程的異同。 7 試比較原核生物和真核生物 RNA 聚合酶的異同。 8 試 比較真核生物和原核生物轉(zhuǎn)錄起始的第一步有何不同。 9 轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物和轉(zhuǎn)錄空泡有何區(qū)別? 10 何為斷裂基因?試述 mRNA 的剪接過程。 參考答案 一、選擇題 (一) A 型題 1 D 2 C 3 C 4 D 5 C 6 D 7 A 8 A 9 D 10 D 11 C 12 C 13 C 14 C 15 C 16 A 17 E (二) B 型題 1 D 2 C 3 B 4 E 5 D
17、6 A 7 D 8 A 9 E 10 D 11 C 12 E (三) X 型題 1 BD 2 ABC 3 ACDE 4 ABCE 5 ABCE 二、是非題 1 B 2 A 3 A 4 A 5 A 6 B 7 A 8 A 9 B 10 A 11 A 12 A 13 B 14 A 15 B 16 B 17 B 三、填空題 1 DNA 三磷酸核糖核苷酸 5 ' 3 ' 3 ' , 5 ' - 磷酸二酯鍵 2 模板鏈 編碼鏈 3 結(jié)構(gòu)基因 編碼區(qū) 非編碼區(qū) 4 核仁 rRNA 前體 細(xì)胞核內(nèi) hnRNA 核仁外 tRNA snRNA 5 引物 依賴 DNA 的 RNA
18、聚合 依賴 RNA 的 RNA 聚合 6 7 5 ' 端加 m 7 GpppN 帽子結(jié)構(gòu) 3 ' 端加 poly ( A )尾 剪接 剪切 編輯 8 起始 延長 終止 9 TTGACA TATAAT 10 RNA 聚合酶全 核心 11 mRNA 多聚核糖體 在同一 DNA 模板上有多個(gè)轉(zhuǎn)錄同時(shí)在進(jìn)行 12 AAUAAA poly ( A )尾 5 '- 帽子結(jié)構(gòu) 13 內(nèi)含子 外顯子 四、名詞解釋 1 不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄,有兩方面含義:一是在 DNA 雙鏈分子上,一股鏈作為模板指引轉(zhuǎn)錄,另一股鏈不轉(zhuǎn)錄;二是模板鏈并非總是在同一單鏈上。 2 編碼鏈,在 DNA 雙鏈上與模板鏈互補(bǔ)
19、,不用作轉(zhuǎn)錄模板的一股單鏈,稱為編碼鏈。 mRNA 堿基序列除 U 代替 T 外,與編碼鏈?zhǔn)且恢碌摹?3 模板鏈, DNA 雙鏈中按堿基配對(duì)規(guī)律能指引轉(zhuǎn)錄生成 RNA 的一股單鏈,稱為模板鏈。 4 RNA 聚合酶,以 DNA 或 RNA 為模板,以 5 三磷酸核苷為原料催化合成 RNA 的酶稱為 RNA 聚合酶 。 5 全酶,指原核生物 RNA 聚合酶由多個(gè)亞基組成,其中 2 ' () 亞基組成核心酶,亞基加上核心酶稱為全酶,參與轉(zhuǎn)錄的起始過程。 6 轉(zhuǎn)錄,生物體以 DNA 為模板合成 RNA 的過程稱為轉(zhuǎn)錄。意思是把 DNA 的堿基序列轉(zhuǎn)抄成 RNA 。 7 Pribnow 盒,原核
20、生物基因操縱 子轉(zhuǎn)錄上游 -10 區(qū) 的共有序列為 TATAAT ,是 1975 年由 D Pribnow 首先發(fā)現(xiàn)的,稱為 Pribnow 盒。 8 轉(zhuǎn)錄空泡,原核生物轉(zhuǎn)錄延長過程中, RNA 聚合酶分子覆蓋 40bp 以上的 DNA 分子段落,轉(zhuǎn)錄解鏈范圍小于 20bp ,產(chǎn)物 RNA 又和模板鏈配對(duì)形成長 約 8 12bp 的 RNA/DNA 雜化雙鏈,這樣由酶 -DNA-RNA 形成的轉(zhuǎn)錄復(fù)合物,形象的稱為轉(zhuǎn)錄空泡。 9 羧基末端結(jié)構(gòu)域,真核生物 RNA 聚合酶 最大亞基的羧基末端有一段共有序列,為 Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser 的重復(fù)序列片段,稱為 羧基末端
21、結(jié)構(gòu)域。所有的真核生物 RNA 聚合酶 都有 CTD ,只是 7 個(gè)氨基酸共有序列的重復(fù)程度不同。 CTD 對(duì)維持細(xì)胞的活性是必需的。 10 TATA 盒,又稱 Hogness 盒,真核生物轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游共同的 TATA 序列,稱為 TATA 盒。是基本轉(zhuǎn)錄因子 TF D 結(jié)合位點(diǎn)。 11 RNA replication RNA 復(fù)制,以 RNA 為模板合成 RNA 的過程,由 RNA 依賴的 RNA 聚合酶催化,多見于病毒。是逆轉(zhuǎn)錄病毒以外的 RNA 病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)以病毒的單鏈 RNA 為模板合成 RNA 的方式。 12 轉(zhuǎn)錄因子,反式作用因子中,直接或間接結(jié)合 RNA 聚合酶的蛋白質(zhì)因子
22、。 13 斷裂基因,真核生物結(jié)構(gòu)基因由若干個(gè)編碼區(qū)和非編碼區(qū)互相隔但又連續(xù)鑲嵌而成,去除非編碼區(qū)再連接后,可翻譯出由連續(xù)氨基酸組成的完整的蛋白質(zhì),這些基因稱為斷裂基因。 14 內(nèi)含子,是隔斷基因的線性表達(dá)而在剪接過程中被除去的核酸序列。 15 外顯子,是在斷裂基因及其初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物上出現(xiàn),并表達(dá)為成熟 RNA 的核酸序列。 16 mRNA splicing mRNA 剪接,去除初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物上的內(nèi)含子,把外顯子連接為成熟 RNA 的過程,稱為 mRNA 剪接。 17 自剪接,是由 RNA 分子催化自身內(nèi)含子剪接的反應(yīng)。 18 結(jié)構(gòu)基因,基因組 DNA 中能轉(zhuǎn)錄出 RNA 的 DNA 區(qū)段,稱為結(jié)構(gòu)
23、基因。 19 剪接體,是真核 mRNA 前體剪接的場所,由 snRNA (如 U1 、 U2 、 U4 、 U5 和 U6 等)和大約 50 種蛋白質(zhì)裝配而成,剪接體裝配需要 ATP 提供能量。 20 mRNA 剪切,是剪去某些內(nèi)含子,然后在上游的外顯子 3 端直接進(jìn)行多聚腺苷酸化,不進(jìn)行相鄰?fù)怙@子之間的連接反應(yīng)。 五、問答題 1 試述復(fù)制和轉(zhuǎn)錄有何異同。 答:相同點(diǎn): 轉(zhuǎn)錄和復(fù)制都是酶促的核苷酸聚合過程,都以 DNA 為模板,都以核苷酸為原料,都需依賴 DNA 的聚合酶,聚合過程都是在核苷酸之間生成磷酸二酯鍵,新生鏈的方向都是 53 ,都需遵從堿基配對(duì)規(guī)律,產(chǎn)物都是很長的多核苷酸鏈。 不同點(diǎn)
24、:( 1 )模板:復(fù)制是兩股 DNA 鏈都復(fù)制,轉(zhuǎn)錄僅模板鏈轉(zhuǎn)錄,編碼鏈不轉(zhuǎn)錄,即不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄;( 2 )聚合酶:復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的聚合酶分別是 DNA-pol 和 RNA-pol ;( 3 )原料:復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的原料分別是 dNTP 和 NTP ;( 4 )產(chǎn) 物:復(fù)制的產(chǎn)物是子代雙鏈 DNA (半保留復(fù)制), 轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物有 mRNA 、 tRNA 和 rRNA 等單鏈;( 5 )配對(duì):復(fù)制是 A T , G C 配對(duì),而轉(zhuǎn)錄的 RNA 鏈中的 U 代替了 T ,是 A U , G C , T A 配對(duì);( 6 )引物:復(fù)制生成 DNA 鏈時(shí)需要引物,轉(zhuǎn)錄生成 RNA 鏈時(shí)不需要引物。 2 簡述原核生
25、物轉(zhuǎn)錄終止的方式。 答: RNA 聚合酶在 DNA 模板上停頓下來不再前進(jìn),轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 RNA 鏈從轉(zhuǎn)錄復(fù)合物上脫落下來,這就是轉(zhuǎn)錄終止。原核生物轉(zhuǎn)錄終止分為依賴因子和非依賴因子兩大類:( 1 )依賴因子的轉(zhuǎn)錄終止。因子有 ATP 酶活性和解螺旋酶活性,在與 RNA 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物結(jié)合后,因子和 RNA 聚合酶都發(fā)生構(gòu)象變化,從而使 RNA 聚合酶停頓,解螺旋酶的活性使 DNA/RNA 雜化雙鏈拆離,利于產(chǎn)物從轉(zhuǎn)錄復(fù)合物中釋放。( 2 )非依賴因子的轉(zhuǎn)錄終止。 DNA 模板上靠近終止處特殊的堿基序列形成莖環(huán)或發(fā)夾形式的二級(jí)結(jié)構(gòu)及靠近 3 端一串寡聚 U 是關(guān)鍵結(jié)構(gòu)。莖環(huán)結(jié)構(gòu)在轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 RNA 分子上形
26、成,可能改變 RNA 聚合酶的構(gòu)象,進(jìn)而導(dǎo)致酶 - 模板結(jié)合方式的改變,使酶不再向下游移動(dòng),于是轉(zhuǎn)錄停止;寡聚 U 是使 RNA 鏈從模板上脫落的促進(jìn)因素,因?yàn)樗械膲A基配對(duì)中, rU/dA 配對(duì)最為不穩(wěn)定。轉(zhuǎn)錄復(fù)合物上局部形成的 RNA/DNA 雜化短鏈,因?yàn)?RNA 分子要形成自己的局部雙鏈, DNA 也要復(fù)原為雙鏈,這樣使本來不穩(wěn)定的雜化雙鏈更不穩(wěn)定,轉(zhuǎn)錄復(fù)合物趨于解體。 3 真核生物由 hnRNA 轉(zhuǎn)變?yōu)?mRNA 包括哪些加工過程? 答:真核生物 mRNA 的加工包括首、尾修飾、剪接、剪切和 mRNA 編輯。真核生物 mRNA 轉(zhuǎn)錄的初級(jí)產(chǎn)物 hnRNA ,需要進(jìn)行 5'-
27、末端和 3'- 末端( 首、尾部 )的修飾以及對(duì) mRNA 進(jìn)行剪接 、剪切和編輯 ,才能成為成熟的 mRNA ,被轉(zhuǎn)運(yùn)到核糖體,指導(dǎo)蛋白質(zhì)翻譯。( 1 )前體 mRNA 在 5'- 末端加 “ 帽子”結(jié)構(gòu)。由加帽酶和甲基轉(zhuǎn)移酶催化。 5' 帽子結(jié)構(gòu)可以使 mRNA 免遭核酸酶的攻擊,并參與蛋白質(zhì)生物合成的起始過程。 ( 2 )前體 mRNA 在 3'- 末端加 poly ( A )尾。前體 mRNA 在轉(zhuǎn)錄終止修飾點(diǎn)被切開后,由多聚 (A) 聚合酶催化,以 ATP 為底物,在 mRNA 的 3 ' 端加上大約 100200 個(gè)腺苷酸殘基的尾部。 pol
28、y ( A )尾的有無與長短是維持 mRNA 作為翻譯模板的活性以及增加 mRNA 本身穩(wěn)定性的因素。 ( 3 )前體 mRNA 的剪接和剪切。真核生物的基因是不連續(xù)的即斷裂基因,由外顯子和內(nèi)含子相互間隔但又連續(xù)鑲嵌而成。真核生物 mRNA 的剪接是去除內(nèi)含子后將相鄰?fù)怙@子連接起來,然后進(jìn)行多聚腺苷酸化,剪接體是 mRNA 剪接的場所,通過二次轉(zhuǎn)酯反應(yīng)將前體 mRNA 加工為成熟的 mRNA ; ,剪切是剪去某些內(nèi)含子,然后在上游的外顯子 3 ' 端直接進(jìn)行多聚腺苷酸化,不進(jìn)行相鄰?fù)怙@子之間的連接反應(yīng)。通過這兩種加工模式,一個(gè)前體 mRNA 分子可被加工成多個(gè) mRNA 分子。 ( 4
29、 ) mRNA 編輯。 基因 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的 mRNA 分子中,由于核苷酸的缺失,插入或置換,基因轉(zhuǎn)錄物的序列不與基因編碼序列互補(bǔ),使翻譯生成的蛋白質(zhì)的氨基酸組成不同于基因序列中的編碼信息,這種現(xiàn)象稱為 m RNA 編輯。 m RNA 編輯、剪接或剪切都可使一個(gè)基因有可能產(chǎn)生幾種不同的蛋白質(zhì)。4 何謂帽子結(jié)構(gòu)?意義何在? 答:帽子結(jié)構(gòu)是存在于真核生物 mRNA 5'- 末端的 m 7 GpppN 結(jié)構(gòu)。 RNA 聚合酶催化合成新生 RNA 鏈長度達(dá) 25-30 個(gè)核苷酸時(shí),在加帽酶和甲基轉(zhuǎn)移酶的作用下其 5'- 末端的 核苷酸 就與 7- 甲基鳥嘌呤核苷酸通過不常見的 5'
30、 , 5'- 三磷酸連接鍵相連 轉(zhuǎn)變成 5 ' -m 7 GpppN ,即把一 個(gè)甲基化的鳥嘌呤帽加到轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的 5 ' 端,此過程有磷酸解、磷酸化和堿基的甲基化 。 意義:( 1 ) 5' 帽子結(jié)構(gòu)可以使 mRNA 免遭核酸酶的攻擊,維持 mRNA 作為翻譯模板的完整性。( 2 )與帽結(jié)合蛋白復(fù)合體結(jié)合,并參與 mRNA 和核糖體的結(jié)合,啟動(dòng)蛋白質(zhì)的生物合成。 5 簡述真核生物 tRNA 前體的轉(zhuǎn)錄后加工方式。 答:真核生物 tRNA 前體的轉(zhuǎn)錄后加工有四方面:( 1 ) 5' 端的 16 個(gè)核苷酸序列由 RNase P 切除; ( 2 ) 3'
31、; 端的兩個(gè)核苷酸由 RNase D 切除,再由核苷酸轉(zhuǎn)移酶加上 CCA ; ( 3 )柄 - 環(huán)結(jié)構(gòu)的一些核苷酸的堿基經(jīng)化學(xué)修飾為稀有堿基,包括某些嘌呤甲基化生成甲基嘌呤、某些尿嘧啶還原為二氫尿嘧啶( DHU )、尿嘧啶核苷轉(zhuǎn)變?yōu)榧倌蜞奏ず塑眨ǎ?、某些腺苷酸脫氨成為次黃嘌呤核苷酸( I );( 4 )通過剪接切除內(nèi)含子。 6 試比較原核生物和真核生物轉(zhuǎn)錄過程的異同。 轉(zhuǎn) 錄 原核生物 真核生物 相 同 1. 模板( DNA ) 2. 底物( NTP ) 3. 摻入新鏈成分( NMP ) 4. 需 RNA-pol 5. 化學(xué)鍵( 3' , 5'- 磷酸二酯鍵) 6. 過程(三個(gè)
32、階段) 7. 聚合方向( 5'3' ) 8. 產(chǎn)物(單鏈 RNA ) 9. 方式(不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄) 10. 遵從堿基配對(duì)規(guī)律( T A 、 A U 、 G C ) 11. 除原核 mRNA 外,初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物都須經(jīng)加工才具有活性 不 同 RNA-pol 種類 與功能 一種( 2 ' ) 轉(zhuǎn)錄生成所有 RNA 種類 產(chǎn)物 rRNA mRNA tRNA 和小分子 RNA 酶的特異性抑制劑 利福平或利福霉素 鵝膏蕈堿 起 始 RNA-pol 全酶 RNA-pol 、 、 分別 起始轉(zhuǎn)錄不同的 RNA 是否需蛋白質(zhì) 不需要 需要多種轉(zhuǎn)錄因子 模板 DNA 保守序列 -10 區(qū) (TA
33、TAAT)/Pribnow box , -35 區(qū) (TTGACA) -30 區(qū)( TATA ) /Hogness box/TATA box 等順式作用元件 聚合酶與模板 DNA 結(jié)合方式 直接結(jié)合 不能直接結(jié)合,需多種轉(zhuǎn)錄因子參與 延 長 RNA-pol 核心酶( 2 ' ) RNA-pol 、 、 分別延長 不同的 RNA ,與起始統(tǒng)一 是否伴有核小體解聚與聚合 否 是 是否伴有翻譯 是 否 終止 終止機(jī)制 兩種方式(依賴 Rho 、非依賴 Rho 因子 的轉(zhuǎn)錄終止) mRNA 的轉(zhuǎn)錄終止和轉(zhuǎn)錄后修飾 (加尾、加帽)密切相關(guān) 轉(zhuǎn)錄后修飾 mRNA 不需要, tRNA 、 rRNA 前體需轉(zhuǎn)錄后加工修飾 mRNA 、 tRNA 、 rRNA 前體 都需轉(zhuǎn)錄后加工修飾 7 試比較原核生物和真核生物 RNA 聚合酶的異同。 答: 原核生物 RNA 聚合酶通常只有一種,催化合成所有類別的 RNA ,該酶由多亞基組成,全酶是 2 ' () ,核心酶是
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