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文檔簡介
1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上 抄記背果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用1基礎(chǔ)知識11果膠是植物細(xì)胞壁和胞間層的主要組成成分之一。12在果汁加工中,果膠的存在易導(dǎo)致 果汁出汁率低,果汁渾濁 。13果膠酶分解果膠的作用是:瓦解 植物的細(xì)胞壁及胞間層 ,使榨取果汁更容易,把果膠分解為 可溶性的半乳糖醛酸 ,使渾濁的果汁變得澄清,因此可以解決果汁加工中出現(xiàn)的問題。14果膠酶是一類酶的總稱,包括: 多聚半乳糖醛酸 酶、 果膠分解 酶和 果膠酯 酶。在植物細(xì)胞工程中果膠酶的作用是 與纖維素酶一起除去植物細(xì)胞的細(xì)胞壁 。15酶的活性是指:酶催化 一定化學(xué)反應(yīng) 的能力。16酶的活性高低可用一定條件下的酶促 反應(yīng)速度 來表
2、示,即單位時間、單位體積內(nèi) 反應(yīng)物消耗量 或 產(chǎn)物生成量 來表示。17影響酶活性的因素有: 溫度 、 PH 、 激活劑 和 抑制劑 等。1.8食品工業(yè)生產(chǎn)中最常用的果膠酶是通過 霉菌發(fā)酵 產(chǎn)生。1.9根據(jù)影響酶活性的因素,在實(shí)際生產(chǎn)中通過確定果膠酶的最適溫度、最適PH等條件獲得果膠酶的最高活性。2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)21實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?定量測定溫度或pH對果膠酶活性的影響 。該實(shí)驗(yàn)與必修I中探究“影響酶活性的條件”實(shí)驗(yàn)有何不同?前者屬于是定量分析實(shí)驗(yàn),后者屬于定性分析實(shí)驗(yàn)。22實(shí)驗(yàn)原理:果膠酶瓦解細(xì)胞壁和胞間層增大果汁產(chǎn)量;果膠酶催化分解果膠增大果汁澄清度。23變量設(shè)計(jì)與控制:你確定的溫度梯度(或pH梯度)為
3、 10或5(或0.5、1.0) 。實(shí)驗(yàn)的自變量是 溫度(或pH) ,控制自變量的方法是利用 恒溫水浴鍋(或滴加酸堿等) 。實(shí)驗(yàn)的因變量是 酶的活性 ,檢測因變量的方法是測定 果汁的產(chǎn)出量或澄清度 。果汁與果膠酶在混合之前,分裝在不同試管中用同一恒溫處理的目的是保證果汁與果膠酶混合前后的溫度相同,避免因混合導(dǎo)致溫度變化而影響果膠酶活性。該實(shí)驗(yàn)中不同的溫度設(shè)置之間相互對照??刂芇H和其他因素相同,保證只有溫度一個變量對果膠酶的活性產(chǎn)生影響。3操作提示31制備果泥:用榨汁機(jī)榨制果泥。在榨制橙子汁時不必去橙皮32在探究不同PH對果膠酶活性的影響時,可以用 0.1%的NaOH溶液和鹽酸 調(diào)節(jié)pH。33在
4、果膠酶處理果泥時,為了果膠酶能充分地催化反應(yīng),用玻璃棒不時攪拌。4結(jié)果分析與評價將以下某同學(xué)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換成曲線圖。將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換成曲線圖的方法以自變量為橫坐標(biāo)、以因變量為縱坐標(biāo)建立直角坐標(biāo)系。注明坐標(biāo)軸名的名稱、單位、坐標(biāo)原點(diǎn)以及曲線名稱。每個坐標(biāo)軸上的取值單位要相等。將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)標(biāo)在坐標(biāo)系中,并用各種線型連接起來。溫度101520253035404550果汁量/ml124654321探討加酶洗衣粉的洗滌效果一、基礎(chǔ)知識1加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉,目前常用的酶制劑有四類:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶。其中,應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含
5、有的大分子蛋白質(zhì)水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污跡從衣物上脫落。同樣道理,其他酶也是將大分子物質(zhì)分解為小分子物質(zhì),從而使洗衣粉具有更好的去污能力。2、使用加酶洗衣粉時,影響酶活性的因素有溫度 、酸堿度、表面活性劑等,為此,科學(xué)家通過基因工程生產(chǎn)出了特殊的酶,并制成酶制劑,解決了這個問題。3、加酶洗衣粉可以降低表面活性劑和三聚磷酸鈉的用量,使洗滌劑朝低磷無磷的方向發(fā)展,減少對環(huán)境的污染。二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)例1探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉對衣物污漬的洗滌效果實(shí)驗(yàn)原理:加酶洗衣粉中含有一種或多種酶,可以將相應(yīng)的大分子物質(zhì)分解為小分子物質(zhì),從而使污跡容易從衣物上脫落,這是普通洗衣粉難以做到的。實(shí)驗(yàn)思路
6、:自變量:加酶洗衣粉、普通洗衣粉;因變量:相同時間污跡殘留量或洗去污跡所需的時間。除自變量不同外,其它因素要完全相同。實(shí)例2探討溫度對加酶洗衣粉洗滌的影響實(shí)驗(yàn)原理:酶的活性受溫度影響,在最適溫度時,酶的活性最高,高于或低于最適溫度時,酶的活性下降。實(shí)驗(yàn)思路:自變量:不同溫度;因變量:相同時間污跡殘留量或洗去污跡所需的時間。除自變量不同外,其它因素要完全相同。實(shí)例3不同種類的加酶洗衣粉對同一污漬的洗滌效果實(shí)驗(yàn)原理:不同種類的加酶洗衣粉所加的酶不同,而酶具有專一性,所以對不同污漬的洗滌效果不同。設(shè)計(jì)不同類型洗衣粉對不同污漬的洗滌效果記錄表格(自己在草稿紙上列表)。 酵母細(xì)胞的固定化一、基礎(chǔ)知識(一
7、)固定化酶的應(yīng)用實(shí)例1、高果糖漿是指果糖含量為42%左右的糖漿,能將葡萄糖轉(zhuǎn)化為果糖的酶是葡萄糖異構(gòu)酶。2、使用固定化酶技術(shù),將這種酶固定在一種顆粒狀的載體上,再將這些酶顆粒裝到一個反應(yīng)柱內(nèi),柱子底端裝上分布著許多小孔的篩板。酶顆粒無法通過篩板的小孔,而反應(yīng)溶液卻可以自由出入。生產(chǎn)過程中,將葡萄糖溶液從反應(yīng)柱的上端注入,使葡萄糖溶液流過反應(yīng)柱,與固定化葡萄糖異構(gòu)酶接觸,轉(zhuǎn)化成果糖,從反應(yīng)柱的下端流出。反應(yīng)柱能連續(xù)使用半年,大大降低了生產(chǎn)成本,提高了果糖的產(chǎn)量和質(zhì)量。(二)固定化細(xì)胞技術(shù)1、固定化酶和固定化細(xì)胞是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù),包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附
8、法。2、一般來說,酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定,而細(xì)胞多采用包埋法固定化。這是因?yàn)榧?xì)胞體積比酶分子的體積大;體積大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合,而個小的酶容易從包埋材料中漏出。3、包埋法法固定化細(xì)胞,即將微生物細(xì)胞均勻地包埋在不溶于水的載體中。常用的載體有明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素和聚丙烯酰胺等。二、實(shí)驗(yàn)操作(一)制備固定化酵母細(xì)胞:1酵母細(xì)胞的活化:休眠狀態(tài)恢復(fù)正常生活狀態(tài)。2配制物質(zhì)的量的濃度為0.05mol/L的CaCl2溶液3配制海藻酸鈉溶液:操作中最重要的一環(huán)。加熱溶化海藻酸鈉時要注意小火間斷加熱,重復(fù)幾次,并不斷攪拌,直到海藻酸鈉融化為止。如果加熱太快,海藻酸鈉會發(fā)生焦
9、糊。4海藻酸鈉溶液與酵母菌細(xì)胞混合:將海藻酸鈉溶液冷卻至室溫,加入已活化的海藻酸鈉溶液,進(jìn)行充分?jǐn)嚢?,使其混合均勻,在轉(zhuǎn)移至注射器中。5固定化酵母細(xì)胞:以恒定的速度緩慢地將注射器中溶液滴加到剛配制好CaCl2溶液中,浸泡30min左右。(二)用固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵:酵母細(xì)胞凝膠珠蒸餾水沖洗25下發(fā)酵24h三、結(jié)果分析與評價(一)制作凝膠珠過淺、呈白色,說明海藻酸鈉濃度濃度偏低,包埋的酵母細(xì)胞數(shù)目少,影響實(shí)驗(yàn)效果;如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形,則說明海藻酸鈉濃度濃度偏高,制作失敗,需要再作嘗試。(二)固定的酵母細(xì)胞發(fā)酵產(chǎn)生酒精,可以看到產(chǎn)生了很多氣泡,同時會聞到酒味。工業(yè)生產(chǎn)中,細(xì)胞的固定化技
10、術(shù)是在嚴(yán)格無菌的條件下進(jìn)行的。直接使用酶、固定化酶和固定化細(xì)胞催化的優(yōu)缺點(diǎn)如下表所示。類型優(yōu)點(diǎn)不足直接使用酶催化效率高,低耗能、低污染等。對環(huán)境條件非常敏感,容易失活;溶液中的酶很難回收,不能被再次利用,提高了生產(chǎn)成本;反應(yīng)后酶會混在產(chǎn)物中,可能影響產(chǎn)品質(zhì)量。固定化酶酶既能與反應(yīng)物接觸,又能與產(chǎn)物分離,同時,固定在載體上的酶還可以被反復(fù)利用。一種酶只能催化一種化學(xué)反應(yīng),而在生產(chǎn)實(shí)踐中,很多產(chǎn)物形成都通過一系列的酶促反應(yīng)才能得到的。固定化細(xì)胞成本低,操作更容易。固定后的酶或細(xì)胞與反應(yīng)物不容易接近,可能導(dǎo)致反應(yīng)效果下降等。血紅蛋白的提取和分離一、基礎(chǔ)知識(一)凝膠色譜法1、凝膠色譜法也稱做分配色譜
11、法,是根據(jù)相對分子質(zhì)量大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。2、凝膠實(shí)際上是一些微小的多孔球體,這些小球體大多數(shù)是由多糖類化合物構(gòu)成的,如葡聚糖或瓊脂糖。3、在小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道,相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子通過凝膠時速度不同,相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程較長,移動速度較慢;而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠外部移動,路程較短,移動速度較快。相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離。(二)緩沖溶液1、緩沖溶液的作用是能夠抵制外界酸或堿對溶液PH的影響,維持PH基本不變。2、緩沖溶液通常由12種緩沖劑溶解于水中配制而成的。3、生物體內(nèi)進(jìn)行的各種生物化
12、學(xué)反應(yīng)都是在一定的pH下進(jìn)行的,為了能夠在實(shí)驗(yàn)條件下準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的過程,必須保持體外的pH與體內(nèi)的基本一致。(三)電泳1、電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程。2、許多重要的生物大分子,如多肽、核酸等都具有可解離的基團(tuán),在一定的pH下,這些基團(tuán)會帶上正電或負(fù)電。在電場的作用下,這些帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動。電泳利用了待分離樣品中各分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。3、兩種常用的電泳方法是瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳,在凝膠中加入SDS,電泳速率完全取決于分子大小,因此,在測定蛋白質(zhì)分子
13、量時通常使用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。二、實(shí)驗(yàn)操作蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步:樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。(一)樣品處理1、紅細(xì)胞的洗滌:洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白,采集的血樣要及時分離紅細(xì)胞,分離時采用低速短時間離心(500r/min),然后用膠頭吸管吸出上層透明的黃色血漿,將下層暗紅色的紅細(xì)胞倒入燒杯,再加入五倍體積的生理鹽水(質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%),緩慢攪拌10min,低速短時間離心,如此重復(fù)洗滌三次,直至上清液中沒有黃色,表明紅細(xì)胞已洗滌干凈。2、血紅蛋白的釋放:在蒸餾水和甲苯作用下,紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白。3、分離血紅蛋白溶液:將攪拌好的混合溶液離心(2000r/min)后,試管中的溶液分為4層。第一層為無色透明的甲苯層,第2層為白色薄層固體,是脂溶性物質(zhì)的沉淀層,第3層是紅色透明液體,這是血紅蛋白的水溶液,第4層是其他雜質(zhì)
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