TaqMan探針熒光定量PCR反應(yīng)試劑盒

1、TaqMan探針熒光定量PCR反應(yīng)試劑盒使用說明書(Cat#Yu-R01-2)【產(chǎn)品介紹】TaqMan熒光探針的5'末端連接熒光基團，而淬滅劑則在3'末端。PCR擴增時在加入引物的同時加入特異性的熒光探針。探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號。本公司專利技術(shù)生產(chǎn)的TaqMan探針熒光定量PCR反應(yīng)試劑盒含有熒光增強劑，對FAM、HEX和VIC等熒光物質(zhì)的有明顯的熒光增強效果，靈敏度高，結(jié)果可靠，性能優(yōu)良，在許多性能上完全超越

2、國外同類產(chǎn)品?！井a(chǎn)品特點】1. 適用于使用Taqman-TAMRA和Taqman-BHQ1等探針的實時熒光定量PCR,對FAM、HEX和VIC等熒光物質(zhì)的有明顯的熒光增強效果。結(jié)合本公司的各種游離DNA提取試劑盒(Cat#Yu-CF-01-1，Cat#Yu-CF-01-2，Cat#Yu-CF-02-1，Cat#Yu-CF-02-2)，可以進行游離DNA的定量檢測。2. 靈敏度高：本產(chǎn)品的擴增效率明顯高于進口產(chǎn)品(圖1)。3. 穩(wěn)定性好：本產(chǎn)品重復(fù)好，CV值<2%。4. 操作簡單：只需在反應(yīng)體系中加入引物、探針、模板和ROX。5. 本產(chǎn)品使用熱啟動酶，可以進行HotStart法PCR反應(yīng)。

3、6. 本產(chǎn)品無本品無OSHA規(guī)定的危險物品，安全無化學(xué)污染?！具m用儀器】ThermalCycler系列熒光定量PCR儀、AppliedBiosystems系列熒光定量PCR儀、RocheDiagnosticsLightCycler系列熒光定量PCR儀、Bio-RadCFX96Real-TimePCRDetectionSystem。Mm4Ml9gbwpM.一-+一邑嵯融1叩毗=用0值PfbEftJVTX*1HIFAr*,pisdf：群312if也圖1本產(chǎn)品擴增,globin基因結(jié)果與進口產(chǎn)品的比較?！驹噭┖薪M成】試劑盒組成數(shù)量保存條件TaqMan探針熒光定量PCR反應(yīng)預(yù)混液(5X)250山-20

4、C保存Roxdye2(50為15pL-20C保存ddH2O1mL使用說明書1份【規(guī)格】50T/盒【貯藏與有效期】PCR反應(yīng)預(yù)混液-20C保存，有效期12個月。開蓋后，4c保存，有效期2周。Roxdye2(50X)-20C保存，有效期24個月。【有效成分】Tris-Hcl,氯化鉀，氯化鎂【自備試劑】無【注意事項】使用前務(wù)必認真閱讀以下注意事項。1 .使用前充分融解，輕輕顛倒混勻，避免起泡，短暫離心后使用。2 .反應(yīng)液的配制和分裝務(wù)必使用無污染的尖嘴、EP管等。3 .如果配制試劑時間較長，請將融解后的反應(yīng)液于冰上放置。4 .試劑盒僅供科研使用?！静僮鞑襟E】1、在無菌潔凈PCR管中依次加入以下試劑:

5、成分加入量(山)終濃度PCR反應(yīng)預(yù)混液(5%51X上游引物(10gM)0.50.2M下游引物(10gM)0.50.2M探針(10.M)0.750.3M模板10ddH2O8Roxdye2(50%0.25總體積25注：以下僅為建議，最佳條件需要各個實驗室摸索。通常引物濃度為0.2M可以獲得很好的結(jié)果。反應(yīng)不佳時，引物濃度可以在0.11M范圍內(nèi)調(diào)整。使用的探針濃度與定量PCR儀、探針種類和熒光標記物質(zhì)有關(guān)。通常探針終濃度在0.10.5M范圍內(nèi)調(diào)整。模板添加量因模板溶液中靶基因的拷貝數(shù)不同而不同，模板添加量最好在100ng以下。Ro娓否加入視儀器而定。2、充分混勻后短暫離心。3、擴增：95c預(yù)變性30秒；95c變性5秒，60c退火40秒，共40個循環(huán)。注：以下僅為建議，擴增最佳條件需要