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1、文件名交叉配血試驗標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程鹽水法編制人審核人批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期修改日期簽 字修改日期簽 字復(fù)審日期簽 字復(fù)審日期簽 字落石出交叉配血試驗標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程鹽水法一、目的為保證臨床輸血的相容性,確保臨床輸血平安,對全血、紅細胞懸液、洗滌紅細胞、濃縮紅細胞、少白細胞紅細胞、冰凍紅細胞、機采濃縮白細胞懸液等血液成分進行交叉配血試驗。二、方法接受鹽水介質(zhì)試管法;三、原理交叉配血試驗也稱協(xié)作性試驗,只是檢查不協(xié)作性,使受、供者血液間沒有可測的不相協(xié)作的抗原、抗體成分。鹽水介質(zhì)交叉配血試驗常稱立即離心配血試驗,將人紅細胞血型抗原與相應(yīng)的抗體發(fā)生的凝集反響在鹽水介質(zhì)中進行,只有在任何步驟中不產(chǎn)生溶液血或凝集時
2、方可將供血者的血液或血液成分給受血者輸注。試驗通常包括:主側(cè)交叉配血試驗:受血者血清對供血者紅細胞,是檢測受血者血清中是否存在與供血者紅細胞發(fā)生反響的抗體;次側(cè)交叉配血試驗:受血者紅細胞對供血者血清,是檢測供血者血清中是否存在與受血者紅細胞發(fā)生反響的抗體;自身對比試驗:受血者紅細胞對受血者血清,是檢測受血者血清中是否存在抗自身紅細胞抗體、直接抗球蛋白試驗陽性及紅細胞緡錢狀假陽性的存在。四、適用范圍適用于輸血前需進行交叉配血試驗的血液及血液成分。五、儀器設(shè)備一般離心機;血型專用離心機;六、試劑1、試劑名稱:0.9%氯化鈉注射液2、試劑生產(chǎn)廠家:湖南科倫制藥;3、批準(zhǔn)文號:國藥準(zhǔn)字H2005006
3、1;4、包裝規(guī)格:500ml/瓶;5、貯藏條件;18-25避光保存。6、有效期:自檢定合格之日起二年;七、檢測樣本要求1、標(biāo)本類型:靜脈血(EDTA抗凝劑:血液=1:10)。2、標(biāo)本采集:見輸血科標(biāo)本管理標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程。3、標(biāo)本儲存和運輸:新奇血28貯存時間不超過72小時。4、標(biāo)本拒收狀態(tài):標(biāo)識不精確、標(biāo)本稀釋、細菌污染,嚴(yán)峻溶血等不能測定。八、操作步驟1、將受血者與獻血者的紅細胞血清別離;2、分別配制受血者與獻血者紅細胞配成2%鹽水懸液;3、取潔凈小試管10mmx60mm2支,1支標(biāo)明主側(cè):受血者血清PS+供血者細胞DC;另1支標(biāo)明次側(cè):供血者血清DS+受血者細胞PC。4、按標(biāo)記主側(cè)管加受血
4、者血清1滴和供血者紅細胞懸液1滴。次側(cè)管加供血者血清1滴和受血者紅細胞懸液1滴。混勻,以1000r/min離心1min,輕輕側(cè)動試管,觀察結(jié)果。冬季室溫較低,應(yīng)將試管保溫,以防冷凝集素引起凝集反響影響結(jié)果推斷。5、結(jié)果推斷:ABO同型配血,主側(cè)和次側(cè)管均無溶血及凝集表示無輸血禁忌,可以輸血。反之不能。九、質(zhì)量掌握 1、此檢測工程應(yīng)參加衛(wèi)生部臨床檢驗中心組織的室間質(zhì)評,且成果合格;2、每日做室內(nèi)質(zhì)量掌握,且要求在控。3、嚴(yán)格執(zhí)行查對制度,推斷結(jié)果后應(yīng)仔細核對、記錄,必要時應(yīng)鏡下觀察紅細胞形態(tài)。4、交叉配血標(biāo)本應(yīng)在28保存留一周,以備復(fù)查。十、生物參考區(qū)間 相合;不相合。十一、考前須知與干擾因素1
5、、不能單獨應(yīng)用鹽水介質(zhì)交叉配血進行臨床發(fā)血,必須結(jié)合其他介質(zhì)方法交叉配血相合前方可發(fā)血。2、交叉配血標(biāo)本必須正確有標(biāo)識,其血液量、紅細胞或血漿的質(zhì)量符合實驗要求和受血者當(dāng)前的免疫學(xué)狀態(tài);3、交叉配血試驗血樣,要求是輸血前3天內(nèi)的血樣預(yù)防受血者在輸血前的3個月之內(nèi)可能有妊娠或輸血等免疫史而可能產(chǎn)生不規(guī)那么抗體。4、標(biāo)本血液離體后要求盡快送檢,至檢測完畢最長不能超過3d,每次檢測后受血者和供血者的血標(biāo)本應(yīng)在28保存7天;5、試劑使用前應(yīng)仔細檢查試劑的貯存條件是否符合要求、是否變質(zhì)失效;6、患者使用的藥物影響的處理:如果使用右旋糖酐、PVP等治療,應(yīng)注意將紅細胞洗滌;如果受者使用肝素治療,那么應(yīng)用硫
6、酸魚精蛋白對抗,使樣本凝結(jié);7、交叉配血試驗注意紅細胞緡錢狀的假陽性鑒別,應(yīng)結(jié)合鏡下觀察或離心去上清液后重懸觀察。8、抗體篩選試驗陰性,而交叉配血結(jié)果陽性,提示有未檢測明的同種抗體存在。9、交叉配血結(jié)果不相合提示有未查明的同種抗體存在。10、注意交叉配血試驗過程中離心力、溫度、紅細胞濃度、抗原抗體的比例;11、血清或血漿中如含有溶血性抗體,那么相應(yīng)紅細胞被溶解而不凝集,交叉配血結(jié)果陽性,如排解標(biāo)本中補體干擾因素的影響,可來活后重新試驗。12、注意在室溫反響中或抗球蛋白試驗中顯示有自身抗體,應(yīng)加做自身對比試驗或直接抗人球蛋白試驗加以鑒別。十二、參考文獻1、胡麗華主編,臨床輸血檢驗,第1版。中國醫(yī)藥科技出版社,2004;2、葉應(yīng)嫵,等主編,全國臨床檢驗操作規(guī)程,第3版。東南高校出版社,2006,11;內(nèi)容總結(jié)1落石出交叉配血試驗標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程鹽水法一、目的為保證臨床輸血的相容性,確保臨床輸血平安,對全血、紅細胞懸液、洗滌紅細胞、濃縮紅細胞、少白細胞紅細胞、冰凍紅細胞、機采濃縮白細胞懸液等血液成分進行交叉配血試驗2鹽
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