乳腺導(dǎo)管原位癌中新生血管的臨床病理意義

1、乳腺導(dǎo)管原位癌中新生血管的臨床病理意義楊明 管旌旌張奇兵 范志民大內(nèi)憲明【摘要】 目的 探討乳腺導(dǎo)管原位癌 (DCIS) 新生血管的形態(tài)及微血管密度 (MVD)的臨床和病理意義。方式 應(yīng)用免疫組化 SP 方式檢測(cè) 52 例 DCIS ER，PR， HER 2， CD 34 等的表達(dá)。結(jié)果 在 DCIS中MVD的形態(tài)要緊表現(xiàn)為兩種，一種為 MVD緊靠乳腺導(dǎo)管的基底膜呈項(xiàng)鏈狀散布，占 58%;另一種為間質(zhì)彌散狀散布，占52%;34%兩種形態(tài)共存。 MVD密度隨著核分級(jí)的增高而明顯增加，高核分級(jí)和非高核分級(jí)DCIS之間有顯著性不同 (P<ER 、PR 陰性組的 MVD明顯高于 ER、P

2、R陽(yáng)性組 (P<HER2 陽(yáng)性組明顯高于陰性組(P<。結(jié)論 新生血管可能是乳腺癌的初期事件， MVD增加可能預(yù)示 DCIS向浸潤(rùn)癌進(jìn)展的概率增加及預(yù)后不良?！娟P(guān)鍵詞】乳腺癌 ; 微血管密度 ; 免疫組織化學(xué) ; 新生血管研究說(shuō)明腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移能力與腫瘤促血管生成的能力緊密相關(guān)13。許多關(guān)于浸潤(rùn)性乳腺癌的研究說(shuō)明， 作為新生血管標(biāo)志的腫瘤間質(zhì)血管的數(shù)量與乳腺癌的轉(zhuǎn)移及死亡率明顯相關(guān) 13，說(shuō)明新生血管在浸潤(rùn)性乳腺癌的發(fā)生、進(jìn)展中相當(dāng)重要，而新生血管對(duì)乳腺癌初期原位癌時(shí)期發(fā)生及進(jìn)展的熟悉可能加倍關(guān)鍵4，5?？墒顷P(guān)于乳腺導(dǎo)管原位癌 (DCIS) 中新生血管的研究較少。本

3、研究通過(guò)免疫組化 SP法，結(jié)合其他腫瘤標(biāo)志物探討新生血管在DCIS中的意義。1 資料與方式臨床資料 標(biāo)本取自 1992 年至 2002 年在日本東北大學(xué)和吉林大學(xué)第一醫(yī)院進(jìn)行手術(shù)，病理診斷為乳腺 DCIS的病例 52 例。術(shù)前均未行放射及化學(xué)醫(yī)治。手術(shù)方式包括局部擴(kuò)大切除術(shù)，象限切除術(shù)和改良根治術(shù)。30 名患者行腋窩淋巴結(jié)打掃術(shù)。 標(biāo)本均進(jìn)行持續(xù)切片，切片距離為 3 mm，以排除含有微小浸潤(rùn)的病例。對(duì)全數(shù)標(biāo)本的 HE染色片進(jìn)行光鏡觀看。 病理分級(jí)依照 Van Nuys 分類法， 1 組為非高核分級(jí)不伴有壞死 ;2 組為非高核分級(jí)伴有壞死 ;3 組為高核分級(jí)伴或不伴壞死。免疫組織化學(xué)檢測(cè) 標(biāo)本均

4、經(jīng) 10%福爾馬林固定 , 石蠟包埋，切片厚度 4 m。免疫組織化學(xué)染色采納 SP法?？贵w為 ER，PR， HER2， CD34 等，抗體均為單克隆抗體，抗體的來(lái)源、克隆、稀釋倍數(shù)和抗原修復(fù)等具體情形見(jiàn)表 1。用已知肝癌組織作陽(yáng)性對(duì)照， PBS 代替一抗作陰性對(duì)照。 DAB顯色。表 1 本研究所用單克隆抗體名稱、廠家、克隆、稀釋度及抗原修復(fù)結(jié)果判定 ER、PR陽(yáng)性為細(xì)胞核中等程度染色呈棕褐色超過(guò)腫瘤細(xì)胞的 10%。HER2陽(yáng)性為細(xì)胞膜染色，定性 。微血管 (MVD)計(jì)數(shù) 于低倍鏡下觀看整張切片血管散布情形后, 選擇癌灶周圍間質(zhì)血管密集區(qū) , 在 200 倍視野內(nèi)計(jì)算上述 5 個(gè)不同區(qū)域的 MV

5、D數(shù), 取其平均值 , 換算成 /mm2。統(tǒng)計(jì)學(xué)方式采納 統(tǒng)計(jì)軟件 , 不同組間比較做t 查驗(yàn)。2 結(jié) 果DCIS 微血管的形態(tài)在 DCIS中，間質(zhì) MVD的形態(tài)要緊表現(xiàn)為兩種，一種為 MVD緊靠乳腺導(dǎo)管的基底膜呈項(xiàng)鏈狀散布， 占 58%(圖1A)，另一種為間質(zhì)彌散散布，占 52%(圖 1B)，34%兩種形態(tài)共存。DCIS 中 MVD和其他預(yù)后因子的相關(guān)性MVD 隨著 Van Nuys分類級(jí)別的增高而明顯增加，高核分級(jí)和非高核分級(jí)之間有顯著性不同(P<,而非高核分級(jí)組的Van Nuys 1 組和 2 組之間沒(méi)有顯著性不同(P=;ER、PR 陰性組的 MVD密度明顯高于 ER、PR

6、陽(yáng)性組 (P<HER 2 陽(yáng)性組明顯高于陰性組 (P< 。詳見(jiàn)表 2。表 2 DCIS中 MVD和其他標(biāo)志物的相關(guān)性3 討 論任何實(shí)體瘤的生長(zhǎng)都必需依托血管生成進(jìn)程，新生血管在實(shí)體瘤的局部生長(zhǎng)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移方面都起著重要的作用，即宿主的內(nèi)皮細(xì)胞增殖、出芽形成新生血管 , 向腫瘤方向生長(zhǎng) , 構(gòu)建腫瘤血運(yùn)通道 , 為其提供營(yíng)養(yǎng)并運(yùn)輸代謝產(chǎn)物。研究顯示腫瘤必需伴有新生血管其生長(zhǎng)才能超過(guò) 12 mm6。對(duì)人乳腺癌標(biāo)本的研究均說(shuō)明DCIS能夠引發(fā)血管生成，并提示血管生成是乳腺癌進(jìn)展的一個(gè)初期行為4， 5。Samejima 等7報(bào)導(dǎo)在 DCIS周圍間質(zhì)中新生血管數(shù)量明顯高于浸潤(rùn)癌

7、， DCIS 和浸潤(rùn)癌間質(zhì)新生血管的數(shù)量明顯高于良性病變和正常乳腺。Guidi 等8通過(guò)對(duì) 55 例 DCIS應(yīng)用第八因子進(jìn)行免疫染色的方式研究，提出 DCIS中兩種要緊微血管形態(tài)： 間質(zhì)彌散形態(tài)和緊貼病變導(dǎo)管基底膜的項(xiàng)鏈狀微血管。 Bose 等 9研究發(fā)覺(jué)項(xiàng)鏈狀新生血管的比率為 80%，Guidi 等的研究其比率為 38%8，有專門(mén)大的不同，可能是由于項(xiàng)鏈狀新生血管診斷標(biāo)準(zhǔn)不同所致。 Engels 等10也應(yīng)用第八因子免疫染色的方式對(duì) 75 例福爾馬林固定、石蠟包埋的標(biāo)本進(jìn)行分析，取得了和 Guidi 相同的結(jié)果，即 DCIS微血管的兩種大體形態(tài)，其中 57%呈現(xiàn)彌散的形態(tài)， 62%呈現(xiàn)項(xiàng)鏈

8、狀形態(tài)， 47%的病例兩種形態(tài)共存，且兩種形態(tài)共存的病例與高核分級(jí)相關(guān)。本研究應(yīng)用 CD34 進(jìn)行免疫染色，發(fā)覺(jué) DCIS中的微血管形態(tài)有兩種，一種為彌散狀態(tài)，另一種為圍繞病變的乳腺導(dǎo)管呈項(xiàng)鏈狀，兩種微血管多并存，和 Guidi 等的結(jié)果類似。 MVD隨著 Van Nuys 分級(jí)的增高而明顯增加，高核分級(jí)和非高核分級(jí)之間有顯著性不同 , 而非高核分級(jí)組的 Van Nuys 1 組和 2 組之間沒(méi)有顯著性不同 (P=。說(shuō)明 DCIS 能夠引發(fā)新生血管，新生血管可能是乳腺癌進(jìn)展進(jìn)程中的初期事件，且和 DCIS的惡性程度相關(guān)，即惡性程度越高， MVD密度越大。提示血管新生可能是 DCIS向浸潤(rùn)性乳腺

9、癌進(jìn)展的必要進(jìn)程。 DCIS 血管新生研究的臨床意義在于血管新生可能是 DCIS 進(jìn)展為浸潤(rùn)性乳腺癌可能性增加的標(biāo)志物，預(yù)示一旦發(fā)生間質(zhì)浸潤(rùn)，其遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的可能性大。鑒定 DCIS的新生血管可能有助于應(yīng)用抗血管新生療法預(yù)防DCIS進(jìn)展為浸潤(rùn)性癌?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1 Weidner microvesseldensityas a prognosticfactorin cancer J.Am J Pathol，1995;147(1):919.2GaspariniG ， Harrisimplicationsofthedetermination of tumor angiogenesis in breast

10、carcinoma:muchmore than a new prognositictool J.J Clin Ocol，1995;13(3):76582.3 Weidner asa predictorof clinicaloutcome in cancerpatientsJ .Hum Pathol ，2000;31(4):4035.4 Guidi AJ， Schnitt Sj， Fischer L,et permeabilityfactorexpressionand angiogenesisinpatientswithductalcarcinoma in situ of the breast5

11、3.J.Cancer ，1997;80(10):19455 Brown LF，Guidi AJ ，Schnitt SJ,et strama formationincarcinomainsitu， invasivecarcinoma ， and metastaticcarcinoma of the breastJ.Clin Cancer Res，1999;5(5):104156.6 Folkman isthe evidence thattumors are angiogenesisdependent J? J Natl Cancer Inst，1990;82(1):46.7proliferati

12、onSamejima N ， Yamazakiintissuesaround thestudy tumoroninthe breastvascular cancerJ.Jpn J Surg，1988;18(3):23542.8 GuidiAJ ， FischerL ， HarrisJR,etdesityanddistribution in ductal carcinoma in situ of the breastJ.JNatl Cancer Inst，1994;86(8):6149.9 Bose S， LesserML， NortonL,etofintraductalcarcinoma J.Arch