重組人促紅細(xì)胞生成素對骨骼肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用

1、重組人促紅細(xì)胞生成素對骨骼肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用         08-07-04 16:22:00     作者：劉亞 蔡錦方 李振貴    編輯：studa20【關(guān)鍵詞】  再灌注損傷    摘  要：目的觀察重組人促紅細(xì)胞生成素(rHuEPO)對肢體骨骼肌缺血再灌注(IR)損傷的保護(hù)作用。方法建立大鼠后肢缺血再灌注模型。40只大鼠隨機(jī)均分為：假手術(shù)組(組)，IR組(組)，IR+

2、生理鹽水組(組)，IR+rHuEPO組(組)。取血漿測定丙二醛(MDA)、肌酸磷酸激酶(CPK)和乳酸脫氫酶(LDH)含量。取骨骼肌標(biāo)本測定髓過氧化酶(MP0)活性、濕重干重比(Wetdry)。結(jié)果組與組比較，血漿和骨骼肌的各項(xiàng)生化指標(biāo)顯著增高(P001)；組血漿及骨骼肌各項(xiàng)測定指標(biāo)較組相比明顯降低(P001)。組和組之間比較，差異無顯著意義。結(jié)論rHuEPO對肢體骨骼肌缺血再灌注損傷有保護(hù)作用。關(guān)鍵詞：再灌注損傷；  骨骼??；  重組人促紅細(xì)胞生成素Protective effect of recombinant human erythropoietin on ische

3、mia/reperfusion injury of rat skeletal muscleAbstract：ObjectiveTo observe the protective effect of recombinant human erythropoietin(rHuEPO）on ischemia/reperfusion(IR）injury of skeletal muscle in the limbs of ratsMethod After establishing the rat model of hind limb ischemia/reperfusion,forty rats wer

4、e divided into 4 groups:sham operation group（Group ),I/R group（Group ),I/R + normal saline treatment group(Group ),I/R + rHuEPO treatment group(Group )The levels of malodialdehy(MDA), creatinephosphokinase(CPK）and lactatedehpdrogesase(LDH）in plasma and myeloperoxidase(MPO）ratio,wet/dry of skeletal m

5、uscle were measured respectivelyResultThe indexes of plasma and skeletal muscle in group were significantly higher than those in group(P001),while the indexes of the group were significantly lower than those in group (P001)， and indexes of group has no difference with those of Group ConclusionThe rH

6、uEPO can protect the skeletal muscle from ischeinia/reperfusion injury in ratsKey words：Reperfusion injury;  Skeletal muscles;  Recombinant human erythropoietin    肢體的創(chuàng)傷、斷肢再植、組織移植以及止血帶的應(yīng)用時間過長均可引起缺血再灌注(IR)損傷。它可影響缺血組織的存活及功能，且可累及遠(yuǎn)隔器官，嚴(yán)重時可引發(fā)多器官功能衰竭而致病人死亡。最近研究發(fā)現(xiàn)促紅細(xì)胞生成素(EPO)是一種多功能

7、營養(yǎng)因子及保護(hù)因子，可減輕脊髓、心肌、腎臟等組織器官的IR損傷13。EPO對肢體骨骼肌IR損傷的影響，目前尚未見有報道。通過本項(xiàng)研究，探討重組人促紅細(xì)胞生成素（rHuEPO）對肢體骨骼肌IR損傷的影響，為臨床應(yīng)用rHuEPO治療肢體骨骼肌IR損傷提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1  材料和方法11  動物分組及處理雄性Wistar大鼠40只，體重(250±20)g(山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院動物實(shí)驗(yàn)中心提供)，隨機(jī)均分為4組：假手術(shù)組(組)，IR組(組)，IR+生理鹽水組(組)，IR+rHuEPO組(組)。動物模型制作：參照文獻(xiàn)4方法制成。1戊巴比妥鈉40 mgkg腹腔麻醉，沿左側(cè)股鞘走

8、行切開皮膚，在8倍手術(shù)顯微鏡下分離股動靜脈，用無創(chuàng)性血管夾夾閉股動脈，股鞘下用張力帶環(huán)扎左側(cè)肢體以阻斷側(cè)支循環(huán)4 h。于再灌注前5 min，組尾靜脈注入650lkg生理鹽水，組尾靜脈注入4 000IUkg rHuEPO(日本麒麟啤酒株式會社制造，國藥準(zhǔn)字S20010076)。、組于再灌注4 h，心臟采血并取左后肢腓腸肌。組僅切開暴露股血管，采血、取材，方法同上。12  檢測指標(biāo)及方法硫代巴比妥酸法測定血漿中丙二醛(MDA)含量，全自動生化分析儀測定血漿中肌酸磷酸激酶(CPK)、乳酸脫氫酶(LDH)。骨骼肌組織勻漿、用MPO測試盒(南京建成生物工程研究所)測定髓過氧化酶(MPO)的活性

9、。取腓腸肌200 mg立即測其濕重，然后于80 恒溫干燥箱中干燥48 h，再測干重，最后計算濕重干重比(Wetdry)。13  統(tǒng)計學(xué)分析數(shù)據(jù)結(jié)果用x-±s表示，行方差分析，均數(shù)間差別比較用LSD檢驗(yàn)。2  結(jié)  果21  血漿標(biāo)本測定項(xiàng)目的變化缺血再灌注組恢復(fù)血流灌注4 h后，組MDA、CPK、和LDH的含量與組相比顯著增高(P001)。以上3項(xiàng)指標(biāo)組與組相比差異無顯著意義(P005)。以上3項(xiàng)指標(biāo)組與組相比降低，差異顯著(P001)。結(jié)果見表1。表1  各組血漿MDA、CPK、LDH的變化(略)注：*組，組，組分別和組比較P001；組和組比較P00122  骨骼肌標(biāo)本測定項(xiàng)目的變化缺血再灌注