馬鬃蛇醇提物對(duì)去卵巢大鼠雌激素水平及血脂的影響

1、馬鬃蛇醇提物對(duì)去卵巢大鼠雌激素水平及血脂的影響                              作者：李上球，趙衛(wèi)杰，李萍，謝金鮮【摘要】  目的研究馬鬃蛇醇提物(CVAE)對(duì)去卵巢大鼠雌激素水平及血脂的影響。方法手術(shù)制備去卵巢大鼠模型。CVAE灌胃21d。用放免法測(cè)定血清E2，F(xiàn)SH水平

2、；用酶法測(cè)定血清TC，TG含量；鏡下觀察子宮內(nèi)膜的組織病改變。結(jié)果CVAE高、低劑量均可顯著升高血清E2水平；CVAE高劑量可降低血清FSH及TC水平，可使大鼠出現(xiàn)動(dòng)情期提前，子宮的臟器系數(shù)增加；鏡下觀察顯示，CVAE高劑量組子宮內(nèi)膜增厚，腺體數(shù)量增多。結(jié)論CVAE可明顯改善去卵巢大鼠的雌激素水平降低，對(duì)大鼠去卵巢后脂質(zhì)代謝紊亂也有一定的改善作用。 【關(guān)鍵詞】  馬鬃蛇 雌二醇 卵泡刺激素 血脂Abstract：ObjectiveTo study the influence of Calotes versicolor Alcohol Extracts(CVAE) on the est

3、rogen level and blood lipid in ovariectomy rats.MethodsThe ovariectomy female rats were made，then were treated with CVAE, i.g, for 21 days. The levels of serum estradiol(E2) and follicle stimulating hormone(FSH) were determined by the radio-immunoassay. The contents of serum total cholesterol(TC) an

4、d triglycerides(TG) were determined by enzyme technology.The histopathological change in mucous membrane was observed with microscope. ResultsThe low and high doses of CVAE significantly enhanced the level of E2. The high dose of CVAE decreased the level of serum FSH and the content of serum TC,made

5、 the phenomenon of rat oestrus be reserved beforehand, and increased the uterine coefficient. The microscopic examination results showed that the endometrium in high dose of CVAE group was proliferated and thickened, the gland was decreased in number.ConclusionCVAE can significantly elevate estrogen

6、 level and improve lipid metabolism disorder.Key words：Calotes versicolor；  Estradiol(E2)；  Follicle stimulating hormone(FSH)；  Blood lipid    馬鬃蛇Calotes versicolor又名鹽蛇，為鬣蜥科動(dòng)物變色樹蜥，主要分布于廣西，具有滋補(bǔ)強(qiáng)壯、祛風(fēng)活血作用，民間常用其浸泡酒或與瘦肉同蒸，用于血虛體弱、腎虛腰痛等癥療效顯著1。研究表明，其對(duì)正常昆明種小鼠有雙相性激素樣作用2，3。本實(shí)驗(yàn)就馬鬃蛇

7、醇提物對(duì)去勢(shì)大鼠雌激素水平及血脂的影響進(jìn)行研究，為其開發(fā)利用提供理論依據(jù)。1  器材1.1  動(dòng)物 雌性健康Wistar大鼠，合格證號(hào):桂醫(yī)動(dòng)字第11005號(hào)。由廣西中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證：SYXK 桂 2003-0001。1.2  藥品 馬鬃蛇60%醇提物，廣西中醫(yī)學(xué)院藥理教研室制備。批號(hào)20040215；己烯雌酚注射液(2 ml×10支 )，上海通用藥業(yè)股份有限公司產(chǎn)品，批號(hào)020403。1.3  試劑 總膽固醇試劑盒，四川省邁克科技有限責(zé)任公司產(chǎn)品，批號(hào)20040426；甘油三酯試劑盒，

8、四川省邁克科技有限責(zé)任公司產(chǎn)品，批號(hào)20040417；卵泡刺激素免疫測(cè)定試劑盒，天津九鼎醫(yī)學(xué)生物工程有限責(zé)任公司產(chǎn)品，批號(hào)RG:1403；雌二醇免疫測(cè)定試劑盒，天津九鼎醫(yī)學(xué)生物工程有限責(zé)任公司產(chǎn)品，批號(hào)RG：4403。1.4  儀器 1/10000分析天平（LIBROR AEU210），日本島津產(chǎn)品；SN695B型智能放免測(cè)量?jī)x，上海原子核研究所日環(huán)儀器一廠產(chǎn)品；MD-100半自動(dòng)生化分析儀，日本產(chǎn)品。2  方法462.1  動(dòng)物分組與處理篩選150180 g成年健康雌性Wistar大鼠，隨機(jī)抽取10只作為空白對(duì)照組，其余按0.8 ml/100 g體重腹

9、腔注射0.4%戊巴比妥鈉溶液麻醉，無菌下行腹腔手術(shù)摘除雙側(cè)卵巢，術(shù)后連續(xù)肌注青霉素鈉（40萬U/kg體重）3 d，1次/d，且用碘酒和75%酒精消毒其手術(shù)部位，直至傷口充分愈合。然后進(jìn)行陰道涂片，固定、染色、顯微鏡下觀察，1次/d，連續(xù)5 d，以檢查卵巢是否摘除完全。取完全不顯性周期的動(dòng)物用于實(shí)驗(yàn)，取40只，隨機(jī)均分為4組，每組10只，一組灌胃生理鹽水作模型對(duì)照組，二組灌胃CVAE（3 g生藥/kg體重）作低劑量組，三組灌胃CVAE(6 g生藥/kg體重)作高劑量組，四組灌胃生理鹽水S.C己烯雌酚(2 mg/kg)為陽性對(duì)照組，另空白對(duì)照組灌胃生理鹽水。各組連續(xù)給藥21 d，1次/d。給藥后第

10、5天每天陰道涂片1次，固定、染色、顯微鏡下觀察，以全部呈現(xiàn)角化上皮細(xì)胞為出現(xiàn)動(dòng)情期。末次給藥后24 h，稱重，取血，測(cè)定血清中卵泡刺激素(follicle stimulating hormone ,FSH)、雌二醇(estradiol,E2)水平。測(cè)定血清中總膽固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)的含量，剖取子宮、腎上腺立即稱重，臟器系數(shù)。子宮稱重后作病理組織形態(tài)學(xué)檢查。2.2  測(cè)定指標(biāo)及方法操作步驟： 涂片，HE染色，顯微鏡下觀察。標(biāo)準(zhǔn)：動(dòng)情間期-涂片有大量白細(xì)胞及少量黏液；動(dòng)情前期-涂片有大量有核上皮細(xì)胞、小量角化上皮細(xì)

11、胞；動(dòng)情期-涂片滿視野角化上皮細(xì)胞、偶有少量有核上皮細(xì)胞。1         2.3  統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 計(jì)量資料以±s 表示，方差齊性采用F檢驗(yàn)，兩組間均數(shù)差異用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。3  結(jié)果3.1  對(duì)成年雌性去卵巢大鼠動(dòng)情期的影響CVAE高劑量可使成年雌性去卵巢大鼠出現(xiàn)動(dòng)情期，與模型對(duì)照組比較有顯著性差異（P<0.05）；低劑量可使大鼠出現(xiàn)動(dòng)情期，但與模型對(duì)照組比較無顯著性差異（P>0.05）。結(jié)果見表1。表1  對(duì)成年雌

12、性去卵巢大鼠動(dòng)情期的影響（略）3.2  對(duì)成年雌性去卵巢大鼠血清卵泡刺激素（FSH）及雌二醇（E2）水平的影響CVAE高、低劑量均可明顯提高血清中E2的濃度，與模型組比較有非常顯著性差異（P<0.01或P<0.05）。高劑量負(fù)反饋降低血清中FSH水平，與模型組比較有顯著性差異（P<0.05）。低劑量有負(fù)反饋降低血清中FSH水平的趨勢(shì)，但與模型組比較無顯著性差異（P>0.05）。結(jié)果見表2。表2  對(duì)成年雌性去卵巢大鼠血清雌激素水平的影響（略）3.3  對(duì)成年雌性去卵巢大鼠血清中總膽固醇（TC）和甘油三酯(TG)含量的影響CVAE高劑量可明顯

13、降低血清中TC的含量，與模型組比較有顯著性差異（P<0.05）。高、低劑量組可明顯降低血清中TG的含量，但是與模型組比較無顯著性差異（P>0.05）。結(jié)果見表3。表3  對(duì)成年雌性去卵巢大鼠血清中TC及TG含量的影響（略）3.4  對(duì)成年雌性去卵巢大鼠附性器官重量的影響CVAE高低劑量對(duì)成年雌性去卵巢大鼠子宮具有增重作用，與模型組比較有顯著性差異（P<0.05），對(duì)腎上腺有增重的趨勢(shì)但差異不顯著（P>0.05），低劑量對(duì)子宮、腎上腺有增重的趨勢(shì)，但與模型對(duì)照組比較無顯著性差異（P>0.05）。結(jié)果見表4。表4  對(duì)成年去卵巢雌性大鼠附

14、性器官重量的影響（略）3.5  對(duì)成年雌性去卵巢大鼠子宮內(nèi)膜組織形態(tài)學(xué)的影響結(jié)果顯示，正常對(duì)照組呈正常增殖期子宮。模型對(duì)照組子宮內(nèi)膜較正常對(duì)照組萎縮、變薄，腺體數(shù)量減少。CVAE高低劑量組子宮內(nèi)膜增生、增厚，腺體數(shù)量增多。己烯雌酚組子宮內(nèi)膜增生，局部增厚，腺體數(shù)量稍增多,局灶腺體囊性擴(kuò)張。4 討論雌性大鼠切除卵巢后，首先是雌激素缺乏，隨后附性器官萎縮。由于切除卵巢后失去了雌激素對(duì)垂體的負(fù)反饋調(diào)節(jié)，垂體前葉分泌的FSH增多。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，大鼠切除卵巢后血清E2水平與正常對(duì)照組比較明顯降低，灌胃CVAE 21d后，CVAE高劑量能明顯提高血清E2水平，能使去卵巢大鼠出現(xiàn)動(dòng)情期，改善切除

15、卵巢后子宮的萎縮，使子宮、腎上腺重量增加，提示馬鬃蛇可能通過下丘腦垂體性腺軸來調(diào)節(jié)雌性大鼠體內(nèi)E2水平，從而促進(jìn)性器官的生長(zhǎng)發(fā)育。雌性大鼠切除卵巢后，體內(nèi)雌激素水平下降，表現(xiàn)為腹部脂肪堆積、血膽固醇增加、肝臟脂肪增加、子宮萎縮等，并認(rèn)為該模型可以模擬許多婦女絕經(jīng)期疾病的病理變化7。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，馬鬃蛇醇提物可明顯降低血清中總膽固醇的含量，對(duì)血清中甘油三酯的含量有降低趨勢(shì)。綜上所述，CVAE可升高去卵巢成年雌性大鼠血清中E2水平，負(fù)反饋抑制血清中FSH水平；可增加大鼠子宮、腎上腺重量，改善大鼠去卵巢后萎縮的子宮；同時(shí)可明顯降低血清中總膽固醇的含量。表明CVAE可使大鼠去卵巢后低下的雌激素水平升高；同時(shí)，對(duì)去卵巢后大鼠脂質(zhì)代謝紊亂有一定的改善作用?！尽?#160; 1藥用動(dòng)物志協(xié)作組.中國藥用動(dòng)物志,第2冊(cè)M. 天津：天津技術(shù)出版社，1983：303.2謝金鮮,楊 柯,黃智波.馬鬃蛇醇提物性激素樣作用實(shí)驗(yàn)研究J.新中醫(yī)，1999,31(2)：67.3謝金鮮，李上球，李 萍.馬鬃蛇醇提物對(duì)大鼠血清性激素水平的影響